一种针叶樱桃的破壁方法技术

本发明专利技术涉及一种植物破壁方法，公开了一种针叶樱桃的破壁方法，包括步骤：将针叶樱桃破碎后在pH5.5～7的磷酸盐缓冲液中浸泡24h，加入果胶酶进行酶解，取沉淀真空冷冻干燥，得针叶樱桃单细胞；将所述针叶樱桃单细胞中加入pH7.4～8.0的磷酸盐缓冲液混匀，使得细胞溶胀；向溶胀后的针叶樱桃单细胞中加入无水乙醇，在二氧化碳氛围下加压，并保持一定时间后瞬间释放压力，得到含有破壁针叶樱桃细胞的溶液。本发明专利技术克服了针叶樱桃破壁效率较低，使得有效成分的提取效率较低，造成原料浪费的缺陷，破壁效率相较于现有的破壁方法而言明显提升，从而使维生素C、蛋白质、芦丁及烟酰胺等的提取率得到了较大的提高。

A method of breaking the wall of acerola cherry

【技术实现步骤摘要】
一种针叶樱桃的破壁方法
本专利技术涉及一种植物的破壁方法，尤其涉及一种针叶樱桃的破壁方法。
技术介绍
20世纪初，针叶樱桃(MalpighiaemarginataD.C.)由热带美洲传至美国夏威夷，后经印度、东南亚各国开始在世界热带及亚热带地区广泛传播，在巴西的东北部的沙地里，有许多种植的和野生的巴西大樱桃树，现巴西已经成为最大的针叶樱桃种植国和出口国。针叶樱桃富含维生素C，每100克果中维C含量达1677毫克，是柠檬的31倍，草莓的27倍，猕猴桃的18倍，也是被认为维生素C极高的番石榴的7倍，是名副其实的“天然维生素C之王”之一，同时还含有维A、维B1、维B2、维B3，铁、钙等元素，还含有蛋白质、糖、芦丁及烟酰胺等。维生素C是维持人体生命不可欠缺的重要成份，它能够防感冒，防坏血病，改善人体抵抗能力，对美容以及癌症有一定功效。在保健、饮料、美容方面有广泛的应用。芦丁有维生素P样作用和抗炎作用，能降低(如芥子油)对动物眼睛或皮肤引起的炎症，有强烈的抗氧性，把芦丁加入到富含溶酶体的匀浆内，能抑制类脂质过氧化物的形成。能强烈吸收在280～335nm范围内的紫外线，可用于防晒增白型化妆品,也可用作食用抗氧化剂和营养增强剂等。烟酰胺是维生素B3的一种衍生物，也是美容皮肤科学领域公认的皮肤抗老化成份，其在皮肤抗老化方面最重要的功效是减轻和预防皮肤在早期衰老过程中产生的肤色黯淡、发黄。另外，烟酰胺也可以修复受损的角质层脂质屏障，提高皮肤抵抗力。由于针叶樱桃中的维生素C含量较高，使得针叶樱桃中维生素C的提取相较于其他的水果而言更加方便容易。但是现有的针叶樱桃在提取维生素C的过程中其提取率不高，水提液中提取的维生素C的含量最高仅占针叶樱桃总维生素C的70％～75％，另有大约20％以上的维生素C在提取过程中被浪费。例如专利申请号为CN201710959494.X的一种以针叶樱桃提取物、雨生红球藻和鱼胶原蛋白肽为原料的美容抗衰老食品及其制备方法，其在技术方案中记载了针叶樱桃的提取物的制备方法，其经过水提、过滤、真空浓缩、减压干燥，粉碎过筛即得。但是这种提取方法并不能对每一个针叶樱桃细胞进行破壁，使得无法完全提取其中的维生素C，在水提过滤之后的滤渣中依然含有较多的维生素C，因此维生素C的提取效率较低。
技术实现思路
本专利技术是为了克服现有技术中的针叶樱桃在提取其中的有效成分时，破壁效率较低，使得有效成分的提取效率较低，造成原料的浪费；因此本专利技术提供了一种针叶樱桃破壁的方法，本方法能够使得破壁率大大提升，从而为提升维生素C的提取率提供了可能，同时也会极大的提高针叶樱桃中蛋白质、芦丁以及烟酰胺的提取率。为实现上述专利技术目的，本专利技术通过以下技术方案实现：一种针叶樱桃的破壁方法，包括以下步骤：S1、细胞离析：将针叶樱桃破碎成2mm～3mm的碎块，在pH值为5.5～7的磷酸盐缓冲液中浸泡24h，然后加入果胶酶，30～40℃、30～80rpm搅拌酶解3～6h，所得酶解物离心取沉淀，真空冷冻干燥，得到针叶樱桃单细胞；其中，所述针叶樱桃与磷酸盐缓冲液的质量比为1：(5～20)；所述果胶酶的添加量为针叶樱桃质量的0.1％～0.5％，所述果胶酶的酶活为5万U/g；S2、细胞溶胀：将步骤S1所述针叶樱桃单细胞加入pH值为7.4～8.0的磷酸盐缓冲液混匀，静置，使缓冲液充分进入针叶樱桃单细胞溶胀，得到含有溶胀的针叶樱桃单细胞的溶液；其中，所述磷酸盐缓冲液的添加量为所述干燥针叶樱桃单细胞质量的25％以上；S3、压力破壁：将步骤S2所述含有溶胀的针叶樱桃单细胞的溶液中加入无水乙醇至液体含量为步骤S2所述干燥针叶樱桃单细胞质量的45％～55％，在二氧化碳氛围下加压，压力为12～28MPa，加压保持时间为10～30min，然后释放压力，释压时间0.1s，得含有破壁针叶樱桃细胞的溶液。