一种银杏内酯B原料及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种银杏内酯B原料及其制备方法，所述银杏内酯B原料从银杏叶中提取获得，所述银杏内酯B原料中银杏内酯B化合物的含量大于99％，所述银杏内酯B原料中含有微量银杏内酯成分银杏内酯HK、银杏内酯K和银杏内酯A，且含量均小于0.4％。本发明专利技术还涉及银杏内酯B原料的制备方法，包括：提取银杏叶得到银杏叶提取物，提取物用水溶解后，用有机溶剂萃取，得到萃取物后，加入含水乙醇/甲醇进行反复结晶，得精制品I；粗结晶母液部分用含水乙醇/甲醇多次重结晶，得精制品II，将精制品I与II合并混合均匀后，即得。本发明专利技术为银杏内酯B化合物的深度研究提供基础，采用试剂安全环保，可回收利用，提高收率，有较大的市场应用前景。

A raw material of Ginkgolide B and its preparation method

【技术实现步骤摘要】
一种银杏内酯B原料及其制备方法
本专利技术涉及中药提取物，具体涉及中药提取物的单体，尤其涉及一种银杏内酯B原料及其制备方法。
技术介绍
银杏内酯B，英文名GinkgolideB；分子式：C20H24O10；分子量：424.40。银杏内酯B是一种活性强的血小板活化因子(PAF)拮抗剂，能竞争性地与PAF受体结合，抑制PAF的作用；因此，凡涉及与PAF相关的病症，如：血栓形成、脑组织损伤、器官移植排斥、急性炎症、心脏过敏、细胞内毒素及IgG导致的休克等，银杏内酯B均有一定疗效。CN101182325A涉及一种静脉给药银杏内酯B及提取方法，其中银杏内酯B含量≥97％,银杏酸≤2PPM,白果内酯未检出,它可以直接作为静脉注射或静脉滴注的原料药；其提取采用银杏叶干重8-25倍量、浓度为5％-30％乙醇水溶液回流提取若干次,过滤分离；将滤液浓缩至原体积的0.05-0.2倍量,加入吸附剂在搅拌状态下充分吸附,过滤,滤饼用3-10倍量乙醇回流提取若干次,合并提取液,浓缩至原体积的0.01-0.2倍量,静置析晶,过滤得银杏内酯；银杏内酯用10-50倍量的甲醇进行重结晶若干次,析晶温度-10℃--25℃,过滤结晶、干燥,得银杏内酯B。CN104817570A涉及一种银杏内酯B的制备方法，该方法采用银杏叶为原料，用中高浓度乙醇回流提取，合并提取液，回收乙醇，过柱分离，以纯水、乙醇分别洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥后，用高浓度乙醇溶解，过酸性氧化铝柱，高浓度乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，得到银杏总内酯粗品，向银杏总内酯粗品中加入纯水，30-90℃下搅拌溶解，过滤，收集滤饼，浓缩，干燥，得干品，再向干品中加入中低浓度乙醇，重结晶，得银杏内酯B。CN103130817B公开一种新的银杏内酯B化合物及其制备方法，涉及一种新的银杏内酯B化合物，所述银杏内酯B化合物从银杏叶中提取获得，所述银杏内酯B化合物中银杏内酯B的含量大于99％，所述银杏内酯B化合物中含有银杏内酯A，所述银杏内酯A的含量低至0.4％。还提供该银杏内酯B化合物的制备方法，包括：在搅拌条件下加入硅藻土、银杏叶提取物，于78-85℃加热回流0.5-1.5h，过滤，浓缩；再加入蒸馏水除杂，分出乙酸乙酯层，乙酸乙酯层过酸性氧化铝柱，用水饱和乙酸乙酯洗脱，收集洗脱液；洗脱液减压浓缩至无乙酸乙酯味，加适量乙醇使之溶解，再加水至使含醇量为60-70％，静置，使析出粗结晶，过滤，取粗结晶，烘干；粗结晶依次用乙醇和乙酸乙酯重结晶，得成品银杏内酯B化合物。CN1680392A涉及采用高速逆流色谱法(HSCCC)从银杏叶中分离一种高纯度银杏内酯的制备方法。用三个溶剂体系,分别经过两次HSCCC分离后,可得到银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C、银杏内酯J和白果内酯,纯度均达到99％以上。中国专利技术专利CN103130818A和CN103130817B中银杏内酯B化合物中的微量杂质分别为银杏内酯A和银杏内酯K，含量都低于0.4％，不含白果内酯，银杏酸含量低于0.12ppm。