【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】截短的NKG2D嵌合受体及其在自然杀伤细胞免疫疗法中的用途相关申请的交叉引用本申请要求于2017年3月27日提交的美国临时申请号62/477,335以及于2018年2月9日提交的美国临时申请号62/628,774的权益。将以上列出的每个申请的全部内容通过引用结合在此。ASCII文本文件中的材料通过引用结合在此。本申请将包含在以下ASCII文本文件中的序列表通过引用结合，该序列表在此同时提交：a)文件名称：44591144002SequenceListing.txt；2018年3月27日创建，186KB大小。
技术介绍
许多疾病的出现和持续存在的特征是对异常细胞(包括恶性的和病毒感染的细胞)的免疫应答不足。免疫疗法是使用和操纵患者的免疫系统来治疗各种疾病。
技术实现思路
免疫疗法在疾病的治疗中呈现出新的技术进步，其中免疫细胞被工程改造以表达特定的靶向和/或效应分子，其特异性识别患病的或受损的细胞并与之反应。这代表了有希望的进步，至少部分是由于针对特异性靶向患病的或受损的细胞的潜力，这与更传统的方法(例如化学治疗)相反，所述更传统的方法中所有细胞都受到影响，而期望的结果是足够的健康细胞存活以容许患者生存。一种免疫疗法是在免疫细胞中重组表达嵌合受体，以实现靶向识别和破坏目标异常细胞。为了解决针对特异性靶向和破坏患病的或感染的细胞、使其失效或以其他方式致其惰性的这种需要，本文提供了编码嵌合受体的多核苷酸、氨基酸和载体，这些嵌合受体赋予细胞(例如自然杀伤细胞)增强的靶向和细胞毒性。...
【技术保护点】
1.一种编码嵌合受体的多核苷酸，该嵌合受体包含：/n(a)胞外受体结构域，/n其中所述胞外受体结构域包含与自然杀伤组2成员D(NKG2D)的天然配体结合的肽，/n其中与NKG2D的天然配体结合的该肽是NKG2D片段，/n其中该NKG2D片段由包含SEQ ID NO.2的多核苷酸编码；以及/n(b)包含跨膜区和胞内信号传导结构域的效应子结构域，/n其中该胞内信号传导结构域包含CD3ζ，并且/n其中该CD3ζ由包含SEQ ID NO.13的多核苷酸编码。/n
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170327 US 62/477,335;20180209 US 62/628,7741.一种编码嵌合受体的多核苷酸，该嵌合受体包含：
(a)胞外受体结构域，
其中所述胞外受体结构域包含与自然杀伤组2成员D(NKG2D)的天然配体结合的肽，
其中与NKG2D的天然配体结合的该肽是NKG2D片段，
其中该NKG2D片段由包含SEQIDNO.2的多核苷酸编码；以及
(b)包含跨膜区和胞内信号传导结构域的效应子结构域，
其中该胞内信号传导结构域包含CD3ζ，并且
其中该CD3ζ由包含SEQIDNO.13的多核苷酸编码。
2.如权利要求1所述的多核苷酸，其中该效应子结构域的跨膜区包含CD8a跨膜结构域。
3.如权利要求1所述的多核苷酸，其中该效应子结构域的跨膜区还包含CD8a铰链区。
4.如权利要求3所述的多核苷酸，其中该CD8a铰链区由包含SEQIDNO:5的多核苷酸编码。
5.如权利要求1所述的多核苷酸，其中该胞内信号传导结构域还包含4-1BB。
6.如权利要求5所述的多核苷酸，其中该4-1BB由包含SEQIDNO.12的多核苷酸编码。
7.如权利要求1所述的多核苷酸，其中该嵌合受体包含与CD8a偶联的NKG2D片段、4-1BB和CD3ζ。
8.如权利要求7所述的多核苷酸，其中该嵌合受体由SEQIDNO.18的核酸序列编码。
9.如权利要求7所述的多核苷酸，其中该嵌合受体由SEQIDNO.108的核酸序列编码。
10.如权利要求7所述的多核苷酸，其中该嵌合受体包含SEQIDNO.19的氨基酸序列。
11.一种治疗癌症的方法，该方法包括向患有癌症的受试者给予组合物，该组合物包含表达由如权利要求1至10中任一项所述的多核苷酸编码的嵌合受体的自然杀伤(NK)细胞。
12.如权利要求11所述的方法，其中所述NK细胞是从患有癌症或传染病的患者分离的自体细胞。
13.如权利要求11所述的方法，其中所述NK细胞是从供体分离的同种异体细胞。
