二氧化氯气体在低浓度长时间状态下杀菌效果的评价方法技术

本发明专利技术提供了一种二氧化氯气体在低浓度长时间状态下杀菌效果的评价方法，包括如下步骤：提供改良试验载体，确定消毒处理的时间，将对应的添加质量的中和试剂添加至所述改良试验载体中，将试验菌的菌悬液涂布于所述改良试验载体上得第一改良试验载体，提供浓度为0.01～0.28mg/m

Evaluation method of germicidal efficacy of chlorine dioxide in low concentration and long time

【技术实现步骤摘要】
二氧化氯气体在低浓度长时间状态下杀菌效果的评价方法
本专利技术涉及生物领域，尤其涉及二氧化氯气体在低浓度长时间状态下杀菌效果的评价方法。
技术介绍
目前，国内关于对染菌载体消毒效果的实验室评价，常规是参考《消毒技术规范》(2002年版)中最经典的载体定量杀灭试验的方法，即评价消毒剂的杀菌效果，是将染菌载体片浸泡在一定量的消毒剂中进行杀菌作用，预定时间后取出菌片加入中和剂，与对照组菌落数同时计数后，计算杀灭对数值；评价气体的消毒效果，同样是先制备染菌载体菌片，再将菌片放入气体消毒空间中，作用至预定时间后取出，将载体菌片加入中和剂，与对照组菌落数同时进行计数后，计算杀灭对数值，判定杀菌效果。与消毒剂在实际使用时的消毒剂用量和消毒作用时间相对应，用载体定量杀灭试验进行实验室消毒效果评价时，通常也是观察对高浓度和大剂量作用的消毒剂的消毒效果。因为常规使用浓度高，剂量大，对空气消毒的作用时间一般≤1h。《空气消毒剂卫生要求》(GB27948-2011)标准中就规定了，实验室杀菌试验，在20℃～25℃，相对湿度50％～70％条件下，消毒剂作用≤1h，对空气中白色葡萄球菌的杀灭率应≥99.90％的作用时间要求。物体表面消毒时间同样较短，《普通物体表面消毒剂的卫生要求》(GB27952-2011)标准附录A中“物体表面常用消毒剂的使用剂量和使用方法”，对各类物体表面的消毒在规定的使用剂量和浓度下，推荐的消毒作用时间均≤30min。因此，在我国现有的各类规范和标准中，常规进行的实验室消毒效果的评价方法，都是适用于实际使用时高浓度、短时间作用的评价方法。近年来，市场上陆续出现了一些低浓度和长时间作用的杀菌和抗菌产品，其中最具代表性，最普遍使用的是低浓度长时间进行消毒的二氧化氯产品，如低浓度二氧化氯空气消毒净化器，以及以凝胶状态和固态状态进行长时间低浓度缓慢释放二氧化氯气体的缓释消毒剂等。这些低浓度长时间消毒的二氧化氯产品的消毒效果评价结果，如果还是使用现有的消毒效果评价方法(对消毒现场某一个点或多个点采样后，进行检测试验后，综合采样点的数量和杀灭率，平均后给出消毒效果评价)，不能够体现出消毒现场完整的消毒效果，例如：消毒效果的持续性、消毒效果的无死角性等得不到体现。《消毒技术规范》(2002年版)载体定量杀菌试验的染菌方法，将细菌和真菌菌悬液均匀涂染在布片上进行试验，由于通常评价的是消毒剂高浓度、短时间的作用，气体消毒观察时间一般也不超过1h，基本可保证阳性对照菌数。低浓度二氧化氯杀菌效果的评价，观察时间长，是与常规载体气雾消毒试验最明显的不同。长时间消毒过程中，现场试验的微生物自然衰亡，环境温度、环境湿度等条件都能够影响现场试验评价结果。因此，用目前现有的实验室方法难以正确评价低浓度长时间消毒的消毒效果。也是基于此因，低浓度长时间二氧化氯消毒产品(以及其他成分用于低浓度长时间使用的消毒产品)，在实验室消毒效果评价上存在空缺，需要寻找建立新的低浓度长时间消毒效果可靠性的实验室评价方法，以此来检验和考量低浓度长时间消毒的效果。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种二氧化氯气体在低浓度长时间状态下杀菌效果的评价方法，旨在解决现有技术中没有合理科学的二氧化氯气体在低浓度长时间状态下杀菌效果的评价方法的问题。