2α,3β,19α,23-四羟基-12-烯-28-乌苏酸在制备糖尿病药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了2α,3β,19α,23‑四羟基‑12‑烯‑28‑乌苏酸在制备糖尿病药物中的应用，2α,3β,19α,23‑四羟基‑12‑烯‑28‑乌苏酸结构式为

Application of 2 \u03b1, 3 \u03b2, 19 \u03b1, 23-tetrahydroxy-12-ene-28-ursolic acid in the preparation of diabetes drugs

【技术实现步骤摘要】
2α,3β,19α,23-四羟基-12-烯-28-乌苏酸在制备糖尿病药物中的应用
本专利技术涉及药物化学
，尤其是2α,3β,19α,23-四羟基-12-烯-28-乌苏酸在制备糖尿病药物中的应用。
技术介绍
我国患糖尿病(diabetesmellitus)的人数正快速增长，目前为糖尿病第二大国，并且糖尿病是危害全人类健康的严重公共卫生问题，尤其是II型糖尿病发病率最高，占糖尿病总病例的90%。研究表明，造成II型糖尿病患者血管内皮损伤的重要因素是餐后血糖的波动和日内最大血糖的波动，而餐后高血糖是心血管疾病死亡的独立危险因素，其作用独立于持续血糖水平。葡萄糖苷酶是一种小肠上皮细胞的膜结合酶，参与生物体的糖代谢，其在小肠内可以催化多糖分解为葡萄糖，是调节食物来源血糖的关键酶，因此可作为药物作用靶点来治疗糖尿病。桃金娘生长在亚洲的南部及东南部，尤其是在中国的南部比如广东，湖南和广西，是桃金娘科桃金娘属阳生性植物。据报道，这种植物的提取物具有多种生物活性，如抗菌、抗炎等，然而尚缺乏对其更深入的作用机制及相关物质基础的研究。鉴于此，本研究结合体外酶抑制活性试验以及酶抑制动力学研究从桃金娘中筛选出具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的单体化合物，为该植物中的天然α-葡萄糖苷酶抑制剂的开发利用提供参考。
技术实现思路
本专利技术公开了2α,3β,19α,23-四羟基-12-烯-28-乌苏酸在制备糖尿病药物中的应用，从桃金娘中筛选出具有α-葡萄糖苷酶抑制活性的单体化合物2α,3β,19α,23-四羟基-12-烯-28-乌苏酸，为糖尿病新药物的开发提供了参考。为实现上述目的，本专利技术的技术方案为：本专利技术提供了2α,3β,19α,23-四羟基-12-烯-28-乌苏酸在制备糖尿病药物中的应用，2α,3β,19α,23-四羟基-12-烯-28-乌苏酸的结构式为：。进一步的，所述糖尿病为II型糖尿病。本专利技术进一步提供了2α,3β,19α,23-四羟基-12-烯-28-乌苏酸在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂方面的应用。本专利技术的2α,3β,19α,23-四羟基-12-烯-28-乌苏酸，其系统命名为2α,3β,19α,23-tetrahydroxyurs-12-en-28-oicacid。2α,3β,19α,23-tetrahydroxyurs-12-en-28-oicacid是从桃金娘叶中提取出来的天然化合物，其提取方法，包括以下步骤：S1.干燥的桃金娘叶粉，用体积浓度为70~95%的乙醇溶液浸提至提取液无色，合并所得的浸出液，减压浓缩得浸膏；S2.浸膏用水分散，然后用乙酸乙酯萃取，减压回收溶剂，得到乙酸乙酯萃取物；S3.乙酸乙酯部位采用硅胶柱色谱分离，氯仿-甲醇梯度洗脱，洗脱浓度按体积比计，依次为：1:0、9:1、8:2、2:1、1:1、0:1，薄层色谱检测合并相同流分，得到六个组分Fr.A-Fr.F；S4.取组分Fr.B进一步用MCI柱色谱分离，洗脱液为70-90%的甲醇溶液，分离得到Fr.B1组分；S5.取组分Fr.B1采用硅胶柱色谱分离，氯仿-甲醇梯度洗脱，洗脱浓度按体积比计，依次为：50:1、20:1、0:1，薄层色谱检测得到10个组分Fr.B1-1~Fr.B1-10；S6.取Fr.B1-2，经制备液相色谱，以甲醇-水梯度洗脱，以体积比计，依次为10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%，流速为1-10.0mL/min，依次分离得到8个组分Fr.B1-2-1~Fr.B1-2-8；S7.