一种快速检测树莓中酚酸化合物的方法技术

本发明专利技术公开了一种快速检测树莓中酚酸化合物的方法，采用高效液相色谱同时进行定性或/和定量检测树莓中的酚酸化合物，液相色谱的检测条件包括：色谱柱为Hypersil

A rapid method for the determination of phenolic acids in Raspberry

【技术实现步骤摘要】
一种快速检测树莓中酚酸化合物的方法
本专利技术涉及质量分析领域，特别是涉及一种快速检测树莓中酚酸化合物的方法。
技术介绍
树莓是世界上最受欢迎的浆果之一，可以鲜食，果实还可加工成果汁、果酒、果浆、蜜饯、果干、果冻以及作为果粒添加到乳制品中，具有改善新陈代谢、增强抗病能力的作用，是老少皆宜的果中佳品。近年来，树莓一直深受人们青睐，还因为树莓是一种非常有效的生物活性酚类化合物的来源。目前，在树莓中已经发现的酚酸有对香豆酸、阿魏酸、咖啡酸、鞣花酸、儿茶素等。浆果中所能提供酚类化合物与人类身体健康有着密切的相关性。由于酚酸的结构，使其在紫外区具有选择性吸光度。鉴于该特性，HPLC、分光光度法、HPLC-ESI–MS、HPLC-DAD-ESI–MS和高分辨率质谱均可用于测定酚酸的总含量。但所有这些方法均具有分析方法中的酚酸种类有限、用常规仪器分析需要较长的分析时间或者需要比较昂贵的仪器等明显的缺点。为了解决这些问题，丞需建立可替代的能满足酚酸快速分析的方法。
技术实现思路
本专利技术主要解决的技术问题是提供一种快速检测树莓中酚酸化合物的方法，能够同时检测树莓中的9种酚酸化合物。为解决上述技术问题，本专利技术采用的一个技术方案是：提供一种快速检测树莓中酚酸化合物的方法，采用高效液相色谱同时进行定性或/和定量检测树莓中的酚酸化合物，液相色谱的检测条件包括：色谱柱：烷基键合硅胶柱，进一步选自HypersilTMGOLD色谱柱；流动相：流动相A、流动相B；其中，流动相A为质量浓度为0.3％甲酸水溶液；流动相B为含有质量浓度为5％乙腈和0.3％甲酸的水溶液；流动相采用如下梯度洗脱程序：时间(min)流动相A(vol.％)流动相B(vol.％)01～397～9983～793～97188～1288～92218～1288～923023～2773～773597～1000～3。进一步地，所述酚酸化合物选自没食子酸、儿茶素、绿原酸、香草酸、丁香酸、香豆酸、阿魏酸、迷迭香酸、槲皮素中的一种或几种。在上述9种酚酸化合物中，被报道过在树莓含有的有没食子酸、儿茶素、绿原酸、香草酸、香豆酸、阿魏酸和槲皮素，而丁香酸和迷迭香酸在树莓中含有是本专利技术首次检测出。应用本专利技术的色谱条件，上述9种酚酸之间均能达到有效分离，能够同时检测9不同品种的树莓中这9种酚酸的有无及含量，可极大的提升检测效率。在本专利技术的具体实施方式中，流动相采用如下梯度洗脱程序：时间(min)流动相A(vol.％)流动相B(vol.％)029885951810.589.52110.589.5302575351000。进一步地，所述液相色谱检测条件还包括以下的i～iv中的一项或多项：i色谱柱规格：4.6×250mm，5μm；ii流速：0.5～1.5ml/min；iii柱温：25℃～35℃；iv检测波长：280～320nm。进一步地，所述液相色谱检测条件还包括以下的i～iv中的一项或多项：i色谱柱规格：4.6×250mm，5μm；ii流速：1.0ml/min；iii柱温：30℃；iv检测波长：280nm。进一步地，所述方法包括以下内容：(1)制备供试品溶液；(2)制备对照品溶液；(3)将对照品溶液进样检测；(4)将供试品溶液进样检测。进一步地，制备对照溶液的步骤为：将样品用溶剂溶解，再用稀释剂稀释到指定浓度。进一步地，所述溶剂选自水和/或乙腈；所述稀释剂选自乙腈。进一步地，制备供试品溶液的步骤为：将干燥后的树莓样品用溶剂溶解，超声、离心处理后，收集上层清液过滤后即得；进一步地，所述溶剂选自乙醇水溶液、甲醇水溶液；更进一步地，所述溶剂选自质量浓度为65％的乙醇水溶液。在本专利技术的具体实施方式中，所述超声处理的条件为45℃下超声处理50min；所述离心处理的条件为4000rpm离心10min；所述过滤的条件为透过0.45μm尼龙膜。进一步地，进样量为5～20μl，优选为10μl。本专利技术的有益效果是：(1)本专利技术检测方法可一次性检测出树莓中没食子酸、儿茶素、绿原酸、香草酸、丁香酸、香豆酸、阿魏酸、迷迭香酸、槲皮素这9种酚酸化合物的有无及含量，系统适用性好，各酚酸化合物之间分离良好，检测限与定量限满足测定要求，且各酚酸化合物线性良好，本方法准确度及精密度均符合要求，方便快捷有效，为树莓的质量控制检测提供高下的新方法。(2)本专利技术检测方法检测出一些品种的树莓中含有丁香酸和迷迭香酸，以前的检测方法均未检出过，为树莓在药用和保健等价值方面的开发提供新的更全面的参考依据。(3)利用本专利技术的检测方法，可对比不同产地不同品种的树莓酚酸化合物含量及差异性，为树莓的引种、优质栽培及质量评价提供理论依据。附图说明图1是本专利技术检测方法空白样品检测谱图；图2是本专利技术检测方法酚酸标准溶液检测谱图；图3是本专利技术树莓代表样品Canby检测谱图。图中：峰1：没食子酸，峰2：儿茶素，峰3：绿原酸，峰4：香草酸，峰5：丁香酸，峰6：香豆酸，峰7：阿魏酸，峰8：迷迭香酸，峰9：槲皮素。具体实施方式下面结合附图对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1一、仪器与试剂材料：树莓，由青海瑶池生物科技有限公司提供，包括青海省成功引种外来商品种28个(Meeker,Boyne,Tulameet,Fortodi,Lauren,Canby,Taylor,Tulameen,Reveille,Coho,Encore,Herokee,Kitsilano,Chilcotin,Titan,Latham,RaspberryNano,Chillieack,TripleCrown,Boysenberry,Shawnee,HoneyQueen,FullofredRaspberry,AutumnBritten，AutumnBliss,Heritage,Killarney,Kiwigold)和原有当地种9个(L本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测树莓中酚酸化合物的方法，其特征在于，采用高效液相色谱同时进行定性或/和定量检测树莓中的酚酸化合物，液相色谱的检测条件包括：/n色谱柱：烷基键合硅胶柱，进一步选自Hypersil

