用于男性和女性模式脱发的催乳素受体抗体制造技术

本发明专利技术涉及催乳素受体抗体mat3的制剂和其在治疗男性和女性模式脱发中的用途。

Prolactin receptor antibodies for male and female pattern hair loss

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于男性和女性模式脱发的催乳素受体抗体本专利技术涉及催乳素受体(PRLR)抗体mat3的制剂，以及其用于治疗男性和女性模式脱发和例如由催乳素瘤、催乳素增加药物(例如神经安定药)引起的催乳素相关形式的脱发或与高全身催乳素水平相关的围产期脱发的用途。专利技术背景男性和女性模式脱发(M/FPHL)也部分地描述为“雄激素性脱发”，其为最常见的脱发原因且涉及最高达70%的男性和40%的女性(Wolff,H.等人，(2016),DiagnostikundTherapievonHaarundKopfhauterkrankungen.DeutschesÄrzteblatt,113,377-386)。M/FPHL主要影响头皮的顶部和前部，使男性具有后退的发际线且女性显示头发稀疏。据信，雄性激素二氢睾酮在男性模式脱发中起主要作用。女性中的脱发模式与男性模式秃发不同。在女性中，发际线不后退且不导致全秃发。周期中的头皮毛发生长：生长期的特征在于活跃毛发生长；退化期显示退化且随后为休止期(静止)。外生期(死毛发的释放)与休止期的结束相一致。脱发可以是任何时期中的受干扰的毛发生长的后果。休止期脱发可具有许多触发因素(生理和情绪压力、医学状况、铁和锌缺乏)。重要的是，M/FPHL在其早期阶段显示休止期毛发脱落(ClevelandClinicJournalofMedicine(2009).76,361-367)。生长期脱发经常是放射或化学疗法的结果。尽管可获得一些用于治疗M/FPHL的药剂(诸如，非那雄胺(finasteride)和米诺地尔(minoxidil))，但脱发的治疗仍然是未满足的医疗需求。糖皮质激素用于治疗斑秃，其中身体攻击其自身生长期毛囊并抑制或终止毛发生长。米诺地尔和非那雄胺用于治疗男性中的M/FPHL脱发，而仅米诺地尔也用于女性中的该适应症。一般而言，所有这些治疗均具有副作用。非那雄胺可导致男性中的性欲减退和阳萎且讨论其他严重副作用(如乳腺癌)；其在女性中是禁忌的。米诺地尔可导致血液坠积反应、心绞痛和不想要的毛发生长。此外，并非所有治疗的患者均用这些药物中的任一种有效地治疗。因此，治疗M/FPHL的问题显然尚未解决且仍存在显著未满足的医疗需求。在啮齿动物中，使用成年动物中的剃毛实验，通过分析剃毛区域中的毛发再生长作为读出范例来分析化合物对脱发的影响(BritishJournalofdermatology(2008).159,300-305)。在毛发生长大多静止(休止期)的时间点将成年动物剃毛，诱导特征在于毛发生长的生长期。可证实，在野生型小鼠中应用二氢睾酮延迟剃毛后的毛发再生长，而雄激素受体缺陷小鼠在剃毛后显示增强的再生长(BritishJournalofdermatology2008;159:300-305)。值得注意的是，所有在人雄激素性脱发中显示效力的药物在这些剃毛实验中均有效，即非那雄胺、米诺地尔已显示在剃毛的野生型小鼠中刺激毛发再生长(IntJPharmaceutics(2005).306,91-98;MedChemLett(2007).17,5983-5988)。催乳素(PRL)是由199个氨基酸构成的多肽激素。PRL属于多肽激素的生长激素(GH)、胎盘泌乳素(PL)家族且在垂体的催乳激素分泌细胞和几种垂体外组织(诸如淋巴细胞、乳腺上皮细胞、子宫肌层和前列腺)中合成。两种不同的启动子调控垂体和垂体外PRL合成(BioEssays28:1051-1055,2006)。PRL结合PRL受体(PRLR)，即属于1类细胞因子受体超家族的单一跨膜受体(EndocrineReviews19:225-268,1998)。在配体结合预二聚化的PRLR后，与受体缔合的JAK(主要为JAK2，即Janus激酶2)转磷酸化且彼此活化。另外，PRLR还被磷酸化且可结合含SH2-结构域的蛋白，诸如STAT(信号转导及转录活化物)。受体结合的STAT随后被磷酸化，从受体解离并易位至细胞核，在此处其刺激靶基因的转录。另外，已描述PRLR活化Ras-Raf-MAPK途径且活化胞质src激酶(EndocrineReviews19:225-268,1998)。