优选方式下，步骤S1所述取沉淀具体为：将所述酶解物在4000～5000rpm离心10～30min，取沉淀；所述真空冷冻干燥的条件为：-50℃、真空度10Pa。优选方式下，步骤S2所述静置时间为10～30min；所述磷酸盐缓冲液的添加量为所述干燥针叶樱桃单细胞质量的25％～40％。优选方式下，所述针叶樱桃的破壁方法，包括步骤：S1、细胞离析：将针叶樱桃用打浆机破碎成2mm～3mm的碎块，加入其20倍质量的pH值为7的磷酸盐缓冲液，浸泡24h，然后加入所述针叶樱桃质量0.5％、酶活为5万U/g的果胶酶，80rpm、40℃搅拌酶解6h，所得酶解物在5000rpm下离心30min，取沉淀；将所述沉淀置于-50℃、真空度10Pa的条件下，真空冷冻干燥，得到干燥针叶樱桃单细胞；S2、细胞溶胀：取步骤S1所述干燥针叶樱桃单细胞100g，加入40g、pH值为8.0的磷酸盐缓冲液，混合均匀后静置30min，使得细胞吸收溶胀，得含有溶胀的针叶樱桃单细胞的溶液；S3、压力破壁：将步骤S2所述含有溶胀的针叶樱桃单细胞的溶液中加入15g无水乙醇，使得液体含量为步骤S2所述干燥针叶樱桃单细胞质量的55％，在二氧化碳氛围下加压，压力为28MPa，加压保持时间为30min，然后在0.1s内瞬间释放压力，得含有破壁针叶樱桃细胞的溶液。现有针叶樱桃破壁技术中，通常第一步是将针叶樱桃进行研磨，使得细胞中的有效成分释放出来，但是由于机械研磨无法使得每一个细胞的细胞壁进行破壁，使得没有破壁的针叶樱桃中的有效成分无法充分提取，从而造成了浪费。因此本专利技术中的针叶樱桃的破壁方法第一步的目的在于将细胞打散，使原本成为一体的针叶樱桃相互分离成为针叶樱桃单细胞。由于植物细胞的细胞壁与相邻的细胞的细胞壁之间通过胞间层固定连接，胞间层其主要成分为果胶，因此本专利技术采用果胶酶将细胞胞间层中的果胶分解，从而相邻的细胞之间便没有进一步的连接关系，从而更加容易分散为单个细胞。将单个针叶樱桃细胞冷冻烘干后再加入微碱性缓冲液(即步骤S2所述pH值为7.4～8.0的磷酸盐缓冲液)，能够让针叶樱桃细胞溶胀，溶胀后具有以下作用：(1)使细胞壁软化易于破碎；(2)加入微碱性缓冲液后，其在第三步中加入的二氧化碳能够在高压的作用下更加容易地溶解于细胞中的缓冲液，使得细胞中的含气量大大提升。当密闭容器在瞬间释压后，细胞中原本溶解的二氧化碳能够迅速释放，冲破细胞壁，使得每一个细胞的细胞壁能够在同时破坏。同时，本专利技术中在步骤(3)中还添加了一定量的无水乙醇，由于乙醇的沸点较低，其在释压后会迅速的汽化，从而进一步的使得细胞壁的破坏更加彻底。本专利技术中在果胶酶催化过程中需要进行缓慢的搅拌，其原因在于过快的搅拌会造成对针叶樱桃细胞的剪切，从而在这一步骤中出现细胞破损，使得细胞中的有效成分在这一步骤中浪费，经过试验，当搅拌速率在30～80rpm下即能够使得针叶樱桃单细胞有效分离，又能够使得单细胞不会被剪切破损。本专利技术中使用微碱性缓冲液的目的如下：(1)提升二氧化碳在针叶樱桃中的溶解量；(2)尽可能的防止针叶樱桃中的有效成分与失活。经过试验，本专利技术中当pH值为7.本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种针叶樱桃的破壁方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、细胞离析：将针叶樱桃用破碎成2～3mm的碎块，在pH值为5.5～7的磷酸盐缓冲液中浸泡24h，然后加入果胶酶，30～40℃、30～80rpm搅拌酶解3～6h，所得酶解物离心取沉淀，真空冷冻干燥，得到针叶樱桃单细胞；其中，所述针叶樱桃与所述磷酸盐缓冲液的质量比为1:(5～20)；所述果胶酶的添加量为所述针叶樱桃质量的0.1％～0.5％，所述果胶酶的酶活为5万U/g；/nS2、细胞溶胀：将步骤S1所述针叶樱桃单细胞加入pH值为7.4～8.0的磷酸盐缓冲液混匀，静置，得到含有溶胀的针叶樱桃单细胞的溶液；其中，所述磷酸盐缓冲液的添加量为所述干燥针叶樱桃单细胞质量的25％以上；/nS3、压力破壁：将步骤S2所述含有溶胀的针叶樱桃单细胞的溶液中加入无水乙醇至液体含量为步骤S2所述干燥针叶樱桃单细胞质量的45％～55％，在二氧化碳氛围下加压，压力为12～28MPa，加压保持时间为10～30min，然后释放压力，释压时间0.1s，得含有破壁针叶樱桃细胞的溶液。/n

