一种靶向FGFR1的拮抗短肽制造技术

本发明专利技术属短肽药物学领域，具体涉及FGFR1拮抗短肽的稳定性研究及其抗肿瘤领域的应用，公开了一种FGFR1拮抗短肽，包括短肽化合物P48，短肽化合物P48通过抑制FGFR1通路，抑制细胞增殖和迁移。上述技术方案，本发明专利技术人通过不懈努力，获得了短肽化合物P48，并发现其具有稳定的二级结构及相对较长的半衰期。此外，短肽化合物P48能有效靶向抑制FGFR1，在体内外表现出良好的抗肿瘤活性，有望成为癌症治疗的候选肽类抑制剂药物。

An antagonistic peptide targeting FGFR1

【技术实现步骤摘要】
一种靶向FGFR1的拮抗短肽
本专利技术涉及短肽药物学
，具体涉及一种靶向FGFR1的拮抗短肽。
技术介绍
成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)参与包括乳腺癌、肺癌、膀胱癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌等多种肿瘤的发生发展。FGFR1是癌症治疗的有效靶点。目前尚无FGFR1抑制剂批准上市，寻找有效的FGFR1靶向抑制剂具有重要的研究价值。靶向抑制剂主要分为小分子抑制剂、抗体药物、肽类抑制剂及其衍生物。相对于小分子抑制剂而言，肽类抑制剂具有高亲和力和特异性，其不良反应较低。与抗体药物相比，肽类抑制剂分子量低，对组织的渗透活性更强。鉴于肽类抑制剂的上述优势，受到越来越多学者的青睐。截止至2015年，全球已有超60种肽抑制剂批准上市，140余种肽抑制剂处于临床研究。然而，有关FGFR1拮抗肽的研究仍止步于前临床阶段。目前也尚无肽抑制剂靶向FGFR1抗肿瘤的相关专利。造成FGFR1拮抗肽研究滞后主要与其易降解、半衰期短相关。
技术实现思路
针对现有技术存在的不足，本专利技术的目的在于提供一种靶向FGFR1的拮抗短肽。短肽化合物P48能有效靶向抑制FGFR1，在体内外表现出良好的抗肿瘤活性。为实现上述目的，本专利技术提供了如下技术方案：一种靶向FGFR1的拮抗短肽，包括短肽化合物P48，所述短肽化合物P48可靶向结合FGFR1的膜外免疫球蛋白域，FGFR1拮抗短肽的氨基酸序列为：Ser-Pro-Pro-Arg-Tyr-Pro-Gly-Gly-Gly-Ser-NH2。作为优选的，FGFR1拮抗短肽作为活性成分在药物中的应用。作为优选的，FGFR1拮抗短肽通过拮抗体内FGFR1信号通路，在治疗与FGFR1异常失调相关疾病方面的应用。作为优选的，FGFR1异常失调包括FGFR1高表达和突变。作为优选的，FGFR1拮抗短肽治疗的疾病为肿瘤。作为优选的，FGFR1拮抗短肽P48通过抑制FGFR1通路，抑制肿瘤细胞的生长和侵袭。作为优选的，短肽化合物P48具有稳定的二级结构及相对延长的半衰期。作为优选的，FGFR1拮抗短肽可制成药用盐、酯或药用辅料。作为优选的，FGFR1拮抗短肽药物的制剂形式制成注射剂、片剂、胶囊剂、气雾剂、栓剂、膜剂、控释、缓释剂或纳米制剂。本专利技术的优点是：与现有技术相比，本专利技术人通过不懈努力，获得了短肽化合物P48，并发现其具有稳定的二级结构及相对较长的半衰期。此外，短肽化合物P48能有效靶向抑制FGFR1，在体内外表现出良好的抗肿瘤活性，有望成为癌症治疗的候选肽类抑制剂药物。下面结合说明书附图和具体实施例对本专利技术作进一步说明。附图说明图1为本专利技术实施例短肽化合物P48的结构、稳定性和对FGFR1的结合能力分析示意图；图2为本专利技术实施例在高度转化的人胚肾细胞HEK-293及成纤维细胞MEF-WT、Balb/c3T3中检测短肽化合物P48对FGFR1信号通路的抑制活性示意图；图3为本专利技术实施例短肽化合物P48在多种肿瘤细胞株中对FGFR1信号通路的抑制活性示意图；图4为本专利技术实施例短肽化合物P48的体外抗肿瘤活性示意图；图5为本专利技术实施例短肽化合物P48的体内抗肿瘤活性示意图。具体实施方式本专利技术在以下的实施例中进一步说明。这些实施例只是为了说明的目的，而不是用来限制本专利技术的范围。参见图1：短肽化合物P48的结构、稳定性和对FGFR1的结合能力分析(A)前体肽P9和降解短肽P48的序列。(B)a：P9和P48主链中C原子的RMSD随分子动力学模拟时间而变化。b：P9和P48的初始构象及在4ns、8ns、12ns、16ns和20ns的构象叠合图。(C)P9和P48在人血浆中的半衰期。(D)a：bFGF-FGFR1复合物的分子动力学模拟和自由能计算。