一种口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备方法，经过动物双歧杆菌菌悬液的制备、水相的配制、油相的配制、油包水型乳液的制备、固化、离心洗涤和冷冻干燥步骤，完成口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备方法；本发明专利技术制备工艺简单、高效，制备出的动物双歧杆菌微胶囊，能很好的耐受胃酸及胆盐，且肠溶性好，能在肠道中迅速繁殖。该微胶囊动物双歧杆菌口服后在胃部不解囊，最终顺利到达小肠，通过竞争性拮抗作用紧密结合肠粘膜上皮细胞，在肠道中生长、繁殖，直接补充正常生理细菌，抑制肠道中潜在危害致病菌，调整肠道的菌群平衡，提高机体免疫力。

A preparation method of oral Bifidobacterium microcapsule

【技术实现步骤摘要】
一种口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备方法
本专利技术涉及医药制造领域，具体涉及一种口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备方法。
技术介绍
益生菌，1989年由英国学者Fuller定义为：一种通过调节和改善肠道微生态平衡，从而对宿主发挥有益作用的微生物添加物，因益生菌具有优越的生理功能而被广泛关注。研究发现，益生菌发挥益生功能需要摄入106-107g-1，同时其活性还会受到菌种自身生存能力、酸性环境、氧气和温度等因素的影响，于是，科学家们为了保持益生菌的活性提出了很多方法，而微胶囊则是公认的最为高效保持益生菌活力的方法。但是现在的很多方法制备得到的微胶囊，耐胃酸、胆盐和肠溶性效果不佳。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种制备工艺简单高效、耐受胃酸及胆盐，且肠溶性好的口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备方法。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备方法，经过动物双歧杆菌菌悬液的制备、水相的配制、油相的配制、油包水型乳液的制备、固化、离心洗涤和冷冻干燥步骤，完成口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备方法；具体步骤如下：(1)动物双歧杆菌菌悬液的制备：a.菌种的活化及发酵将保存在冰箱中的菌种接种到固体培养基上，在37℃培养箱中厌氧培养22-24h，选取单菌落接种到液体培养基中，37℃培养箱中厌氧培养22-24h，活化好的菌种以1％-2％的接种量接种到液体培养基中，37℃环境下培养15-24h；b.将培养好的菌液在高速旋转条件下进行离心处理，弃上清液，无菌生理盐水重悬，完成菌悬液的制备；(2)水相的配制：制备质量浓度为1％-2％海藻酸钠溶液，磁力搅拌器搅拌，充分溶解后灭菌，加入菌悬液，混合均匀；(3)油相的配制：制备含1％-5％span-80的植物油，搅拌均匀；(4)油包水型乳液的制备：将水相加入至油相，搅拌器搅拌至均匀稳定的乳白色油包水乳液，反应温度为25-37℃；(5)固化：加入质量浓度为3％-8％CaCl2溶液，进行搅拌固化；(6)离心洗涤：在5000r/min转速下离心5-10min，收集沉淀，用无菌生理盐水洗涤2-3次，得到微胶囊沉淀；(7)冷冻干燥：将收集的微胶囊沉淀以1：3的比例加入到冻干保护剂中，搅拌均匀，置于冻干机中冻干，冷冻干燥结束后收集微胶囊动物双歧杆菌菌粉，在2-8℃环境下保存，即完成了口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备。进一步的，所述步骤(1)中的高速旋转的转速为5000r/min，离心时间为5-10min。进一步的，所述步骤(4)中的转速为150-300r/min，搅拌时间为30min-1h。进一步的，所述步骤(5)中的CaCl2溶液添加量占总量的20％-50％。进一步的，所述步骤(5)中的搅拌转速为150-300r/min，搅拌固化时间为2-3h，反应温度为25-37℃。进一步的，所述步骤(7)中的冻干保护剂包括1％-10％蔗糖、2％-10％脱脂奶粉，余量为水。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术制备工艺简单、高效，制备出的动物双歧杆菌微胶囊，能很好的耐受胃酸及胆盐，且肠溶性好，能在肠道中迅速繁殖。该微胶囊动物双歧杆菌口服后在胃部不解囊，最终顺利到达小肠，通过竞争性拮抗作用紧密结合肠粘膜上皮细胞，在肠道中生长、繁殖，直接补充正常生理细菌，抑制肠道中潜在危害致病菌，调整肠道的菌群平衡，提高机体免疫力。附图说明图1为本专利技术的制备工艺流程图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。如图1所示为本专利技术的制备工艺流程图。实施例1一种口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备方法，经过动物双歧杆菌菌悬液的制备、水相的配制、油相的配制、油包水型乳液的制备、固化、离心洗涤和冷冻干燥步骤，完成口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备方法；具体步骤如下：(1)动物双歧杆菌菌悬液的制备：a.菌种的活化及发酵将保存在冰箱中的菌种接种到固体培养基上，在37℃培养箱中厌氧培养22h，选取单菌落接种到液体培养基中，37℃培养箱中厌氧培养22h，活化好的菌种以1％的接种量接种到液体培养基中，37℃环境下培养15h；b.将培养好的菌液在高速旋转条件下进行离心处理，弃上清液，无菌生理盐水重悬，完成菌悬液的制备，高速旋转的转速为5000r/min，离心时间为5min。(2)水相的配制：制备质量浓度为1％海藻酸钠溶液，磁力搅拌器搅拌，充分溶解后灭菌，加入菌悬液，混合均匀。(3)油相的配制：制备含5％span-80的植物油，搅拌均匀；(4)油包水型乳液的制备：将水相加入至油相，搅拌器搅拌至均匀稳定的乳白色油包水乳液，反应温度为25℃，转速为150r/min，搅拌时间为30min。(5)固化：加入质量浓度为3％CaCl2溶液，进行搅拌固化；CaCl2溶液添加量占总量的50％，搅拌转速为150r/min，搅拌固化时间为2h，反应温度为25℃。(6)离心洗涤：在5000r/min转速下离心5min，收集沉淀，用无菌生理盐水洗涤2次，得到微胶囊沉淀；(7)冷冻干燥：将收集的微胶囊沉淀以1：3的比例加入到冻干保护剂中，冻干保护剂包括1％蔗糖、10％脱脂奶粉，余量为水，搅拌均匀，置于冻干机中冻干，冷冻干燥结束后收集微胶囊动物双歧杆菌菌粉，在2℃环境下保存，即完成了口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备。实施例2一种口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备方法，经过动物双歧杆菌菌悬液的制备、水相的配制、油相的配制、油包水型乳液的制备、固化、离心洗涤和冷冻干燥步骤，完成口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备方法；具体步骤如下：(1)动物双歧杆菌菌悬液的制备：a.菌种的活化及发酵将保存在冰箱中的菌种接种到固体培养基上，在37℃培养箱中厌氧培养24h，选取单菌落接种到液体培养基中，37℃培养箱中厌氧培养24h，活化好的菌种以2％的接种量接种到液体培养基中，37℃环境下培养24h；b.将培养好的菌液在高速旋转条件下进行离心处理，弃上清液，无菌生理盐水重悬，完成菌悬液的制备，高速旋转的转速为5000r/min，离心时间为10min。(2)水相的配制：制备质量浓度为2％海藻酸钠溶液，磁力搅拌器搅拌，充分溶解后灭菌，加入菌悬液，混合均匀。(3)油相的配制：制备含1％span-80的植物油，搅拌均匀；(4)油包水型乳液的制备：将水相加入至油相，搅拌器搅拌至均匀稳定的乳白色油包水乳液，反应温度为37℃，转速为300r/min，搅拌时间为1h。(5)固化：加入质量浓度为8％CaCl2溶液，进行搅拌固本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备方法，其特征在于：经过动物双歧杆菌菌悬液的制备、水相的配制、油相的配制、油包水型乳液的制备、固化、离心洗涤和冷冻干燥步骤，完成口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备方法；具体步骤如下：/n(1)动物双歧杆菌菌悬液的制备：/na.菌种的活化及发酵/n将保存在冰箱中的菌种接种到固体培养基上，在37℃培养箱中厌氧培养22-24h，选取单菌落接种到液体培养基中，37℃培养箱中厌氧培养22-24h，活化好的菌种以1％-2％的接种量接种到液体培养基中，37℃环境下培养15-24h；/nb.将培养好的菌液在高速旋转条件下进行离心处理，弃上清液，无菌生理盐水重悬，完成菌悬液的制备；/n(2)水相的配制：制备质量浓度为1％-2％海藻酸钠溶液，磁力搅拌器搅拌，充分溶解后灭菌，加入菌悬液，混合均匀；/n(3)油相的配制：制备含1％-5％span-80的植物油，搅拌均匀；/n(4)油包水型乳液的制备：将水相加入至油相，搅拌器搅拌至均匀稳定的乳白色油包水乳液，反应温度为25-37℃；/n(5)固化：加入质量浓度为3％-8％CaCl