为实现上述专利技术目的，本专利技术采用的技术方案如下：一种二氧化氯气体在低浓度长时间状态下杀菌效果的评价方法，包括如下步骤：提供改良试验载体，所述改良试验载体为平板培养基，所述培养基包括甘油和中和试剂，其中，所述平板培养基的培养基的厚度为1.5～1.8厘米；提供特定浓度的二氧化氯气体环境，将所述改良试验载体放置于所述二氧化氯气体环境中进行消毒处理，并收集特定二氧化氯气体浓度下，所述消毒处理的时间与所述中和试剂的添加质量的对应关系；确定二氧化氯气体在特定浓度下的消毒处理的时间，获取添加至所述改良试验载体中的中和试剂的质量，将试验菌的菌悬液涂布于所述改良试验载体上得第一改良试验载体；提供特定浓度的二氧化氯气体环境，将所述第一改良试验载体放置于所述二氧化氯气体环境中进行消毒处理得到第二改良试验载体；其中，所述消毒处理的时间≥24小时；将所述第二改良载体放置于培养箱中进行培养，记录生长的菌落数，计算杀菌率，并评价所述二氧化氯气体在特定浓度下的长时间杀菌效果：若杀菌率≥90％，则所述二氧化氯气体在低浓度长时间状态下有杀菌作用。本专利技术提供二氧化氯气体在低浓度长时间状态下杀菌效果的评价方法，具有以下优点：第一，本专利技术提供的改良试验载体，将平板培养基直接作为载体进行使用，采用平板培养基作为载体使用，可保证载体在较长时间处理中不会变形。其中，所述培养基包括甘油和中和试剂。本专利技术在培养基中添加甘油，可以降低培养基在气流环境下的水分流失的速度，使培养基在长时间的气雾环境处理中不会发生干裂，延长培养基的放置时间，从而保证试验菌在相对较长的时间内能够稳定生长。同时，在培养基中添加中和试剂，可以将消毒过程中多余的二氧化氯气体吸附。由于实验过程中，空间内的二氧化氯气体在流动过程中会不断吸附在平皿表面，若培养基成分本身无法中和不断作用在其上的低浓度二氧化氯气体，平皿表面的二氧化氯会不断吸附和累加，相当于不是设定的低浓度在起杀菌作用，而是浓度不断累加后的杀菌效果，添加中和试剂，可以保证实验在低浓度的二氧化氯状态中进行试验的，进一步保证了试验的准确性。在此基础上，所述平板培养基的培养基的厚度为1.5～1.8厘米，厚度较大的培养基为试验菌提供了丰富的营养，更重要的是，可以使所述载体在长时间气雾(二氧化氯发生器产生的气体)环境内进行放置处理，保证试验菌的存活，有利于结果观察。第二，提供特定浓度的二氧化氯气体环境，将所述改良试验载体放置于所述二氧化氯气体环境中进行消毒处理，并收集特定二氧化氯气体浓度下，所述消毒处理的时间与所述中和试剂的添加质量的对应关系；通过中和试剂鉴定试验，可以确定在特定时长的消毒处理时间，培养基中中和试剂的添加质量，保证添加的中和试剂的添加量可以在所述消毒处理的时间内中和特定浓度的二氧化氯气体的作用，同时保证中和试剂的添加量在后续反应中不会产生抑菌作用。第三，确定二氧化氯气体在特定浓度下的消毒处理的时间，获取添加至所述改良试验载体中的中和试剂的质量，将试验菌的菌悬液涂布于所述改良试验载体上得第一改良试验载体；提供特定浓度的二氧化氯气体环境，将所述第一改良试验载体放置于所述二氧化氯气体环境中进行消毒处理得到第二改良试验载体；其中，所述消毒处理的时间≥24小时；将所述第二改良载体放置于培养箱中进行培养，记录生长的菌落数，计算杀菌率，并评价所述二氧化氯气体在特定浓度下的长时间杀菌效果：若杀菌率≥90％，则所述二氧化氯气体在低浓度长时间状态下有杀菌作用。上述方法试验简单、评价准确。通过上述方法，可以对二氧化氯气体在低浓度长时间状态下杀菌效果准确地进行评价，保证了试验菌可以长时间的存活及正常生长，为杀菌效果的评价解决了进行长时间观察的难点，此本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种二氧化氯气体在低浓度长时间状态下杀菌效果的评价方法，其特征在于，包括如下步骤：/n提供改良试验载体，所述改良试验载体为平板培养基，所述培养基包括甘油和中和试剂，其中，所述平板培养基的培养基的厚度为1.5～1.8厘米；/n提供特定浓度的二氧化氯气体环境，将所述改良试验载体放置于所述二氧化氯气体环境中进行消毒处理，并收集特定二氧化氯气体浓度下，所述消毒处理的时间与所述中和试剂的添加质量的对应关系；/n确定二氧化氯气体在特定浓度下的消毒处理的时间，获取添加至所述改良试验载体中的中和试剂的质量，将试验菌的菌悬液涂布于所述改良试验载体上得第一改良试验载体；/n提供特定浓度的二氧化氯气体环境，将所述第一改良试验载体放置于所述二氧化氯气体环境中进行消毒处理得到第二改良试验载体；其中，所述消毒处理的时间≥24小时；/n将所述第二改良载体放置于培养箱中进行培养，记录生长的菌落数，计算杀菌率，并评价所述二氧化氯气体在特定浓度下的长时间杀菌效果：/n若杀菌率≥90％，则所述二氧化氯气体在低浓度长时间状态下有杀菌作用。/n