取Fr.B1-2-5，以甲醇-水按照体积比70:30、流速为3.0mL/min进行半制备，得到2α,3β,19α,23-tetrahydroxyurs-12-en-28-oicacid。试验证明，2α,3β,19α,23-四羟基-12-烯-28-乌苏酸对α-葡萄糖苷酶有较强的抑制作用，IC50值可达到0.187±0.071mg/mL，由于其对α-葡萄糖苷酶具有较好的抑制活性，因此可将其应用于制备治疗糖尿病药物和制备葡萄糖苷酶抑制剂，为制备治疗糖尿病的药物提供了更广阔的思路。附图说明图1a是不同浓度的2α,3β,19α,23-四羟基-12-烯-28-乌苏酸对α-葡萄糖苷酶的抑制率结果示意图。图1b是不同浓度的阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶的抑制率结果示意图。图2a是2α,3β,19α,23-四羟基-12-烯-28-乌苏酸的酶量-反应速率曲线。图2b是阿卡波糖的酶量-反应速率曲线。图2c是2α,3β,19α,23-四羟基-12-烯-28-乌苏酸的酶抑制动力学曲线。图2d是阿卡波糖的酶抑制动力学曲线。具体实施方式以下结合具体实施例对本专利技术进行进一步说明，但本专利技术的保护范围不限于以下实施例。1、仪器核磁共振光谱仪(DRX-500MHz，德国布鲁克)，高效液相色谱仪(AgilentLC1260infinity)；旋转蒸发仪(RE-52A，上海亚荣生化仪器厂)；电子天平(MettlerToledoXS105DualRange，瑞士)；硅胶(100-200目，青岛海洋化学有限公司)；薄层硅胶板GF254(中国青岛海洋化工有限公司)；反相填料(RP-18，德国默克)。MCI填料(MCI-gelCHP-20P，日本三菱)；RP色谱柱(ZorbaxSB-C18，5μm，9.4×250mm，美国安捷伦)。多功能酶标仪(InfiniteM200Pro，奥地利)。2、药材、药品与试剂桃金娘叶采集于广西平南县，经桂林医学院药学院黄德青副教授鉴定为桃金娘叶。凭证样本(编号:2016082501)存放于桂林医学院药学院。氯仿，石油醚，乙酸乙酯，甲醇（分析级，均购自中国西陇科学有限公司）；α-葡萄糖苷酶（G0660-750UN，SIGMA，德国）；阿卡波糖（109A032，solarbio，北京索莱宝科技有限公司）；4-pNPG（N0493，东京化学工业株式会社）。实施例12α,3β,19α,23-四羟基-12-烯-28-乌苏酸的提取。S1.干燥的桃金娘叶粗粉20kg，用体积浓度为95%的乙醇溶液浸提至提取液无色，合并所得的浸出液，减压浓缩得浸膏；S2.浸膏用水分散，然后用乙酸乙酯萃取，减压回收溶剂，得到乙酸乙酯萃取物；S3.乙酸乙酯部位采用硅胶柱色谱分离，氯仿-甲醇梯度洗脱，洗脱浓度按体积比计，依次为：1:0、9:1、8:2、2:1、1:1、0:1，薄层色谱检测合并相同流分，得到六个组分Fr.A-Fr.F；S4.取组分Fr.B进一步用MCI柱色谱分离，洗脱液为90%的甲醇溶液，分离得到Fr.B1组分；S5.取组分Fr.B1采用硅胶柱色谱分离，氯仿-甲醇梯度洗脱，洗脱浓度按体积比计，依次为：50:1、20:1、0:1，薄层色谱检测得到10个组分Fr.B1-1~Fr.B1-10本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.2α,3β,19α,23-四羟基-12-烯-28-乌苏酸在制备糖尿病药物中的应用，其特征在于：/n2α,3β,19α,23-四羟基-12-烯-28-乌苏酸的结构式为：/n

【技术特征摘要】
1.2α,3β,19α,23-四羟基-12-烯-28-乌苏酸在制备糖尿病药物中的应用，其特征在于：
2α,3β,19α,23-四羟基-12-烯-28-乌苏酸的结构式为：

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【专利技术属性】
技术研发人员：林向成，李名悦，赵萌萌，梁成钦，周先丽，莫青胡，
申请(专利权)人：桂林电子科技大学，桂林医学院，
类型：发明
国别省市：广西;45