一种苏黄止咳胶囊指纹图谱的检测方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种苏黄止咳胶囊指纹图谱的检测方法及其应用。所述检测方法包括：(1)供试品溶液的制备；(2)HPLC色谱条件的确定；(3)HPLC图谱的测定；(4)标准指纹图谱的建立，从而得到苏黄止咳胶囊指纹图谱。该检测方法可以用于苏黄止咳胶囊质量控制。

【技术实现步骤摘要】
一种苏黄止咳胶囊指纹图谱的检测方法及其应用
本专利技术涉及但不限于药物分析技术，尤指但不限于一种苏黄止咳胶囊指纹图谱的检测方法及其应用。
技术介绍
苏黄止咳胶囊的处方由密炙麻黄、紫苏叶、地龙、炙枇杷叶、紫苏子、蝉蜕、前胡、牛蒡子、五味子组成。其中麻黄、地龙、蝉蜕、紫苏叶、前胡为其疏风、散风之药，用以止咳、利咽、止痒；紫苏子、五味子解痉缓急；牛蒡子、枇杷叶润肺清热。诸药合用，辛温宣肺，疏风解痉，通窍降气，豁痰平喘，使风散痰消挛解，肺气得以宣降，气机通畅，最终达到风咳止咳整体调整、标本兼治的目的，用于治疗咳嗽变异型哮喘和感冒后咳嗽。临床试验表明该药的效果良好，且不良反应也较目前常用的西药小。中国专利申请CN104007222A公开了一种苏黄止咳胶囊的检测方法，用于苏黄止咳胶囊的质量控制；该方法采用薄层色谱法对苏黄止咳胶囊中麻黄、紫苏叶、地龙、牛蒡子、五味子五味药材进行定性鉴别；采用高效液相色谱法对苏黄止咳胶囊中盐酸麻黄碱的含量进行测定(用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水-磷酸-三乙胺1.5:98.3:0.1:0.1为流动相；检测波长为205nm)。中国专利申请CN108490083A公开了一种苏黄止咳胶囊的质量检测方法，该检测方法包括麻黄碱和伪麻黄碱(以极性乙醚连接苯基键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.092％磷酸溶液(含0.125％三乙胺)(1.5∶98.5)为流动相；检测波长为210nm)以及牛蒡苷(以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(1∶1.1)为流动相；检测波长为280nm)的含量测定方法，同时对苏黄止咳胶囊中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱进行质量检测的方法。尽管现有技术公开了盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱以及牛蒡苷的质量检测方法，但是没有苏黄止咳胶囊指纹图谱的检测方法，同时，也尚未确证建立有效成分间的关系。
技术实现思路
以下是对本文详细描述的主题的概述。本概述并非是为了限制权利要求的保护范围。本申请提供了一种苏黄止咳胶囊指纹图谱的检测方法及其应用，不仅确立了苏黄止咳胶囊质量控制的标记物，同时可以更好地控制产品的质量。本申请提供了一种苏黄止咳胶囊指纹图谱的检测方法，所述的检测方法包括如下步骤：(1)供试品溶液的制备：取苏黄止咳胶囊，去胶囊壳，精密称定0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加入30±5mL60±10体积％甲醇水溶液称定重量，超声40±10min，放冷至室温，补足减失重量，滤过，取续滤液，过0.45μm微孔滤膜，即得供试品溶液；(2)HPLC色谱条件的确立色谱柱：采用填料为十八烷基硅烷键合硅胶的色谱柱，可选规格4.6×250mm，5μm；流动相：流动相A和流动相B的混合物，其中，流动相A为0.1±0.05体积％甲酸水溶液，流动相B为乙腈；流动相梯度洗脱；柱温：30±5℃，优选地，28℃；流速：1±0.5mL·min-1，优选地，1mL·min-1；检测波长：230±30nm，优选地，254nm；进样量：10±5μL，优选地，10μL；(3)HPLC图谱的测定取所述供试品溶液，根据所述HPLC色谱条件进样，得到HPLC色谱图；(4)标准指纹图谱的建立在上述HPLC图谱中确定共有特征峰，优选地，确立22个共有特征峰，所述共有特征峰包括下列成分的共有特征峰：腺苷、1-咖啡酰奎宁酸、绿原酸、夏佛塔苷、牛蒡苷、五味子醇甲、戈米辛D、五味子醇乙、当归酰戈米辛H、白花前胡甲素和五味子乙素。