【技术实现步骤摘要】
一种磷脂快速检测方法
本专利技术属于水产品的磷脂检测方法领域,尤其涉及一种水产品的磷脂快速检测方法。
技术介绍
通过对水产品脂质组学的研究,可深化对水产品及加工副产物的脂质营养学认识;并可建立脂质组学指纹图谱,为水产品鉴伪、溯源提供技术手段;还可以为预防、诊断、治疗水生动物疾病提供参考,为水环境调控与污染监测提供科学依据。磷脂是水产品脂质组学的主要分析对象之一,磷脂的种类众多,根据磷脂极性基团不同,可将磷脂分为磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇等多个类别,而对水产品中各类别磷脂含量的检测是整个分析过程中必须可少的步骤。磷脂的整个检测过程包括对水产品中磷脂的提取和对提取物的检测。对提取物的检测可采用基质辅助激光解吸,从而得到检测图,检测图中每个波峰对应一种磷脂,根据每个波峰的面积计算出对应种类的磷脂浓度,可根据检测图进行后续的分析工作。对水产品中磷脂的提取可采用Bligh&Dyer法,Bligh&Dyer法虽然能提取到水产品中的大部分磷脂,但是提取速度慢、耗时长,导致整个检测过程的耗时长,检测效率低;而且在提取的同时容易混入杂质,会在基质辅助激光解吸时形成干扰,得到的检测图不准确,即检测结果不精准;并且由于在Bligh&Dyer法中大量使用了氯仿,氯仿遇光照会与空气中的氧作用,逐渐分解而生成剧毒的光气(碳酰氯)和氯化氢,容易对人体造成危害。因此,现有的磷脂检测方法存在检测效率低、检测结果不精准和容易对人体造成危害的缺点。
技术实现思路
本专利技 ...
【技术保护点】
1.一种磷脂快速检测方法,其特征在于:包括以下步骤,/na、对水产品中的磷脂进行粗提取,得磷脂粗提液,即A品,/nb、合成TiO
【技术特征摘要】
1.一种磷脂快速检测方法,其特征在于:包括以下步骤,
a、对水产品中的磷脂进行粗提取,得磷脂粗提液,即A品,
b、合成TiO2微孔阵列芯片,得B品,
c、将A品置于B品,静置,使磷脂与TiO2反应完全,得C品,
d、在C品上滴加super-DHB和9-AA基质溶液的混合液,得D品,
e、干燥D品,使D品上的磷脂结晶,得E品,
f、E品采用基质辅助激光解吸检测,得检测图。
2.根据权利要求1所述的磷脂快速检测方法,其特征在于:所述的步骤a,是采用Bligh&Dyer法对水产品中的磷脂进行粗提取,得磷脂粗提液,即A品。
3.根据权利要求2所述的磷脂快速检测方法,其特征在于:所述的步骤a,是采用改进后的Bligh&Dyer法对水产品中的磷脂进行粗提取,得磷脂粗提液,即A品;所述改进后的Bligh&Dyer法,包括以下步骤,
a1、取水产品的肌肉组织,得A1品,
a2、将A1品至于氯仿和甲醇的混合液中振荡混匀,得A2品,
a3、A2品超声冰浴提取5-15min,得A3品,
a4,A3品中加入纯水,振荡混匀,得A4品,
a5、用冷冻离心机对A4品进行离心,使A4品内溶液上下分层,得A5,
a6、取出A5品中的下层溶液,得A6品,
a7、在A6品中加入氯仿,得A7品,
a8、A7品冷冻离心机进行离心,使A7品内溶液上下分层,得A8品,
a9、取出A8品中的下层溶液,得A9品,
a10、在A6品中加入氯仿溶液,得A10品,
a11、A10品冷冻离心机进行离心,使A10品内溶液上下分层,得A11品,
a12、取出A11品中的下层溶液,
a13、将步骤a6中取出的下层溶液、步骤a9中取出的下层溶液和步骤a12中取出的下层溶液混合,得A13品,
a14、用氮气吹干A13品,得A14品,
a15、用甲醇水溶液溶解A14品,甲醇浓度90%,得磷脂粗提液,即A品。
4.根据权利要求3所述的磷脂快速检测方法,其特征在于:所述步骤a1中,所述水产品的肌肉组织经过均质处理;
所述的步骤a2中,按重量份计,是将1份的A1和1.75份混合液振荡混匀,混合液中氯仿和甲醇的比例1:2;
所述的步骤a3中,A2品采用探头式超声冰浴提取10min,超声功率25kHz、60%变幅;
所述的步骤a4中,所述纯水的加入量1.25份;
所述的步骤a5中,所述冷冻离心机的转速8000rpm,离心时间15min;
所述的步骤a6中,所述A5品中的下层溶液用移液枪取出;
所述的步骤a7中,所述氯仿的加入量为2份;
所述的步骤a8中,所述冷冻离心机的转速8000rpm,离心时间15min;
所述的步骤a9中,所述A8品中的下层溶液用移液枪取出;
所述的步骤a10中,所述氯仿的加入量2份;
所述的步骤a11中,所述冷冻离心机的转速8000rpm,离心时间15min;
所述的步骤a12中,所述...
【专利技术属性】
技术研发人员:沈清,
申请(专利权)人:浙江工商大学,杭州邦沃森生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:浙江;33
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