14.如权利要求1-10中任一项所述的多核苷酸在制备用于增强有需要的哺乳动物中NK细胞细胞毒性的药物中的用途。
15.如权利要求1-10中任一项所述的多核苷酸在制备用于治疗或预防有需要的哺乳动物中的癌症或传染病的药物中的用途。
16.一种编码由细胞表达的嵌合受体的多核苷酸，该嵌合受体包含：
(a)胞外受体结构域，
其中所述胞外受体结构域包含与自然杀伤组2成员D(NKG2D)的天然配体结合的肽，
其中与NKG2D的天然配体结合的该肽是NKG2D片段，
其中该NKG2D片段由包含SEQIDNO.2的多核苷酸编码，以及
(b)包含跨膜区和胞内信号传导结构域的效应子结构域，
其中该胞内信号传导结构域包含CD3ζ，
其中该CD3ζ由包含SEQIDNO.13的多核苷酸编码并且
其中该细胞还包含膜结合的白细胞介素15(mbIL15)。
17.如权利要求16所述的多核苷酸，其中该效应子结构域的跨膜区包含CD8a跨膜结构域。
18.如权利要求16所述的多核苷酸，其中该效应子结构域的跨膜区还包含CD8a铰链区。
19.如权利要求18所述的多核苷酸，其中该CD8a铰链区由包含SEQIDNO:5的多核苷酸编码。
20.如权利要求16所述的多核苷酸，其中该mbIL15由包含SEQIDNO.16的多核苷酸编码。
21.如权利要求20所述的多核苷酸，其中该mbIL15在与该嵌合受体相同的多核苷酸上双顺反子表达。
22.如权利要求20所述的多核苷酸，其中mbIL15包含SEQIDNO:17的氨基酸序列。
23.如权利要求20所述的多核苷酸，其中该效应子结构域还包含OX-40结构域。
24.如权利要求23所述的多核苷酸，其中该嵌合受体包含与CD8a铰链偶联的NKG2D片段、CD8a跨膜结构域、该OX-40结构域、该CD3ζ。
25.如权利要求24所述的多核苷酸，其中该嵌合受体由SEQIDNO:90的核酸序列编码，该核酸序列与由SEQIDNO.16编码的mbIL15偶联。
26.如权利要求25所述的多核苷酸，其中该嵌合受体包含SEQIDNO:91的氨基酸序列，该氨基酸序列与包含SEQIDNO.17的氨基酸序列的mbIL15偶联。
27.如权利要求23所述的多核苷酸，其中该嵌合受体包含与IgG4铰链偶联的NKG2D片段、CD8a跨膜结构域、该OX-40结构域、该CD3ζ。
28.如权利要求27所述的多核苷酸，其中该嵌合受体由SEQIDNO:100的核酸序列编码，该核酸序列与由SEQIDNO.16编码的mbIL15偶联。
29.如权利要求28所述的多核苷酸，其中该嵌合受体包含SEQIDNO:101的氨基酸序列，该氨基酸序列与包含SEQIDNO.17的氨基酸序列的mbIL15偶联。
30.一种治疗癌症的方法，该方法包括向患有癌症的受试者给予组合物，该组合物包含表达由如权利要求15至29中任一项所述的多核苷酸编码的嵌合受体的自然杀伤(NK)细胞。
31.如权利要求30所述的方法，其中所述NK细胞是从患有癌症的患者分离的自体细胞。
32.如权利要求30所述的方法，其中所述NK细胞是从供体分离的同种异体细胞。
33.如权利要求15-29中任一项所述的多核苷酸在制备用于增强有需要的哺乳动物中NK细胞细胞毒性的药物中的用途。
34.如权利要求15-29中任一项所述的多核苷酸在制备用于治疗或预防有需要的哺乳动物中的癌症或传染病的药物中的用途。
35.一种编码嵌合受体的多核苷酸，该嵌合受体包含：
(a)胞外受体结构域，
其中所述胞外受体结构域包含与自然杀伤组2成员D(NKG2D)的天然配体结合的肽，
其中与NKG2D的天然配体结合的该肽是NKG2D片段，
其中该NKG2D片段由多核苷酸编码，该多核苷酸包含：(i)SEQIDNO:1的片段，(ii)SEQIDNO.2，或(iii)SEQIDNO.3；以及
(b)包含跨膜区和胞内信号传导结构域的效应子结构域。
36.如权利要求35所述的多核苷酸，其中该效应子结构域包含CD16。
37.如权利要求35所述的多核苷酸，其中该效应子结构域包含天然细胞毒性触发受体1(NCR1)。
38.如权利要求35所述的多核苷酸，其中该效应子结构域包含天然细胞毒性触发受体2(NCR2)或天然细胞毒性触发受体3(NCR3)。
39.如权利要求35-38中任一项所述的多核苷酸，其中该效应子结构域还包含4-1BB。
40.如权利要求36所述的多核苷酸，其中该嵌合受体包含与CD16偶联的NKG2D片段。
