一种藻蓝蛋白肽在制备抗肺纤维化药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种藻蓝蛋白肽在制备抗肺纤维化药物中的应用，其氨基酸序列为PGSSVAVGVGKMKEAALAIV。藻蓝蛋白肽能够明显改善肺纤维化模型小鼠的纤维化程度，保护肺泡结构，降低纤维化过程中的炎症反应，减少肺组织中的胶原沉积。体外实验结果证明，藻蓝蛋白肽能够显著下调TGFβ1诱导的人肺腺癌基底上皮细胞A549的胶原蛋白表达和上皮间充质转化；显著抑制人胚肺成纤维细胞HFL‑1的增殖和向肌成纤维细胞的转化。体内外实验结果均证明藻蓝蛋白肽具有显著的抗肺纤维化功效，具有作为治疗或改善肺纤维化疾病药物的前景。

Application of phycocyanin peptide in preparation of anti pulmonary fibrosis drugs

【技术实现步骤摘要】
一种藻蓝蛋白肽在制备抗肺纤维化药物中的应用
本专利技术涉及一种藻蓝蛋白肽，具体涉及一种具有抗肺纤维化作用的藻蓝蛋白肽及其在制备防治肺纤维化药物和保健品中的应用。
技术介绍
肺纤维化（pulmonaryfibrosis，PF），是一种原因不明、以弥漫性肺泡炎和肺泡结构紊乱最终导致肺间质纤维化为特征的疾病。临床表现为呼吸困难逐渐加重，伴有刺激性干咳，偶有痰血、体力衰弱、食欲减退、体质量减轻、消瘦等症状。病情进一步发展，最终因呼吸衰竭而死。现阶段PF患者对传统治疗药物反应欠佳，其发病率及死亡率逐年增高,且生存期较短,愈后极差,几乎与恶性肿瘤无异。目前治疗用的常规抗肺炎药物如泼尼松、地塞米松等皮质类激素，与安慰剂对比均未能使肺纤维化患者临床症状得到客观改善，疗效欠佳，且存在严重的副作用[1]。而近些年上市的新药尼达尼布、吡非尼酮等，虽能在一定程度上减缓病程，但存在胃肠道(恶心、腹痛、腹泻)以及光敏反应、神经系统异常、伴随出血风险等严重副作用[2-3]，因此寻找防治肺纤维化安全有效的药物，一直是国内外药物研究的热点。多肽主要通过蛋白水解降解和肾过滤来清除，水解的产物为氨基酸，因此一般不考虑多肽药物的代谢产物是否有毒性。小分子多肽易于合成改造和优化组合，能很快确定其药用价值，因而在临床应用上具有非常重要的开发价值[4-5]。蓝藻藻蓝蛋白(C-phycocyanin，C-PC)是一种存在于蓝藻细胞内的光合色素，能高效捕获光能，在钝顶螺旋藻中含量较高，具有较强的抗炎症、抗氧化、清除自由基、抗肿瘤等生理活性。已有文献报道藻蓝蛋白具有抗肺纤维化作用[6-7]，本专利技术的藻蓝蛋白肽来源于蓝藻藻蓝蛋白的β亚基，具有20个氨基酸残基，氨基酸序列为PGSSVAVGVGKMKEAALAIV，目前尚未见有其抗肺纤维化活性的报道。【参考文献】1.LiZ,PengSC,KangJ,etal.Effectofcorticosteroidsupontheprognosisofidio-pathicpulmonaryfibrosis[J].ZhonghuaYiXueZaZhi,2010,29(90):804-807.2.Rodríguez-Portal,JoséAntonio.EfficacyandSafetyofNintedanibfortheTreatmentofIdiopathicPulmonaryFibrosis:AnUpdate[J].DrugsinR&D,2017.3.SkLdCM,BendstrupE,MyllRniemiM,etal.Treatmentofidiopathicpulmonaryfibrosis:apositionpaperfromaNordicexpertgroup[J].JournalofInternalMedicine,2016.4.VliegheP,LisowskiV,MartinezJ,etal.Synthetictherapeuticpeptides:scienceandmarket.[EB/OL].Drugdiscoverytoday:2010:40-56.5.FairlieDP,CraikDJ,LirasS,etal.Thefutureofpeptide-baseddrugs.[J].ChemicalBiology&DrugDesign,2013,81(1):136-147.6.孙英新,张娟,于功昌,etal.钝顶螺旋藻藻蓝蛋白抗百草枯诱导大鼠肺纤维化的研究[J].中华劳动卫生职业病杂志,2012,30(9):650-655.7、LiCC,YuY,LiWJ,etal.PhycocyaninattenuatespulmonaryfibrosisviatheTLR2-MyD88-NF-κBsignalingpathway[J].SciRep,2017,7(1),5843