b：维持bFGF-FGFR1复合物稳定性的关键残基分析。(E)FGFR1和P48的分子对接。(F)SPR检测FGFR1和P48的相互作用。图2：在高度转化的人胚肾细胞HEK-293及成纤维细胞MEF-WT、Balb/c3T3中检测P48对FGFR1信号通路的抑制活性。(A)短肽化合物P48预处理10分钟或AZD4547/PD173074预处理2小时后，bFGF孵育15分钟，检测药物对HEK-293、MEF-WT、Balb/c3T3细胞中FGFR1及其下游蛋白的抑制情况。(B)P48预处理10分钟或AZD4547/SSR处理2小时后，bFGF刺激15分钟，检测药物对PLCγ的抑制情况。(C)流式细胞术分析P48在MEF-WT和FGFR1-FGFR2-FRS2α敲除的MEF细胞中与FGFR1的结合能力。*，p<0.05；***，p<0.001，vsControl。图3：短肽化合物P48在多种肿瘤细胞株中对FGFR1信号通路的抑制活性。(A)短肽化合物P48预处理10分钟后，bFGF孵育15分钟，检测药物对FGFR1及其下游蛋白的抑制情况。(B)P48预处理10分钟或AZD4547/SSR预处理2小时后，bFGF孵育15分钟，检测药物对SGC-7901细胞中磷酸化FGFR1及其下游蛋白的抑制活性。(C)bFGF/aFGF刺激15分钟或KGF刺激20分钟，检测短肽化合物P48对SGC-7901细胞中磷酸化FGFR1及其下游蛋白的抑制活性。(D)EGF刺激10分钟，检测短肽化合物P48对PC-9细胞中磷酸化EGFR和ERK1/2的抑制活性。(E)流式细胞术检测短肽化合物P48在SGC-7901细胞中与FGFR1的结合能力。图4：短肽化合物P48的体外抗肿瘤活性。(A)用MTT法检测短肽化合物P48对癌细胞的生长抑制作用。(B)通过细胞侵袭实验检测短肽化合物P48对SGC-7901细胞迁移的抑制活性。(C)流式细胞术分析短肽化合物P48对细胞周期的阻滞作用。***，p<0.001，vsbFGF。图5：短肽化合物P48的体内抗肿瘤活性。(A)对照组和给药组的肿瘤体积测量。(B)肿瘤重量称量。(C)短肽化合物P48对裸鼠体内FLG及其下游蛋白的磷酸化水平的抑制作用。(D)免疫组化检测短肽化合物P48对促增殖蛋白Ki67的抑制活性。本专利技术公开的一种靶向FGFR1的拮抗短肽，包括短肽化合物P48，所述短肽化合物P48可靶向结合FGFR1的膜外免疫球蛋白域，FGFR1拮抗短肽的氨基酸序列为：Ser-Pro-Pro-Arg-Tyr-Pro-Gly-Gly-Gly-Ser-NH2。作为优选的，FGFR1拮抗短肽作为活性成分在药物中的应用。作为优选的，FGFR1拮抗短肽通过拮抗体内FGFR1信号通路，在治疗与FGFR1异常失调相关疾病方面的应用。作为优选的，FGFR1异常失调包括FGFR1高表达和突变。作为优选的，FGFR1拮抗短肽治疗的疾病为肿瘤。作为优选的，FGFR1拮抗短肽P48通过抑本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种靶向FGFR1的拮抗短肽，其特征在于：包括短肽化合物P48，所述短肽化合物P48可靶向结合FGFR1的膜外免疫球蛋白域，FGFR1拮抗短肽的氨基酸序列为Ser-Pro-Pro-Arg-Tyr-Pro-Gly-Gly-Gly-Ser-NH

【技术特征摘要】
1.一种靶向FGFR1的拮抗短肽，其特征在于：包括短肽化合物P48，所述短肽化合物P48可靶向结合FGFR1的膜外免疫球蛋白域，FGFR1拮抗短肽的氨基酸序列为Ser-Pro-Pro-Arg-Tyr-Pro-Gly-Gly-Gly-Ser-NH2。


2.根据权利要求1所述的一种靶向FGFR1的拮抗短肽，其特征在于：FGFR1拮抗短肽作为活性成分在药物中的应用。


3.根据权利要求1所述的一种靶向FGFR1拮抗短肽，其特征在于：FGFR1拮抗短肽通过拮抗体内FGFR1信号通路，在治疗与FGFR1异常失调相关疾病方面的应用。


4.根据权利要求1所述的一种靶向FGFR1拮抗短肽，其特征在于：FGFR1异常失调包括FGFR1高表达和突变。


5.根据权利要求3或4所述的一种靶向FGFR1拮抗短肽，其特征在于：FGFR...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴建章，李物兰，陈玲姿，范蕾，蔡跃飘，
申请(专利权)人：温州医科大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33