目前，药用的银杏内酯B主要从银杏叶中提取，由于银杏内酯B含量在银杏叶中含量极低，且银杏内酯B与银杏内酯A结构相似，化学性质差异很小，因此，从银杏叶中提取分离高纯度的银杏内酯B单体较为困难，特别是银杏内酯B与银杏内酯A的分离更为困难。银杏内酯B作为药用原料药在制药中应用时需要对杂质的种类和含量进行定性和定量分析并制定相应质量标准，现有技术对银杏内酯B的杂质研究还有待提高。由于现有技术中提取得到的银杏内酯B单体纯度不够高，只能作为口服制剂用的原料而不能作为注射剂原料药，或者虽然可以达到较高的纯度，但是所使用的方法不适用于工业化生产。因此，期待改进提取方法，积极寻求提取效率高、产品质量好的银杏内酯B单体的方法有重要意义。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于克服上述不足之处，研究设计一种高纯度的银杏内酯B原料及其制备方法本专利技术提供了一种高纯度的银杏内酯B原料，该原料中含有微量的银杏内酯HK化合物、银杏内酯K化合物和银杏内酯A化合物。所述银杏内酯B原料中银杏内酯B化合物的含量≥99％，所述银杏内酯B原料中含有银杏内酯HK化合物、银杏内酯K化合物和银杏内酯A化合物，每个化合物含量均≤0.4％。所述银杏内酯B化合物的化学结构式为结构式Ⅰ，所述银杏内酯HK化合物的化学结构式为式Ⅱ，所述银杏内酯K化合物的化学结构式为式Ⅲ，所述银杏内酯A化合物的化学结构式为式Ⅳ：所述银杏内酯B原料中不含有白果内酯。所述银杏内酯B原料中不含有银杏酸。所述银杏内酯B原料从银杏叶中提取获得。本专利技术的另一目的在于提供一种上述银杏内酯B原料的制备方法。该方法包括以下步骤：(1)用乙醇水溶液回流提取银杏叶三次，乙醇水溶液用量为5～8倍药材重量，减压浓缩提取液至无乙醇味，加水静置澄清后，过滤，滤液上大孔吸附树脂，洗脱浓缩得到银杏叶提取物；(2)银杏叶提取物加水溶解至浓度为0.1-1.0g/ml，用有机溶剂萃取，收集萃取液，减压浓缩至无溶剂，得到萃取物；(3)向萃取物中加入浓缩物重量0.5-1.5倍的含水溶剂(V/W)，加热至完全溶解，冷藏静置析晶，抽滤，滤饼用含水溶剂洗晶，得结晶A；(4)继续按结晶A重量加入适量含水溶剂(V/W),加热至完全溶解，冷藏静置析晶，抽滤，滤饼用含水溶剂洗晶，反复以此方法重结晶3-4次，得结晶Ⅰ，将每次重结晶后母液收集合并，备用；(5)合并后母液减压浓缩至无溶剂，按浓缩物重量加入含水溶剂(V/W)，加热至完全溶解，冷藏静置析晶，抽滤，滤饼用含水溶剂洗晶，得结晶B；(6)继续按结晶B重量加入适量含水乙醇(V/W)，加热至完全溶解，冷藏静置析晶，抽滤，滤饼用含水溶剂洗晶，反复以此方法重结晶3-4次，得结晶Ⅱ；(7)将结晶Ⅰ与结晶Ⅱ合并，用乙醇完全回流溶解后，减压浓缩至无溶剂，即得银杏内酯B原料。所述步骤(1)，加入乙醇水溶液，浓度为70％-80％，优选的，加入乙醇水溶液回流提取2次，第1次加入8倍药材重量的80％乙醇水溶液(V/W)回流提取2h，第2次加入6倍药材重量的70％乙醇水溶液(V/W)回流提取2h，合并2次提取液，减压浓缩至无乙醇味，加入1倍药液体积的冷水(V/V)搅拌并静置8-10h，抽滤，通过1倍滤液体积的大孔树脂(V/V)，先用10-30％乙醇洗脱2BV(BV，树脂床体积，下同)除杂，再用60％乙醇洗脱2BV，收集60％乙醇洗脱液，减压浓缩至无溶剂。所述步骤(2)，银杏叶提取物加水溶解使浓度为0.1-1.0g/ml，优选的，水溶解银杏叶提取物的浓度为0.2-0.4g/ml，萃取溶剂为乙酸乙酯、乙酸甲酯或二者的混合溶剂，优选的，萃取溶剂为乙酸乙酯，萃取体积为0.5-2倍药液体积(V/V),萃取次数为3-5次；收集萃取液，减压浓缩至无溶剂，得到萃取物。所述步骤(3)，加入0.5-1.5倍浓缩物重量的含水溶剂(V/W)，优选的，溶解浓缩物的体积为0.9-1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种银杏内酯B原料，其特征在于，所述银杏内酯B原料从银杏叶中提取获得，所述银杏内酯B原料中含有微量银杏内酯成分银杏内酯HK、银杏内酯K和银杏内酯A，所述银杏内酯B化合物的含量≥99％，所述银杏内酯HK化合物、银杏内酯K化合物和银杏内酯A化合物的含量均≤0.4％，所述银杏内酯B化合物的化学结构式为Ⅰ，所述银杏内酯HK化合物的化学结构式为Ⅱ，所述银杏内酯K化合物的化学结构式为Ⅲ，所述银杏内酯A化合物的化学结构式为Ⅳ：/n