PRLR介导的信号传导在多种过程中起作用，所述过程诸如乳腺发育、泌乳、繁殖、乳腺和前列腺肿瘤生长、自身免疫疾病、一般生长和代谢，和免疫调节(EndocrineReviews19:225-268,1998;Annu.Rev.Physiol.64:47-67,2002)。可以使用溴隐亭(bromocriptine)和其他多巴胺(dopamine)受体2激动剂抑制垂体PRL分泌(NatureClinicalPracticeEndocrinologyandMetabolism2(10):571-581,2006)。然而，这些药剂不抑制垂体外PRL合成，所述垂体外PRL合成可成功地补偿垂体PRL合成的抑制，导致PRLR介导的信号传导几乎不受损(EndocrineReviews19:225-268,1998)。因此，对于患有乳腺癌或自身免疫疾病(诸如全身性狼疮或类风湿性关节炎)的患者而言，多巴胺2型受体激动剂没有益处并不令人惊讶(BreastCancerRes.Treat.14:289-29,1989;Lupus7:414-419,1998)，尽管催乳素牵涉于这些疾病中。分别在乳腺癌或自身免疫疾病中起关键作用的乳腺癌细胞或淋巴细胞中的局部催乳素合成不由多巴胺受体激动剂阻断。类似于雄激素-受体缺陷小鼠的PRLR缺陷小鼠显示增强的毛发生长，而向野生型小鼠施用催乳素延迟毛发生长(JEndocrinol(2006).191,415-425)。Foitzik报导(AmJPathol(2003),162(5),1611-1621)，催乳素可对毛发生长具有作用。基于与非生理性高浓度的催乳素孵育后毛发生长的体外分析，Foitzik得出结论，PRLR拮抗剂可用于治疗雄激素性脱发。然而，人PRL可与人PRL受体以及生长激素受体(GHR)相互作用。通过以高剂量使用PRL，不清楚何种受体(即GHR或PRLR)被活化。在该研究中未指定或公开采用何种PRLR拮抗剂。PRL变体以及竞争性PRLR拮抗剂由于其如下负面特征而在中和毛囊中的局部PRL信号传导方面无效，所述负面特征为1)由于竞争性作用机制，在存在渐增的PRL浓度的情况下PRLR抑制降低，2)半衰期降低和3)如果与PRL相比，则对PRLR的亲和力降低。最近，已描述了几种干扰PRLR介导的信号传导的PRLR-抗体(WO2012163932、WO2011069799、WO2011069795)。已证实，中和PRLR抗体(WO2011069799)刺激剃毛的正常和血催乳素过多的小鼠中的毛发再生长。也可证实，催乳素受体(PRLR)在猴和小鼠的皮肤中的毛囊中表达(参见实施例1)，且PRLR通过结合PRLR特异性抗体005-CO4而被中和。也可显示，PRLR抗体005-CO4刺激剃毛雌性小鼠中的毛发再生长(Otto,C.等人(2015)Endocrino本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.稳定的含抗体的液体或冻干制剂，其包含20-120 mg/ml抗体，其中所述抗体是PRLR抗体mat3，所述制剂包含：/na. 10 - 50 mM精氨酸HCl/nb. 5- 30 mM组氨酸/nc. 1-10 mM甲硫氨酸/nd. 50-150 ppm非离子表面活性剂/ne. 34-292 mM糖，/n其用于治疗男性和女性模式脱发。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170710 EP 17180554.21.稳定的含抗体的液体或冻干制剂，其包含20-120mg/ml抗体，其中所述抗体是PRLR抗体mat3，所述制剂包含：
a.10-50mM精氨酸HCl
b.5-30mM组氨酸
c.1-10mM甲硫氨酸
d.50-150ppm非离子表面活性剂
e.34-292mM糖，
其用于治疗男性和女性模式脱发。


2.根据权利要求1所述的制剂，其中所述非离子表面活性剂是聚山梨醇酯且所述糖是蔗糖。


3.根据权利要求1和2中任一项所述的制剂，其包含：
a.30mML-精氨酸HCl
b.1.8mML-组氨酸
c.8.2mML-组氨酸HCl
d.5mML-甲硫氨酸
e.80ppm聚山梨醇酯80
f.234mM蔗糖。


4.根据任一前述权利要求所述的制剂，其中所述抗体浓度是60mg/kg。


5.根据任一前述权利要求所述的制剂，其中所述PRLR抗体mat3包含抗原结合结构域，其中所述抗原结合结构域包含重链可变区和轻链结合可变区，其中：

【专利技术属性】
技术研发人员：E梅，SJ约德尔，J克雷茨施马尔，C奥托，
申请(专利权)人：拜耳制药股份公司，
类型：发明
国别省市：德国;DE