评估HCP检测用多克隆抗体覆盖率的设备制造技术

本实用新型专利技术提供一种评估HCP检测用多克隆抗体覆盖率的设备，所述评估HCP检测用多克隆抗体覆盖率的设备包括将所述HCP检测用多克隆抗体固定于固体基材的固定装置；将固定有所述HCP检测用多克隆抗体的固体基材与HCP样品接触的接触装置；使得所述多克隆抗体与所结合的蛋白解离的解离装置；检测与所述多克隆抗体特异性结合的蛋白的数量A以及HCP样品中蛋白的数量B的检测装置；和计算数量A与数量B之比，得到HCP检测用多克隆抗体的覆盖率的计算装置。采用本实用新型专利技术的评估HCP检测用多克隆抗体覆盖率的设备能够操作简便、条件可控、结果可靠地评估HCP检测用多克隆抗体的覆盖率。

Equipment to evaluate the coverage of polyclonal antibodies for HCP detection

【技术实现步骤摘要】
评估HCP检测用多克隆抗体覆盖率的设备
本技术涉及检测设备；具体地说，本技术涉及评估HCP检测用多克隆抗体覆盖率的设备。
技术介绍
通过宿主细胞(如细菌、酵母或哺乳动物、昆虫或植物细胞系)的重组蛋白表达技术已在许多生物制药产品中得到广泛的应用。在这类产品的生产过程中，宿主细胞来源的蛋白质(Hostcellproteins，HCP)会不可避免地引入生产工艺流程中，从而存在于最终的药品中。研究发现生物制药产品中残留HCP的主要危害是其有可能诱导机体产生抗HCP抗体，这些抗体可能会引起患者产生临床症状。此外，HCP可能作为免疫佐剂，诱导产生抗药抗体，影响药物安全性或有效性，因此全球各个国家的监管机构对HCP残留都有严格的限量要求。目前本领域常规采用HCPELISA检测试剂盒检测HCP残留。为验证HCPELISA检测试剂盒中多克隆抗体的覆盖率，本领域已经开发了各种技术和设备。然而，这些技术和设备均各自存在明显的不足之处。例如，操作复杂、时间成本和经济成本非常高，在实际运用中存在误判；检测过程受操作影响大；印迹和凝胶之间的点很难匹配并且无法标准化等等缺点。
技术实现思路
本技术的目的在于提供一套评估HCP检测用多克隆抗体覆盖率的设备，采用这种设备评估HCP检测用多克隆抗体的覆盖率能够实现操作简便、条件可控、结果可靠等技术效果，从而克服现有技术中的种种不足之处。为此，本技术提供一种评估HCP检测用多克隆抗体的覆盖率的设备，所述设备包括：(1)用于将所述HCP检测用多克隆抗体固定于固体基材的固定装置；(2)将固定有所述HCP检测用多克隆抗体的固体基材与HCP样品接触的接触装置；(3)使得所述多克隆抗体与所结合的蛋白解离的解离装置；(4)检测与所述多克隆抗体特异性结合的蛋白的数量A以及HCP样品中蛋白的数量B的检测装置；和(5)计算数量A与数量B之比，得到HCP检测用多克隆抗体的覆盖率的计算装置。在具体的实施方式中，所述固定装置包括盛放所述固体基材和所述多克隆抗体的容器以及将所述多克隆抗体固定于固体基材的器件。在优选的实施方式中，将所述多克隆抗体固定于固体基材的器件包括漩涡震荡器、磁力架、旋转混匀仪。在具体的实施方式中，所述固体基材包括但不限于：磁珠、晶片、琼脂糖珠、树脂微球；优选磁珠。在具体的实施方式中，所述固定装置中还任选包括在所述HCP检测用多克隆抗体固定于固体基材后封闭所述固体基材的器件。在优选的实施方式中，封闭所述固体基材的器件是指将牛血清白蛋白、Tris-HCl缓冲液或磷酸缓冲液等与固定有HCP检测用多克隆抗体的固体基材进行孵育的器件。在具体的实施方式中，所述接触装置包括但不限于用于容纳所述固体基材与HCP样品的容器、转移所述固体基材与HCP样品的器件以及将所述固体基材与HCP样品接触的器件。在具体的实施方式中，所述接触装置中还任选包括在所述多克隆抗体与HCP样品中的蛋白发生特异性结合后，除去非特异性结合蛋白的器件。在优选的实施方式中，所述除去非特异性结合蛋白的器件是指利用PBS缓冲液洗涤所述固体基材以便除去非特异性结合的蛋白的器件。在具体的实施方式中，所述解离装置包括旋转混匀仪、漩涡震荡器、磁力架。在具体的实施方式中，所述检测装置包括但不限于实施2D电泳、2D-DIGE、HPLC、质谱、UPLC-MS的器件。在具体的实施方式中，所述计算装置是计算机，从而能够计算数量A和总数量B之比。在具体的实施方式中，所述设备还可以任选包括输出覆盖率的输出装置。在具体的实施方式中，所述检测装置是检测与所述多克隆抗体特异性结合的蛋白的数量A、HCP样品中蛋白的数量B和与所述多克隆抗体特异性结合的蛋白以及HCP样品中蛋白之间具有相同的分子量和等电点的蛋白的数量C的装置；和相应地，所述计算装置是根据以下公式计算得到HCP检测用多克隆抗体的覆盖率非装置：A/(A+B-C)。应理解，在本专利技术范围内中，本专利技术的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。附图说明图1显示了本技术的设备的示意图；图2显示了本技术的进一步优化的实施方式的示意图；和图3显示了利用本技术的设备评估HCP检测用多克隆抗体的覆盖率的流程示意图。具体实施方式专利技术人将特定的装置构成一套评估HCP检测用多克隆抗体的覆盖率的设备，该设备能够操作简便、条件可控、结果可靠地评估HCP检测用多克隆抗体的覆盖率，并且在各次操作之间能够具备很高的一致性。所述设备包括：用于将所述HCP检测用多克隆抗体固定于固体基材的固定装置；将固定有所述HCP检测用多克隆抗体的固体基材与HCP样品接触的接触装置；使得所述多克隆抗体与所结合的蛋白解离的解离装置；检测与所述多克隆抗体特异性结合的蛋白的数量A以及HCP样品中蛋白的数量B的检测装置；和计算数量A与数量B之比，得到HCP检测用多克隆抗体的覆盖率的计算装置。术语解释和定义HCP本文所述的“HCP”、“宿主细胞蛋白”具有相同的含义，均是指宿主细胞来源的蛋白质。残留HCP有可能影响产品的质量、安全性和有效性。生物制品中HCP的主要问题是可能诱导机体产生抗HCP抗体，而这些抗体可能会引起患者产生临床症状。此外，HCP可能作为免疫佐剂诱导产生抗药抗体，影响药物安全性或有效性。HCP对产品本身的质量也有直接的影响。HCP检测方法夹心法免疫测定是最常用的HCP检测方法，包括比色、电化学发光(ECL)、化学发光、放射性等方式。目前生物制品行业多以商业化的通用型HCPELISA试剂盒(如CygnusTechnologies)来检测产品中的宿主蛋白残留。然而，目前通用型商品化HCPELISA试剂盒中的多克隆抗体对宿主残留蛋白的特异性问题很难进行评估。若商品化ELISA试剂盒中的多克隆抗体特异性和适用性不够高，则会带来漏检HCP的风险，从而对生物制品质量安全带来风险。目前，本领域常规采用抗体亲和提取方法或2D-WB法。然而，抗体亲和提取方法存在抗HCP树脂制备困难、工艺复杂、结果难以重复、抗体使用量大，时间成本和经济成本均非常高、高亲和力的HCP难以洗脱导致覆盖率偏低，低浓度蛋白可能漏检等缺陷。而二维聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白质免疫印迹(2DSDS-PAGE/Westernblot，2D-WB)也存在HCP抗原因变性而无法代表ELISA检测中所见的抗原、转膜过程造成蛋白丢失、检测过程受操作影响大、检测结果重复性差、印迹和凝胶之间的点很难匹配并且没有标准化等缺陷。本技术的评估HCP检测用多克隆抗体的覆盖率的设备为克服现有技术中的缺陷，专利技术人创造性地将特定的装置构成一套评估HCP检测用多克隆抗体的覆盖率的设备，现在结合附图进一步说明本技术：...

