磁珠包被物及其制备方法和应用、检测试剂盒技术

本发明专利技术涉及一种磁珠包被物及其制备方法和应用、检测试剂盒。该磁珠包被物包括：蛋白质、聚乙二醇修饰剂和纳米磁珠，聚乙二醇修饰剂与蛋白质共价连接，纳米磁珠与蛋白质连接。上述磁珠包被物的稳定性较好。

Bead coating and its preparation, application, test kit

【技术实现步骤摘要】
磁珠包被物及其制备方法和应用、检测试剂盒
本专利技术涉及免疫学检测，特别是涉及一种磁珠包被物及其制备方法和应用、检测试剂盒。
技术介绍
磁珠包被物通过将抗原或者抗体结合到磁珠的表面而得到。磁珠包被物能够作为免疫检测试剂的组成部分，以应用于免疫检测和免疫诊断中，例如化学发光平台的免疫检测和免疫诊断。一般地，通过将待测样品与磁珠包被物表面的抗原或者抗体进行免疫反应以捕获待测样品中的待检测物，再利用化学发光技术对捕获到的待检测物进行定量或者定性检测。磁珠包被物作为免疫检测试剂的重要成分，对免疫检测试剂的性能影响巨大。然而，现有的磁珠包被物的稳定性相对较差，不能满足实际需要。
技术实现思路
基于此，有必要提供一种稳定性较好的磁珠包被物。此外，还提供一种磁珠包被物的制备方法、应用和检测试剂盒。一种磁珠包被物，包括：蛋白质、聚乙二醇修饰剂和纳米磁珠，所述聚乙二醇修饰剂与所述蛋白质共价连接，所述纳米磁珠与所述蛋白质连接。上述磁珠包被物通过将聚乙二醇修饰剂与蛋白质共价连接，使得蛋白质连接有PEG臂，以增加蛋白质的空间结构刚性，提高蛋白质的稳定性，且连接有聚乙二醇修饰剂的蛋白质与纳米磁珠连接后，能够得到稳定性较高的磁珠包被物。在其中一个实施例中，所述聚乙二醇修饰剂的结构式为所述聚乙二醇修饰剂与所述蛋白质形成-NH-CO-结构而使所述聚乙二醇修饰剂与所述蛋白质连接；进一步地，所述聚乙二醇修饰剂的氨基与所述蛋白质的羧基形成所述-NH-CO-结构。在其中一个实施例中，所述聚乙二醇修饰剂的重均分子量在200以上；及/或，所述n大于或者等于4；及/或，所述蛋白质为抗原或者抗体。在其中一个实施例中，所述纳米磁珠具有活性基团，所述活性基团与所述蛋白质的氨基反应而使所述纳米磁珠与所述蛋白质连接；进一步地，所述活性基团为羧基，所述活性基团与所述蛋白质的氨基形成-NH-CO-结构而使所述纳米磁珠与所述蛋白质连接。一种磁珠包被物的制备方法，包括如下步骤：将聚乙二醇修饰剂和蛋白质偶联反应，以使所述聚乙二醇修饰剂与所述蛋白质共价连接，得到修饰化蛋白；及将所述修饰化蛋白与纳米磁珠偶联反应，以使所述修饰化蛋白与所述纳米磁珠连接，得到磁珠包被物。在其中一个实施例中，所述聚乙二醇修饰剂的结构式为所述将聚乙二醇修饰剂与所述蛋白质偶联反应，以使所述聚乙二醇修饰剂与所述蛋白质共价连接，得到修饰化蛋白的步骤包括：将所述聚乙二醇修饰剂与所述蛋白质混合并反应，以使所述聚乙二醇修饰剂与所述蛋白质形成-NH-CO-结构而使所述聚乙二醇修饰剂与所述蛋白质共价连接，得到所述修饰化蛋白。在其中一个实施例中，所述将所述聚乙二醇修饰剂与所述蛋白质混合并反应，以使所述聚乙二醇修饰剂与所述蛋白质形成-NH-CO-结构而使所述聚乙二醇修饰剂与所述蛋白质共价连接的步骤包括：将交联剂与所述蛋白质的羧基反应形成中间物；将所述中间物与所述聚乙二醇修饰剂的氨基反应形成所述-NH-CO-结构而使所述聚乙二醇修饰剂与所述蛋白质共价连接，得到所述修饰化蛋白。在其中一个实施例中，所述将所述修饰化蛋白与纳米磁珠偶联反应的步骤包括：所述纳米磁珠具有活性基团，所述活性基团与所述修饰化蛋白的氨基反应而使所述纳米磁珠与所述修饰化蛋白连接，得到所述磁珠包被物。上述的磁珠包被物或者上述的磁珠包被物的制备方法制备得到的磁珠包被物在制备检测试剂、检测试剂盒或者检测装置中的应用。一种检测试剂盒，包括上述的磁珠包被物或者上述的磁珠包被物的制备方法制备得到的磁珠包被物。附图说明图1为一实施方式的磁珠包被物的制备方法的流程示意图。具体实施方式为了便于理解本专利技术，下面将参照相关附图对本专利技术进行更全面的描述。附图中给出了本专利技术的较佳的实施例。但是，本专利技术可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本专利技术的公开内容的理解更加透彻全面。除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本专利技术的
的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本专利技术的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本专利技术。一实施方式的磁珠包被物具有较高的稳定性，能够用于制备检测试剂、检测试剂盒或者检测装置。具体地，该磁珠包被物包括：蛋白质、聚乙二醇修饰剂和纳米磁珠，聚乙二醇修饰剂与蛋白质共价连接，纳米磁珠与蛋白质连接。上述磁珠包被物通过将聚乙二醇修饰剂与蛋白质共价连接，使得蛋白质连接有PEG臂，以增加蛋白质的空间结构刚性，提高蛋白质的稳定性，且将连接有聚乙二醇修饰剂的蛋白质与纳米磁珠连接后，能够得到稳定性较高的磁珠包被物。蛋白质能够与待检测物结合，从而对测试样本中的待检测物进行定性或者定量检测。测试样本例如可以为血液。需要说明的是，测试样本不限于为血液，还可以为其他测试样本，例如可以为唾液或者胃液。在其中一个实施例中，蛋白质为抗原或者抗体。需要说明的是，在抗原和抗体包被过程中，由于抗原结构复杂，相对于抗体包被难度更大。在其中一个实施例中，蛋白质为EBNAIgG抗原(疱疹病毒科嗜淋巴细胞的DNA病毒核抗原IgG)或者ToxoIgM抗原(弓形虫病毒IgM抗原)。需要说明的是，蛋白质不限于为上述指出的抗原，还可以为其他抗原。在其中一个实施例中，蛋白质为肌钙蛋白I(cTnI)抗体。需要说明的是，蛋白质不限于为上述指出的抗体，还可以为其他抗体，例如可以为癌抗原15-3(CA15-3)抗体。聚乙二醇修饰剂能够影响蛋白质的空间结构，引起蛋白质的各种生物化学性质的改变，包括：增加化学稳定性，提高蛋白水解酶的抵抗能力，提高蛋白质的水溶性，在免疫反应过程中减少由于蛋白质的疏水作用而产生的非特异性吸附，降低蛋白质的毒副作用，延长蛋白质的半衰期，提高蛋白质的稳定性。并且聚乙二醇修饰剂在空间上不会阻挡到蛋白质的免疫结合位点，因此，采用聚乙二醇修饰剂修饰蛋白质基本不会影响蛋白质的免疫活性。在其中一个实施例中，聚乙二醇修饰剂的结构式为聚乙二醇修饰剂与蛋白质形成-NH-CO-结构而使聚乙二醇修饰剂与蛋白质共价连接。进一步地，聚乙二醇修饰剂的氨基与蛋白质的羧基形成-NH-CO-结构。需要说明的是，不限于为聚乙二醇修饰剂的氨基与蛋白质的羧基形成-NH-CO-结构，也可以为聚乙二醇修饰剂的羧基与蛋白质的氨基形成-NH-CO-结构。在其中一个实施例中，聚乙二醇修饰剂的重均分子量为200～1200。此种设置，使得聚乙二醇修饰剂在空间上不会阻挡到蛋白质的免疫结合位点，采用聚乙二醇修饰剂修饰后对蛋白质的免疫活性影响较小。需要说明的是，采用分子量过大的聚乙二醇修饰剂修饰容易降低蛋白质的生物活性，而采用分子量过小的聚乙二醇修饰剂对维持修饰化蛋白的稳定性的作用较弱。在其中一个实施例中，n大于或者等于4。进一步地，n为4～24。需要说明的是，聚乙二醇修饰剂的聚合度越大会导致分子量越大，采用分子量过大的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种磁珠包被物，其特征在于，包括：蛋白质、聚乙二醇修饰剂和纳米磁珠，所述聚乙二醇修饰剂与所述蛋白质共价连接，所述纳米磁珠与所述蛋白质连接。/n