【技术特征摘要】
1.一种银杏内酯B原料，其特征在于，所述银杏内酯B原料从银杏叶中提取获得，所述银杏内酯B原料中含有微量银杏内酯成分银杏内酯HK、银杏内酯K和银杏内酯A，所述银杏内酯B化合物的含量≥99％，所述银杏内酯HK化合物、银杏内酯K化合物和银杏内酯A化合物的含量均≤0.4％，所述银杏内酯B化合物的化学结构式为Ⅰ，所述银杏内酯HK化合物的化学结构式为Ⅱ，所述银杏内酯K化合物的化学结构式为Ⅲ，所述银杏内酯A化合物的化学结构式为Ⅳ：





2.根据权利要求1所述的银杏内酯B原料，其特征在于，所述银杏内酯B化合物的含量≥99.5％，所述银杏内酯HK化合物、银杏内酯K化合物和银杏内酯A化合物的含量均≤0.3％。


3.根据权利要求1所述的银杏内酯B原料，其特征在于，所述银杏内酯B原料中不含白果内酯和银杏酸。


4.根据权利要求1-3任一项所述的银杏内酯B原料的制备方法，其特征在于，所述银杏内酯B原料的制备方法包括：
(1)用乙醇水溶液回流提取银杏叶三次，乙醇水溶液用量为5～8倍药材重量，减压浓缩提取液至无乙醇味，加水静置澄清后，过滤，滤液上大孔吸附树脂，洗脱浓缩得到银杏叶提取物；
(2)银杏叶提取物加水溶解使浓度为0.1-1.0g/ml，用有机溶剂萃取，分取萃取液，减压浓缩至无溶剂；
(3)加入0.5-1.5倍浓缩物重量的含水溶剂V/W，加热至完全溶解，冷藏静置析晶，抽滤，滤饼用含水溶剂洗晶；
(4)继续按步骤(3)结晶重量加入适量含水溶剂V/W,加热至完全溶解，冷藏静置析晶，抽滤，滤饼用含水溶剂洗晶，反复以此方法重结晶3-4次，得结晶I，将每次重结晶后母液收集合并，备用；
(5)合并后母液减压浓缩至无溶剂，按重量加入适量含水溶剂V/W，加热至完全溶解，冷藏静置析晶，抽滤，滤饼用含水溶剂洗晶；
(6)继续按步骤(5)结晶重量加入适量含水乙醇V/W,加热至完全溶解，冷藏静置析晶，抽滤，滤饼用含水溶剂洗晶，反复以此方法重结晶3-4次，得结晶Ⅱ；
(7)将结晶Ⅰ与结晶Ⅱ合并，...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖志勇，李丁，李玉杰，陈芸，王宁，胡林森，
申请(专利权)人：上海信谊百路达药业有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31