PRSS2抑制制造技术

本文中提供了通过抑制PRSS2与LRP1的结合来抑制丝氨酸蛋白酶2(PRSS2)之功能(例如，阻遏Tsp‑1之能力)的药剂。本文中还提供了与LRP1的结合结构域I结合并模拟鞘脂激活蛋白原在刺激Tsp‑1中之活性的药剂。还提供了使用这些药剂来治疗癌症的方法。

PRSS2 inhibition

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】PRSS2抑制相关申请本申请根据35U.S.C.§119(e)要求于2017年3月22日提交且标题为“PRSS2INHIBITION”的美国临时申请No.62/475,143的权益，其全部内容通过引用并入本文。背景当前对于癌症患者的护理标准由广泛作用的细胞毒剂(化学治疗)、辐射以及靶向特定分泌蛋白、细胞表面受体或激酶的定向治疗剂组成。历史上，已存在靶向肿瘤微环境的两类治疗剂，抗血管生成药(其仅限于抗VEGF治疗)和免疫调节药。靶向微环境的治疗的主要缺点之一在于其不具有直接的抗肿瘤活性，并且因此其作为单药治疗的效力已受到限制。相反地，具有直接抗肿瘤活性的靶向治疗和化学治疗的主要缺点在于除了意外的有害副作用之外，患者对药物产生了抗性。
技术实现思路
本文中提供了新的癌症治疗策略，其既具有抗癌活性又靶向癌症微环境以通过刺激强效抗血管生成和抗肿瘤发生蛋白血小板应答蛋白1(Thrombospondin1，Tsp-1)的活性来阻止癌症复发和/或转移。本公开内容的一些方面提供了治疗癌症的方法，所述方法包括向有此需要的对象施用有效量的抑制丝氨酸蛋白酶2(Protease，serine2，PRSS2)之功能的药剂。在一些实施方案中，所述药剂抑制PRSS2的表达。在一些实施方案中，所述药剂通过RNA干扰(RNAinterference，RNAi)抑制PRSS2的表达。在一些实施方案中，所述药剂是抑制PRSS2表达的微RNA(microRNA)、siRNA或shRNA。在一些实施方案中，shRNA包含SEQIDNO：4的核苷酸序列。在一些实施方案中，所述药剂抑制PRSS2与低密度脂蛋白受体相关蛋白1(Lowdensitylipoproteinreceptor-relatedprotein1，LRP1)的结合。在一些实施方案中，所述药剂抑制PRSS2对Tsp-1的阻遏。在一些实施方案中，所述药剂是与PRSS2结合的蛋白质或肽。在一些实施方案中，所述蛋白质或肽来源于LRP-1的结合结构域I。在一些实施方案中，LRP-1的结合结构域I包含LRP-1的第1至172位氨基酸。在一些实施方案中，所述蛋白质或肽包含SEQIDNO：4的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述药剂是PRSS2抗体。在一些实施方案中，PRSS2抗体是多克隆抗体。在一些实施方案中，PRSS2抗体是单克隆抗体。在一些实施方案中，PRSS2抗体与PRSS2的其中PRSS2结合LRP-1的区域结合。在一些实施方案中，所述药剂是抑制PRSS2之功能的小分子。在一些实施方案中，小分子选自：脂质、单糖、第二信使、代谢物和异生物质(xenobiotics)。在一些实施方案中，所述药剂经口、肠胃外、肌内、鼻内、气管内、脑室内、静脉内或腹膜内施用。在一些实施方案中，癌症是转移性的。在一些实施方案中，癌症选自：胆道癌；膀胱癌；脑癌；胶质母细胞瘤；髓母细胞瘤；乳腺癌；宫颈癌；绒毛膜癌；结肠癌；子宫内膜癌；食管癌；胃癌；血液系统肿瘤(hematologicalneoplasm)；急性淋巴细胞性和髓细胞性白血病；多发性骨髓瘤；AIDS相关白血病；成人T细胞白血病淋巴瘤；上皮内肿瘤；鲍恩病(Bowen’sdisease)；佩吉特病(Paget’sdisease)；肝癌；肺癌；淋巴瘤；霍奇金病(Hodgkin’sdisease)；淋巴细胞性淋巴瘤；神经母细胞瘤；口腔癌；鳞状细胞癌；卵巢癌；胰腺癌；前列腺癌；直肠癌；肉瘤；平滑肌肉瘤；横纹肌肉瘤；脂肪肉瘤；纤维肉瘤；骨肉瘤；皮肤癌；睾丸癌；间质肿瘤和生殖细胞肿瘤；甲状腺癌；以及肾癌。在一些实施方案中，癌症是前列腺癌、乳腺癌、卵巢癌或胰腺癌。本公开内容的另一些方面提供了抗体，其结合丝氨酸蛋白酶2(PRSS2)的其中PRSS2与低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)结合的区域。在一些实施方案中，抗体是多克隆抗体。在一些实施方案中，抗体是单克隆抗体。在一些实施方案中，抗体抑制PRSS2与低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)的结合。本文中还提供了包括向有此需要的对象施用有效量的刺激血小板应答蛋白1(Tsp-1)之药剂的方法。在一些实施方案中，所述药剂抑制丝氨酸蛋白酶2(PRSS2)阻遏Tsp-1的能力。在一些实施方案中，所述药剂与LRP1的结合结构域I结合。在一些实施方案中，所述药剂抑制PRSS2与低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)的结合。本文中还提供了治疗癌症的方法，所述方法包括向有此需要的对象施用有效量的抑制丝氨酸蛋白酶2(PRSS2)之功能的第一药剂，以及有效量的与低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)的结合结构域I结合的第二药剂。在一些实施方案中，第一药剂和第二药剂同时施用。在一些实施方案中，其中第一药剂和第二药剂依次施用。本公开内容的一个或更多个实施方案的细节在以下描述中阐述。根据以下附图和数个实施方案的详细描述以及还根据所附权利要求书，本公开内容的其他特征或优点将变得明显。附图说明以下附图构成本说明书的一部分，并且被包含在内以进一步示出本公开内容的某些方面，通过与本文中给出的一些具体实施方案的详细描述组合参照这些附图中的一个或更多个，可更好地理解这些方面。在附图中：图1.用载剂对照或剂量为20和40mg/kg/天的肽处理的AsPc1肿瘤的平均肿瘤质量(tumormass)的图。图2A至2B.用psap肽(psaptide)或载剂对照处理的小鼠的(图2A)原发性胰腺肿瘤和(图2B)肺和脾的代表性图像。图3A至3B.在(图3A)从患者腹水建立的9种卵巢癌细胞系以及(图3B)乳腺癌细胞系MCF7、SkBr3和MDA-MB-231中的CD36和β-肌动蛋白的western印迹。图4.SCID小鼠用1×10个卵巢癌细胞注射并用肽(40mg/kg/QD)或顺铂(4mg/kgQOD)处理(n＝12/组)。图5.在用载剂对照或肽(psap肽)处理的小鼠的腹水中的Gr1+(x轴)和CD11b+(y轴)细胞的FACS分析。图6A至6B.以下的western印迹分析：(图6A)未经处理(-)或者用单独的或与RAP组合的来自PC3细胞的条件培养基处理的前列腺成纤维细胞中的Tsp-1和β-肌动蛋白表达；以及(图6B)未经处理(-)或者用单独的或与PKC抑制剂6983(PKCi)组合的来自PC3细胞的条件培养基处理的前列腺成纤维细胞中的Tsp-1、p53和β-肌动蛋白表达。图7.用空载体(pLKO)或者表达对LRP1具有特异性的两种独立shRNA序列的慢病毒载体转导的MRC5肺成纤维细胞中Tsp-1、p53和β-肌动蛋白表达的western印迹分析，所述成纤维细胞为未经处理(-)或者用来自PC3细胞或PC3M-LN4细胞的条件培养基处理。图8A至8B：(图8A)未经处理(-)或者用单独的或与25或50μg的rhRAP组合的psap肽处理以及(图8B)未经处理(-)或者用单独的或与Y27632组合的psap肽处理的肺成纤维细本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.治疗癌症的方法，所述方法包括向有此需要的对象施用有效量的抑制丝氨酸蛋白酶2(PRSS2)之功能的药剂。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170322 US 62/475,1431.治疗癌症的方法，所述方法包括向有此需要的对象施用有效量的抑制丝氨酸蛋白酶2(PRSS2)之功能的药剂。