【技术保护点】
1.一种评估HCP检测用多克隆抗体覆盖率的设备，其特征在于，所述设备包括：/na.用于将所述HCP检测用多克隆抗体固定于固体基材的固定装置；/nb.将固定有所述HCP检测用多克隆抗体的固体基材与HCP样品接触的接触装置；/nc.使得所述多克隆抗体与所结合的蛋白解离的解离装置；/nd.检测与所述多克隆抗体特异性结合的蛋白的数量A以及HCP样品中蛋白的数量B的检测装置；和/ne.计算数量A与数量B之比，得到HCP检测用多克隆抗体的覆盖率的计算装置。/n

【技术特征摘要】
1.一种评估HCP检测用多克隆抗体覆盖率的设备，其特征在于，所述设备包括：
a.用于将所述HCP检测用多克隆抗体固定于固体基材的固定装置；
b.将固定有所述HCP检测用多克隆抗体的固体基材与HCP样品接触的接触装置；
c.使得所述多克隆抗体与所结合的蛋白解离的解离装置；
d.检测与所述多克隆抗体特异性结合的蛋白的数量A以及HCP样品中蛋白的数量B的检测装置；和
e.计算数量A与数量B之比，得到HCP检测用多克隆抗体的覆盖率的计算装置。


2.如权利要求1所述的评估HCP检测用多克隆抗体覆盖率的设备，其特征在于，所述固定装置包括盛放所述固体基材和所述多克隆抗体的容器以及将所述多克隆抗体固定于固体基材的器件。


3.如权利要求1或2所述的评估HCP检测用多克隆抗体覆盖率的设备，其特征在于，所述固定装置中还包括在所述HCP检测用多克隆抗体固定于固体基材后封闭所述固体基材的器件。


4.如权利要求1所述的评估HCP检测用多克隆抗体覆盖率的设备，其特征在于，所述接触装置包括用于容纳所述固体基材与HCP样品的容器、转移所述固体基材与HCP样品的器件以及将所述固体基材与HCP样品接触的器件。


5.如权利要求1或4所述的评估HCP检测用多...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨志行，豆敏华，富金金，史斐斐，邹佳，
申请(专利权)人：中国科学院上海生命科学研究院湖州营养与健康产业创新中心，湖州申科生物技术有限公司，
类型：新型
国别省市：浙江;33