结合凝血因子IX和凝血因子X的双特异性抗体制造技术

本公开提供选择性结合特定形式凝血因子的抗体，特别是，特异性结合活化因子IX(FIXa)的抗体，其中所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分在FIXa和因子IX酶原(FIXz)存在下优先结合FIXa；以及特异性结合因子X酶原(FXz)的抗体，其中所述抗FXz抗体或其抗原结合部分在FXz和活化因子X(FXa)存在下优先结合FXz。还提供包含例如抗FIXa抗体或其抗原结合部分和/或抗FXz抗体或其抗原结合部分的双特异性分子(例如抗体)。本公开还提供编码所公开的抗体和双特异性分子的组合物、载体、细胞、药物组合物和诊断组合物、药盒、制造方法、使用方法以及免疫缀合物。

Bispecific antibody combining coagulation factor IX and coagulation factor X

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】结合凝血因子IX和凝血因子X的双特异性抗体先前提交的申请的引用本申请要求2016年11月23日提交的美国临时申请号62/425,921、2017年1月31日提交的美国临时申请号62/452,809、2017年7月7日提交的美国临时申请号62/529,805和2017年11月16日提交的美国临时申请号62/587,284的权益，所述专利以引用的方式整体并入本文中。经由EFS-WEB以电子方式提交的序列表的引用与本申请一起提交的以电子方式提交的序列表(名称：SA9_453_SL.txt；大小：1,154,440字符；并且创建日期：2019年5月23日)的内容以引用的方式整体并入本文中。
技术介绍

本申请尤其涉及优先结合活化凝血因子IX或凝血因子X酶原的抗体，以及包含模拟活化因子VIII辅因子的两种特异性的双特异性分子。
技术介绍
血友病A为由因子VIII(FVIII)基因突变引起的严重X染色体连锁隐性病症。FVIII参与固有凝血途径，并且FVIII缺乏导致血液凝固不良，或完全不凝固。FVIII缺乏症，又称为血友病A，为最常见的出血性病症之一，并且约10,000位男性中有一位患病(Stonebraker等人(2012)Haemophilia18(3):e91-4)。血友病A具有通过因子FVIII血浆水平所定义的三个严重程度度等级：1％或更低(“重度”)、2至5％(“中度”)和6至30％(“轻度”)(White等人(2001)Thromb.Haemost.85:560)。在所述病症的重度形式中，第一次出血通常在5至6个月龄时出现，而在中度形式中，第一次出血延迟直到约1至2岁时才出现。出血可以自发地出现，或在微小外伤之后出现。在所有血友病A患者中有约一半被归类为患有所述疾病的重度形式。这些患者在儿童期早期开始经历严重出血，并且在以后生命中经历自发或过量出血的频繁发作。出血通常在关节和肌肉中发生，并且在没有适当治疗的情况下，反复出血可导致不可逆的出血性关节病变(Manco-Johnson等人(2007)N.Engl.J.Med.357(6):535-44)。血友病A治疗的主要目标为维持FVIII血浆水平>1％，从而降低出血风险。为实现此目的，常常静脉内施用重组或来源于血浆的FVIII作为预防疗法。然而，血友病A的这种目前的治疗标准很难，具有若干缺点，并且对患者和其家庭带来相当大的生理和精神负担。FVIII治疗的最常见阻碍为产生针对FVIII的同种抗体，其充当FVIII抑制剂。有多达30％的重度患者产生此类同种抗体，并且一旦产生，使用FVIII治疗正在发生的出血的有效性便受到限制(Kempton和White(2009)Blood113(1):11-7)。在此类情况下，使用另选的绕过剂来控制出血。然而，这些剂通常具有较短的半衰期并且并不总是有效。此外，由于血浆半衰期短(在成人体内平均约12小时，并且在儿童体内甚至更短)，所以需要频繁施用FVIII。此类方案可能很难实现，特别是在幼儿中。由于可用的治疗伴随并发症和副作用，所以没有最佳并且有效治疗血友病的单一治疗。因此，仍需要解决用FVIII治疗血友病A的缺点的新颖并且有效的治疗。
技术实现思路
本公开提供一种特异性结合活化因子IX(FIXa)的分离抗体或其抗原结合部分(“抗FIXa抗体或其抗原结合部分”)，其中所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分在FIXa和因子IX酶原(FIXz)的存在下优先结合FIXa。在一些方面中，所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分结合FIXa的结合亲和力高于所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分结合FIXz的结合亲和力。本公开还提供一种分离抗FIXa抗体或其抗原结合部分，其结合FIXa的结合亲和力高于所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分结合FIXz的结合亲和力。在一些方面中，如通过生物膜层干涉(Bio-LayerInterferometry，BLI)测定所测定，所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分以约100nM或更低、约90nM或更低、约80nM或更低、约70nM或更低、约60nM或更低、约50nM或更低、约40nM或更低、约30nM或更低、约20nM或更低、约10nM或更低、约8nM或更低、约6nM或更低、约4nM或更低、约2nM或更低、约1nM或更低的KD结合FIXa。在一些方面中，FIXa为游离FIXa、因子X活化酶(tenase)复合物中的FIXa或共价连接至EGR-CMK的FIXa(FIXa-SM)。在一些方面中，FIXz包含不可活化因子IX(FIXn)。在一些方面中，所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分与选自由图3A、图3B和图3C中的抗体组成的组的参考抗体交叉竞争。在一些方面中，所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分与选自由图3A、图3B和图3C中的抗体组成的组的参考抗体结合相同表位。在一些方面中，此类参考抗体选自BIIB-9-484、BIIB-9-440、BIIB-9-882、BIIB-9-460、BIIB-9-433以及其任何组合。在一些方面中，所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分相较于游离FIXa或FIXz优先结合FIXa-SM并且/或者结合FIXa-SM的结合亲和力高于所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分结合游离FIXa或FIXz的结合亲和力。在一些方面中，所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分与选自由图3A中的抗体组成的组的参考抗体交叉竞争。在一些方面中，所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分与选自由图3A中的抗体组成的组的参考抗体结合相同表位。在一些方面中，此类参考抗体选自BIIB-9-484、BIIB-9-440、BIIB-9-460以及其任何组合。在一些方面中，所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分相较于FIXa-SM或FIXz优先结合游离FIXa，和/或其结合FIXa的结合亲和力高于所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分结合FIXa-SM或FIXz的结合亲和力合亲和力结合FIXa。在一些方面中，所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分与选自由图3B中的抗体组成的组的参考抗体交叉竞争。在一些方面中，所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分与选自由图3B中的抗体组成的组的参考抗体结合相同表位。在一些方面中，所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分相较于FIXz优先结合游离FIXa或FIXa-SM并且/或者其结合游离FIXa或FIXa-SM的结合亲和力高于所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分结合FIXz的结合亲和力。在一些方面中，所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分与选自由图3C中的抗体组成的组的参考抗体交叉竞争。在一些方面中，所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分与选自由图3C中的抗体组成的组的参考抗体结合相同表位。在一些方面中，此类参考抗体选自BIIB-9-882、BIIB-9-433以及其任何组合。在一些方面中，所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分包含CDR1、CDR2和CDR3，其中所述CDR3包含选自由图3A、图3B和图3C中的VHCDR3组成的组的VHCDR3或具有一个或两个突变的VHCDR3。在一些方面中，所述抗FIXa抗体或其抗本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种特异性结合活化因子IX(FIXa)的分离抗体或其抗原结合部分(“抗FIXa抗体或其抗原结合部分”)，其中所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分在FIXa和因子IX酶原(FIXz)存在下优先结合FIXa，或其中所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分结合FIXa的结合亲和力高于所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分结合FIXz的结合亲和力。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20161123 US 62/425,921;20170131 US 62/452,809;20171.一种特异性结合活化因子IX(FIXa)的分离抗体或其抗原结合部分(“抗FIXa抗体或其抗原结合部分”)，其中所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分在FIXa和因子IX酶原(FIXz)存在下优先结合FIXa，或其中所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分结合FIXa的结合亲和力高于所述抗FIXa抗体或其抗原结合部分结合FIXz的结合亲和力。