【技术特征摘要】
1.一种二氧化氯气体在低浓度长时间状态下杀菌效果的评价方法，其特征在于，包括如下步骤：
提供改良试验载体，所述改良试验载体为平板培养基，所述培养基包括甘油和中和试剂，其中，所述平板培养基的培养基的厚度为1.5～1.8厘米；
提供特定浓度的二氧化氯气体环境，将所述改良试验载体放置于所述二氧化氯气体环境中进行消毒处理，并收集特定二氧化氯气体浓度下，所述消毒处理的时间与所述中和试剂的添加质量的对应关系；
确定二氧化氯气体在特定浓度下的消毒处理的时间，获取添加至所述改良试验载体中的中和试剂的质量，将试验菌的菌悬液涂布于所述改良试验载体上得第一改良试验载体；
提供特定浓度的二氧化氯气体环境，将所述第一改良试验载体放置于所述二氧化氯气体环境中进行消毒处理得到第二改良试验载体；其中，所述消毒处理的时间≥24小时；
将所述第二改良载体放置于培养箱中进行培养，记录生长的菌落数，计算杀菌率，并评价所述二氧化氯气体在特定浓度下的长时间杀菌效果：
若杀菌率≥90％，则所述二氧化氯气体在低浓度长时间状态下有杀菌作用。


2.根据权利要求1所述的二氧化氯气体在低浓度长时间状态下杀菌效果的评价方法，其特征在于，
以所述培养基的总质量为100％，所述甘油的质量为1％～1.2％；和/或，
以所述培养基的总质量为100％，所述中和试剂的质量为0.005％～0.015％。


3.根据权利要求1～2任一所述的二氧化氯气体在低浓度长时间状态下杀菌效果的评价方法，其特征在于，
当所述中和试剂的含量为0.005％时，将所述第一改良培养基载体放置于所述二氧化氯气体环境中进行消毒处理的步骤中，所述消毒处理的时间为24小时；和/或，
当所述中和试剂的含量为0.01％时，将所述第一改良培养基载体放置于所述二氧化氯气体环境中进行消毒处理的步骤中，所述消毒处理的时间为不超过48小时；和/或，
当所述中和试剂的含量为0.015％时，将所述第一改良培养基载体放置于所述二氧化氯气体环境中进行消毒处理的步骤中，所述消毒处理的时间为不超过72小时。


4.根据权利要求1～2任一所述的二氧化氯气体在低浓度长时间状态下杀菌效果的评价方法，其特征在于，所述中和试剂含有硫代硫酸钠。

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【专利技术属性】
技术研发人员：王妍彦，吴予奇，吴雨芯，
申请(专利权)人：王妍彦，吴予奇，吴雨芯，
类型：发明
国别省市：北京;11