2.权利要求1所述的方法，其中所述药剂抑制PRSS2的表达。


3.权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述药剂通过RNA干扰(RNAi)抑制PRSS2的表达。


4.权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述药剂是抑制PRSS2表达的微RNA、siRNA或shRNA。


5.权利要求4所述的方法，其中所述shRNA包含SEQIDNO：4的核苷酸序列。


6.权利要求1所述的方法，其中所述药剂抑制PRSS2与低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)的结合。


7.权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述药剂抑制PRSS2对Tsp-1的阻遏。


8.权利要求6或权利要求7所述的方法，其中所述药剂是与PRSS2结合的蛋白质或肽。


9.权利要求8所述的方法，其中所述蛋白质或肽来源于LRP-1的结合结构域I。


10.权利要求9所述的方法，其中所述LRP-1的结合结构域I包含LRP-1的第1至172位氨基酸。


11.权利要求8至10中任一项所述的方法，其中所述蛋白质或肽包含SEQIDNO：3、18或19的氨基酸序列。


12.权利要求6所述的方法，其中所述药剂是PRSS2抗体。


13.权利要求12所述的方法，其中所述PRSS2抗体是多克隆抗体。


14.权利要求12所述的方法，其中所述PRSS2抗体是单克隆抗体。


15.权利要求12至14中任一项所述的方法，其中所述PRSS2抗体与PRSS2的其中PRSS2结合LRP-1的区域结合。


16.权利要求1所述的方法，其中所述药剂是抑制PRSS2之功能的小分子。


17.权利要求16所述的方法，其中所述小分子选自：脂质、单糖、第二信使、代谢物和异生物质。


18.权利要求1至17中任一项所述的方法，其中所述药剂经口、肠胃外、肌内、鼻内、气管内、脑室内、静脉内或腹膜内施用。...

【专利技术属性】
技术研发人员：伦道夫·S·瓦特尼克，
申请(专利权)人：儿童医学中心公司，
类型：发明
国别省市：美国;US