2.如权利要求1所述的抗FIXa抗体或其抗原结合部分，其与选自由图3A、图3B和图3C中的抗体组成的组的参考抗体交叉竞争或与所述参考抗体结合相同表位。


3.如权利要求3所述的抗FIXa抗体或其抗原结合部分，其中所述表位包含FIXa重链序列的胰凝乳蛋白酶原编号的氨基酸残基H91、H92、N93、H101、D125、K126、E127、Y128、R165、Y177、N178、N179、S232、R233、Y234、V235、N236、W237、E240和K241，或其组合。


4.如权利要求1至3所述的抗FIXa抗体或其抗原结合部分，其包含VHCDR1、VHCDR2和VHCDR3，其中(i)所述VHCDR1包含选自由图3A、图3B和图3C中的VHCDR1，SEQIDNO:2058至2063组成的组的VHCDR1或具有一个或两个突变的VHCDR1；并且/或者(ii)所述VHCDR2包含选自由图3A、图3B和图3C中的VHCDR2，SEQIDNO:2084至2089组成的组的VHCDR2或具有一个或两个突变的VHCDR2；并且/或者(iii)所述VHCDR3包含选自由图3A、图3B和图3C中的VHCDR3，SEQIDNO:2084至2089组成的组的VHCDR3或具有一个或两个突变的VHCDR3；并且/或者其中(iv)所述VLCDR1包含选自由图3A、图3B和图3C中的VLCDR1，SEQIDNO:2136至2141组成的组的VLCDR1或具有一个或两个突变的VLCDR1；并且/或者(v)所述VLCDR2包含选自由图3A、图3B和图3C中的VLCDR2，SEQIDNO:2162至2167组成的组的VLCDR2或具有一个或两个突变的VLCDR2；并且/或者(vi)所述VLCDR3包含选自由图3A、图3B和图3C中的VLCDR3，SEQIDNO:2188至2193组成的组的VLCDR3或具有一个或两个突变的VLCDR3。


5.如权利要求1至4所述的抗FIXa抗体或其抗原结合部分，其包含VH和VL，其中(a1)VH和VL分别包含SEQIDNO:31和221(BIIB-9-484)；(a2)VH和VL分别包含SEQIDNO:19和209(BIIB-9-440)；(a3)VH和VL分...

【专利技术属性】
技术研发人员：R·T·皮特斯，N·莱克萨，B·R·皮尔斯，J·库曼，M·阿里曼，A·古德曼，
申请(专利权)人：比奥维拉迪维治疗股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US