在本申请的实施方案中，腺苷、1-咖啡酰奎宁酸、绿原酸、夏佛塔苷、牛蒡苷、五味子醇甲、戈米辛D、五味子醇乙、当归酰戈米辛H、白花前胡甲素和五味子乙素为11个共有峰，并经对照品指认，其相对保留时间如下：分别以19.6417min、51.5968min和103.2624min的色谱峰保留时间为参照，相对保留时间分别为：以19.6417min色谱峰保留时间为参照，0.3207、0.7817；以51.5968min的色谱峰保留时间为参照，0.6455、0.9116、1.3868；以103.2624min的色谱峰保留时间为参照，1.0000、1.0374、1.0663、1.1281、1.1975、1.3501。在本申请的实施方案中，所述22个共有特征峰的相对保留时间为：选择三个不同时间(19.6417min、51.5968min和103.2624min)的色谱峰保留时间为参照计算其余19个共有峰相对保留时间，其中22个共有峰保留时间分别为：0.3207、0.3605、0.4805、0.5080、0.7817、1.0000(19.6417min作为参考)；0.5141、0.6455、0.7566、0.9116、1.0000、1.3868、1.4096(51.5968min作为参考)；0.9580、1.0000、1.0374、1.0663、1.1281、1.1975、1.3234、1.3501、1.3561(103.2624min作为参考)。在本申请的实施方案中，所述流动相洗脱梯度为：0～15min,0.1±0.05体积％甲酸水:乙腈为96:4；15～40min，0.1±0.05体积％甲酸水:乙腈为96～85:4～15；40～90min，0.1±0.05体积％甲酸水:乙腈为85～65:15～35；90～110min，0.1±0.05体积％甲酸水:乙腈为65～50:35～50；110～130min，0.1±0.05体积％甲酸水:乙腈为50～40:50～60；130～140min，0.1±0.05体积％甲酸水:乙腈为40～10:60～90；140～145min，0.1±0.05体积％甲酸水:乙腈为10～5:90～95。在本申请的优选实施方案中，本申请提供的一种苏黄止咳胶囊指纹图谱的检测方法，其中，HPLC色谱条件为：色谱柱：采用填料为十八烷基硅烷键合硅胶的色谱柱，可选规格4.6×250mm，5μm；流动相：流动相A和流动相B的混合物，其中，流动相A为0.05体积％甲酸水溶液，流动相B为乙腈；流动相梯度洗脱；柱温：28℃；流速：1mL·min-1；检测波长：254nm；进样量：10μL。在本申请的优选实施方案中，所述供试品溶液的制备为：取苏黄止咳胶囊，去胶囊壳，精密称定0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加入30mL60体积％甲醇水溶液称定重量，超声40min，补足减失重量，滤过，取续滤液，过0.45μm微孔滤膜，即得供试品溶液；所述流动相洗脱梯度为：0～15min,0.05体积％甲酸水:乙腈为96:4；15～40min，0.05体积％甲酸水:乙腈为96～85:4～15；40～90min，0.05体积％甲酸水:乙腈为85～65:15～35；90～110min，0.05体积％甲酸水:乙腈为65～50:35～50；110～本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种苏黄止咳胶囊指纹图谱的检测方法，所述的检测方法包括如下步骤：/n(1)供试品溶液的制备：/n取苏黄止咳胶囊，去胶囊壳，精密称定0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加入30±5mL 60±10体积％甲醇水溶液称定重量，超声40±10min，取出冷却至室温，补足减失重量，滤过，取续滤液，过0.45μm微孔滤膜，即得供试品溶液；/n(2)HPLC色谱条件的确定/n色谱柱：采用填料为十八烷基硅烷键合硅胶的色谱柱/n流动相：流动相A和流动相B的混合物，其中，流动相A为0.1±0.05体积％甲酸水溶液，流动相B为乙腈；流动相梯度洗脱；/n柱温：30±5℃；/n流速：1±0.5mL·min