【技术特征摘要】
1.一种磁珠包被物，其特征在于，包括：蛋白质、聚乙二醇修饰剂和纳米磁珠，所述聚乙二醇修饰剂与所述蛋白质共价连接，所述纳米磁珠与所述蛋白质连接。


2.根据权利要求1所述的磁珠包被物，其特征在于，所述聚乙二醇修饰剂的结构式为所述聚乙二醇修饰剂与所述蛋白质形成-NH-CO-结构而使所述聚乙二醇修饰剂与所述蛋白质连接；
进一步地，所述聚乙二醇修饰剂的氨基与所述蛋白质的羧基形成所述-NH-CO-结构。


3.根据权利要求1～2任一项所述的磁珠包被物，其特征在于，所述聚乙二醇修饰剂的重均分子量在200以上；
及/或，所述n大于或者等于4；
及/或，所述蛋白质为抗原或者抗体。


4.根据权利要求1～2任一项所述的磁珠包被物，其特征在于，所述纳米磁珠具有活性基团，所述活性基团与所述蛋白质的氨基反应而使所述纳米磁珠与所述蛋白质连接；
进一步地，所述活性基团为羧基，所述活性基团与所述蛋白质的氨基形成-NH-CO-结构而使所述纳米磁珠与所述蛋白质连接。


5.一种磁珠包被物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
将聚乙二醇修饰剂和蛋白质偶联反应，以使所述聚乙二醇修饰剂与所述蛋白质共价连接，得到修饰化蛋白；及
将所述修饰化蛋白与纳米磁珠偶联反应，以使所述修饰化蛋白与所述纳米磁珠连接，得到磁珠包被物。


6.根据权利要求5所述的磁珠包被物的制备方法，其特征在于，所述聚乙二醇修饰剂的结...

【专利技术属性】
技术研发人员：高晨燕，王光亮，祝亮，何凡，王晓炜，
申请(专利权)人：香港大德昌龙生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：中国香港;81