41.如权利要求40所述的多核苷酸，其中该嵌合受体由SEQIDNO:23的核酸序列编码。
42.如权利要求40所述的多核苷酸，其中该嵌合受体包含SEQIDNO:24的氨基酸序列。
43.如权利要求40所述的多核苷酸，其中该嵌合受体包含与NCR1偶联的NKG2D片段。
44.如权利要求43所述的多核苷酸，其中该嵌合受体由SEQIDNO:27的核酸序列编码。
45.如权利要求43所述的多核苷酸，其中该嵌合受体包含SEQIDNO:28的氨基酸序列。
46.如权利要求38所述的多核苷酸，其中该嵌合受体包含SEQIDNO:21的氨基酸序列的至少一部分。
47.如权利要求36所述的多核苷酸，其中该嵌合受体包含与NCR3偶联的NKG2D片段。
48.如权利要求47所述的多核苷酸，其中该嵌合受体由SEQIDNO.29的核酸序列编码。
49.如权利要求47所述的多核苷酸，其中该嵌合受体包含SEQIDNO.30的氨基酸序列。
50.如权利要求39所述的多核苷酸，其中该嵌合受体包含与CD16跨膜/胞内结构域偶联的NKG2D片段和4-1BB。
51.如权利要求39所述的多核苷酸，其中该嵌合受体包含与CD8a铰链偶联的NKG2D片段、CD16跨膜/胞内结构域和4-1BB。
52.如权利要求51所述的多核苷酸，其中该嵌合受体由SEQIDNO:25的核酸序列编码。
53.如权利要求51所述的多核苷酸，其中该嵌合受体包含SEQIDNO:26的氨基酸序列。
54.如权利要求39所述的多核苷酸，其中该嵌合受体包含与NCR1偶联的NKG2D片段和4-1BB。
55.如权利要求54所述的多核苷酸，其中该嵌合受体包含SEQIDNO:20的NCR1氨基酸序列。
56.如权利要求39所述的多核苷酸，其中该嵌合受体包含与CD8a偶联的NKG2D片段、4-1BB和CD3ζ。
57.如权利要求56所述的多核苷酸，其中该嵌合受体由SEQIDNO.18的核酸序列编码。
58.如权利要求56所述的多核苷酸，其中该嵌合受体包含SEQIDNO.19的氨基酸序列。
59.如权利要求39所述的多核苷酸，其中该嵌合受体包含与NCR3偶联的NKG2D片段和4-1BB，并且其中该NCR3包含SEQIDNO:22的氨基酸序列。
60.如权利要求39所述的多核苷酸，其中该嵌合受体包含SEQIDNO:20的NCR1跨膜/胞内结构域或SEQIDNO:22的NCR3跨膜/胞内结构域中的一个或多个。
61.如权利要求39所述的多核苷酸，其中该效应子结构域包含4-1BB与CD16、NCR1、NCR3、2B4或NKp80之一之间的GS接头。
62.如权利要求35-61中任一项所述的多核苷酸，其中该嵌合受体结构域包含铰链区。
63.如权利要求62所述的多核苷酸，其中该铰链区由SEQIDNO:5的核酸序列编码。
64.如权利要求62所述的多核苷酸，其中该铰链区由SEQIDNO:5的核酸序列的片段编码。
65.如权利要求62所述的多核苷酸，其中该铰链区包含具有SEQIDNO:31的氨基酸序列的甘氨酸-丝氨酸重复基序。
66.如权利要求62所述的多核苷酸，其中该铰链区包含SEQIDNO:32的氨基酸序列。
67.如权利要求62所述的多核苷酸，其中该铰链区包含SEQIDNO:33的氨基酸序列。
68.如权利要求62所述的多核苷酸，其中该铰链区由SEQIDNO:34的核酸序列编码。
69.如权利要求62所述的多核苷酸，其中该铰链区包含β-肾上腺素能受体的一部分。
70.如权利要求69所述的多核苷酸，其中该铰链区由SEQIDNO:40的核酸序列编码。
71.如权利要求69所述的多核苷酸，其中该铰链区由SEQIDNO:42的核酸序列编码。
72.如权利要求35-71中任一项所述的多核苷酸，其中该胞外受体结构域还包含CD8a信号肽，其中该信号肽包含SEQIDNO.4的核酸序列。
73.如权利要求35-72中任一项所述的多核苷酸，...
【专利技术属性】
技术研发人员：梁峻豪，岛崎纪子，萧思文，D·坎帕纳，J·B·特拉格尔，A·L·L·拉泽迪克，郭超，路旋·郭·布伦，S·S·马斯拉尼，
申请(专利权)人：新加坡国立大学，恩卡尔塔公司，
类型：发明
国别省市：新加坡;SG
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。