【技术特征摘要】
1.一种苏黄止咳胶囊指纹图谱的检测方法，所述的检测方法包括如下步骤：
(1)供试品溶液的制备：
取苏黄止咳胶囊，去胶囊壳，精密称定0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加入30±5mL60±10体积％甲醇水溶液称定重量，超声40±10min，取出冷却至室温，补足减失重量，滤过，取续滤液，过0.45μm微孔滤膜，即得供试品溶液；
(2)HPLC色谱条件的确定
色谱柱：采用填料为十八烷基硅烷键合硅胶的色谱柱
流动相：流动相A和流动相B的混合物，其中，流动相A为0.1±0.05体积％甲酸水溶液，流动相B为乙腈；流动相梯度洗脱；
柱温：30±5℃；
流速：1±0.5mL·min-1；
检测波长：230±30nm；
进样量：10±5μL；
(3)HPLC图谱的测定
取所述供试品溶液，根据所述HPLC色谱条件进样，得到HPLC色谱图；
(4)标准指纹图谱的建立
在上述HPLC图谱中确定共有特征峰，所述共有特征峰包括下列成分的共有特征峰：
腺苷、1-咖啡酰奎宁酸、绿原酸、夏佛塔苷、牛蒡苷、五味子醇甲、戈米辛D、五味子醇乙、当归酰戈米辛H、白花前胡甲素和五味子乙素。


2.根据权利要求1所述的检测方法，其中，所述腺苷、1-咖啡酰奎宁酸、绿原酸、夏佛塔苷、牛蒡苷、五味子醇甲、戈米辛D、五味子醇乙、当归酰戈米辛H、白花前胡甲素和五味子乙素，为11个共有峰，并经对照品指认，其相对保留时间如下：分别以19.6417min、51.5968min和103.2624min的色谱峰保留时间为参照，相对保留时间分别为：以19.6417min色谱峰保留时间为参照，0.3207、0.7817；以51.5968min的色谱峰保留时间为参照，0.6455、0.9116、1.3868；以103.2624min的色谱峰保留时间为参照，1.0000、1.0374、1.0663、1.1281、1.1975、1.3501。


3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其中，在所述HPLC图谱中确定22共有特征峰，所述22个共有特征峰的相对保留时间为：分别以19.6417min、51.5968min和103.2624min的色谱峰保留时间为参照，计算其余19个共有峰相对保留时间，其中22个共有峰保留时间分别为：以19.6417min色谱峰保留时间为参照，0.3207、0.3605、0.4805、0.5080、0.7817、1.0000；以51.5968min的色谱峰保留时间为参照，0.5141、0.6455、0.7566、0.9116、1.0000、1.3868、1.4096；以103.2624min的色谱峰保留时间为参照，0.9580、1.0000、1.0374、1.0663、1.1281、1.1975、1.3234、1.3501、1.3561。


4.根据权利要求1所述的检测方法，其中，所述流动相洗脱梯度为：
0～15min,0.1±0.05体积％甲酸水:乙腈为96:4；
15～40min，0.1±0.05体积％甲酸水:乙腈为96～85:4～15；
40～90min，0.1±0.05体积％甲酸水:乙腈为85～65:15～35；
90～110min，0.1±0.05体积％甲酸水:乙腈为65～50:35～50；
110～130min，0.1±0.05体积％甲酸水:乙腈为50～40:50～60；
130～140min，0.1±0.05体积％甲酸水:乙腈为40～10:60～90；
140～145min，0.1±0.05体积％甲酸水:乙腈为10～5:90～95。


5.根据权利要求1所述的检测方法，其中，HPLC色谱条件为：
色谱柱：采用填料为十八烷基硅烷键合硅胶的色谱柱，可选规格4.6×250mm，5μm；
流动相：流动相A和流动相B的混合物，其中，流动相A为0.05体积％甲酸水溶液，流动相B为乙腈；流动相梯度洗脱；
柱温：28℃；
流速：1mL·...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾毓宁，谭宁华，陈东，巫兴东，
申请(专利权)人：扬子江药业集团北京海燕药业有限公司，扬子江药业集团有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11