【技术特征摘要】
1.一种针叶樱桃的破壁方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、细胞离析：将针叶樱桃用破碎成2～3mm的碎块，在pH值为5.5～7的磷酸盐缓冲液中浸泡24h，然后加入果胶酶，30～40℃、30～80rpm搅拌酶解3～6h，所得酶解物离心取沉淀，真空冷冻干燥，得到针叶樱桃单细胞；其中，所述针叶樱桃与所述磷酸盐缓冲液的质量比为1:(5～20)；所述果胶酶的添加量为所述针叶樱桃质量的0.1％～0.5％，所述果胶酶的酶活为5万U/g；
S2、细胞溶胀：将步骤S1所述针叶樱桃单细胞加入pH值为7.4～8.0的磷酸盐缓冲液混匀，静置，得到含有溶胀的针叶樱桃单细胞的溶液；其中，所述磷酸盐缓冲液的添加量为所述干燥针叶樱桃单细胞质量的25％以上；
S3、压力破壁：将步骤S2所述含有溶胀的针叶樱桃单细胞的溶液中加入无水乙醇至液体含量为步骤S2所述干燥针叶樱桃单细胞质量的45％～55％，在二氧化碳氛围下加压，压力为12～28MPa，加压保持时间为10～30min，然后释放压力，释压时间0.1s，得含有破壁针叶樱桃细胞的溶液。


2.根据权利要求1所述针叶樱桃的破壁方法，其特征在于，步骤S1所述取沉淀具体为：将所述酶解物在4000～5000rpm离心10～30min，取沉淀。


3.根据权利要求1所述针叶樱桃的破壁方法，其特征在于，步骤S1所述真空冷...

【专利技术属性】
技术研发人员：许明峰，胡蒋宁，姚弘彬，徐云升，薛长风，李玲玲，蒋思伟，
申请(专利权)人：大连工业大学，
类型：发明
国别省市：辽宁;21