【技术特征摘要】
1.一种口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备方法，其特征在于：经过动物双歧杆菌菌悬液的制备、水相的配制、油相的配制、油包水型乳液的制备、固化、离心洗涤和冷冻干燥步骤，完成口服式动物双歧杆菌微胶囊的制备方法；具体步骤如下：
(1)动物双歧杆菌菌悬液的制备：
a.菌种的活化及发酵
将保存在冰箱中的菌种接种到固体培养基上，在37℃培养箱中厌氧培养22-24h，选取单菌落接种到液体培养基中，37℃培养箱中厌氧培养22-24h，活化好的菌种以1％-2％的接种量接种到液体培养基中，37℃环境下培养15-24h；
b.将培养好的菌液在高速旋转条件下进行离心处理，弃上清液，无菌生理盐水重悬，完成菌悬液的制备；
(2)水相的配制：制备质量浓度为1％-2％海藻酸钠溶液，磁力搅拌器搅拌，充分溶解后灭菌，加入菌悬液，混合均匀；
(3)油相的配制：制备含1％-5％span-80的植物油，搅拌均匀；
(4)油包水型乳液的制备：将水相加入至油相，搅拌器搅拌至均匀稳定的乳白色油包水乳液，反应温度为25-37℃；
(5)固化：加入质量浓度为3％-8％CaCl2溶液，进行搅拌固化；
(6)离心洗涤：在5000r/min转速下离心5-10min，收集沉淀，用无菌生理盐水洗涤2-3次，得到微胶...

【专利技术属性】
技术研发人员：阮晓洋，廖洪，袁芳，
申请(专利权)人：江苏恒丰强生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32