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种藻蓝蛋白肽的新用途：用于制备防治肺纤维化药物和保健品，或作为防治肺纤维化药物和保健品的有效成分，或利用藻蓝蛋白肽作为防治肺纤维化药物前体改造，或与治疗肺纤维化药物联合应用治疗肺纤维化。为解决上述问题，本专利技术所采用的技术方案如下：一种藻蓝蛋白肽在制备防治肺纤维化药物和保健品中的应用。一种藻蓝蛋白肽，具有如SEQIDNO：1所示的氨基酸序列，即PGSSVAVGVGKMKEAALAIV,可采用现有
常规方法对藻蓝蛋白肽进行修饰。所述的藻蓝蛋白肽可以通过合成或其它方法产生。所述的多肽可以通过多种给药方式防治肺纤维化，包括静脉、皮下、肌肉、腹腔、口服给药。本专利技术的有益效果在于：1、本专利技术所述的藻蓝蛋白肽首次发现能有效抑制肺纤维化的发生发展，具有抗肺纤维化作用。2、本专利技术所说的藻蓝蛋白肽的医药用途是用于制备防治肺纤维化药物和保健品，或作为防治肺纤维化药物和保健品的有效成分，或利用藻蓝蛋白肽作为防治肺纤维化药物前体改造，或与治疗肺纤维化药物联合应用治疗肺纤维化。3、本专利技术所述的防治肺纤维化的药物、保健品含有藻蓝蛋白肽，能够制成粉剂或注射针剂或口服液等多种形式，可以单独作为成品使用，也可以作为有效成分与生理盐水、葡萄糖溶液等佐剂配合成组合物，还可以与目前使用的治疗肺纤维化药物联合使用。下面结合附图及具体实施方式对本专利技术作进一步详细说明。附图说明图1藻蓝蛋白肽纯度鉴定（A）及分子量鉴定（B）。图2各组实验小鼠肺组织切片(HE染色×200)。A：正常组；B：模型组；C：低剂量组（藻蓝蛋白肽1mg/Kg）；D：中剂量组（藻蓝蛋白肽3mg/Kg）；E：高剂量组（藻蓝蛋白肽9mg/Kg）；F：阳性药组；G：藻蓝蛋白组。图3各组实验小鼠肺组织切片(Masson染色×200)。A：正常组；B：模型组；C：低剂量组（藻蓝蛋白肽1mg/Kg）；D：中剂量组（藻蓝蛋白肽3mg/Kg）；E：高剂量组（藻蓝蛋白肽9mg/Kg）；F：阳性药组；G：藻蓝蛋白组。图4Western-bloting（WB）检测各组实验小鼠肺组织中IL6、TNF-α、ColI、α-SMA和TGF-β1蛋白表达量，其中A：WB实验图谱；B：IL6/GADPH；C：TNF-α/GADPH;D：ColI/GADPH；E：α-SMA/GADPH；F：TGF-β1/GADPH蛋白表达量统计分析结果。图5藻蓝蛋白肽对肺纤维化小鼠肺组织中羟脯氨酸含量的影响。图6藻蓝蛋白肽对TGF-β1诱导的A549细胞形态的影响。A：正常组；B：模型组；C：低剂量组（藻蓝蛋白肽10µM）；D：高剂量组（藻蓝蛋白肽30µM）。图7藻蓝蛋白肽对TGF-β1诱导的A549细胞胶原蛋白CollagenI表达的影响。图8Western-bloting（WB）检测藻蓝蛋白肽对TGF-β1诱导的A549细胞上皮间充质转化相关标志性蛋白表达量。A:WB实验图谱；B:N-cad本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种藻蓝蛋白肽在制备预防或治疗肺纤维化疾病药物和保健品中的应用，其特征在于所述的藻蓝蛋白肽的序列为：Pro-Gly-Ser-Ser-Val-Ala-Val-Gly-Val-Gly-Lys-Met-Lys-Glu-Ala-Ala-Leu-Ala-Ile-Val。/n

【技术特征摘要】
1.一种藻蓝蛋白肽在制备预防或治疗肺纤维化疾病药物和保健品中的应用，其特征在于所述的藻蓝蛋白肽的序列为：Pro-Gly-Ser-Ser-Val-Ala-Val-Gly-Val-Gly-Lys-Met-Lys-Glu-Ala-Ala-Leu-Ala-I...

【专利技术属性】
技术研发人员：欧瑜，李启豪，张昭宇，裴欣，孙仲侃，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32