【技术特征摘要】
20190613 CN 20191051129091.一种检测树莓中酚酸化合物的方法，其特征在于，采用高效液相色谱同时进行定性或/和定量检测树莓中的酚酸化合物，液相色谱的检测条件包括：
色谱柱：烷基键合硅胶柱，进一步选自HypersilTMGOLD色谱柱；
流动相：流动相A、流动相B；
其中，流动相A为质量浓度为0.1％-0.3％甲酸水溶液；流动相B为含有质量浓度为5％乙腈和0.1％-0.3％甲酸的水溶液；流动相采用如下梯度洗脱程序：









时间(min)
流动相A(vol.％)
流动相B(vol.％)


0
1～3
97～99


8
3～7
93～97


18
8～12
88～92


21
8～12
88～92


30
23～27
73～77


35
97～100
0～3






。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述酚酸化合物选自没食子酸、儿茶素、绿原酸、香草酸、丁香酸、香豆酸、阿魏酸、迷迭香酸、槲皮素中的一种或几种。


3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，流动相采用如下梯度洗脱程序：









时间(min)
流动相A(vol.％)
流动相B(vol.％)


0
2
98


8
5
95


18
10.5
89.5


21
10.5
89.5...

【专利技术属性】
技术研发人员：王煜伟，洒威，王乐，周武，益西卓玛，
申请(专利权)人：青海大学，
类型：发明
国别省市：青海;63