一种雷帕霉素纳米缓释剂及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种雷帕霉素纳米缓释剂，由按重量份计的以下原料制成：1份雷帕霉素、0.5‑20份可溶性高分子聚合物载体、40‑200份有机溶剂和400‑20000份的水相液。本发明专利技术还提供了该雷帕霉素纳米缓释剂的制备方法，该雷帕霉素纳米缓释剂为纳米胶束结构，其粒径为10‑200nm之间，对血管风险小；该雷帕霉素纳米缓释剂在血液内的半衰期可高达50个小时以上，能直达肿瘤患处，持续用药，肿瘤的消退率可达50％。

A rapamycin nano sustained release agent and its preparation method

【技术实现步骤摘要】
一种雷帕霉素纳米缓释剂及其制备方法
本专利技术涉及雷帕霉素制剂
，具体涉及一种雷帕霉素纳米缓释剂及其制备方法。
技术介绍
肿瘤癌症已经成为危害人类健康的头号杀手，虽然现在治疗肿瘤的方法层出不穷，但是大多数病人的生存状况并没有得到很大的改善。而在肿瘤的各种治疗方法中，化学疗法仍然是最常用的选择。虽然化疗药物应用广泛，但是其对实体肿瘤的治疗效果并不确切。其根本问题是传统化疗药物不能在肿瘤部位达到有效治疗浓度或不能维持足够的作用时间，而且，传统化疗药物对正常细胞的无差别杀伤，导致了多种毒副作用。化疗药物的效果不仅取决于药物的敏感性，还取决于药物在肿瘤部位的作用时间和药物在肿瘤部位的积蓄浓度。故化疗药物的局部应用，特别是局部缓释，已经成为当今肿瘤化疗研究的热点和难点。雷帕霉素在1975年于智利复活岛的土壤中发现，是一种由吸水性链霉菌产生的疏水性大环内酯类免疫抑制剂，具有抗真菌活性，为白色结晶，相对分子质量914.2，易溶于甲醛、乙醇、丙酮、氯仿等有机溶剂中，几乎不溶于水。雷帕霉素是具有低毒性的强有力免疫抑制剂，通过与相应免疫嗜素RMBP结合抑制细胞周期G0期和G1期，阻断G1进入S期而发挥作用，广泛应用于移植手术中。雷帕霉素除了免疫抑制作用，还有抗肿瘤作用，能够浓度依赖性抑制肾癌、淋巴瘤、肺癌、肝癌、乳腺癌、神经内分泌癌和胃癌等肿瘤细胞的生长。2007年起，雷帕霉素的两种衍生物坦罗莫司和依维莫司开发用于治疗癌症，雷帕霉素在肿瘤治疗方面的研究及应用日益增多，单独应用或联合用药在体外、体内均表现显著的抗肿瘤效果。RAPA通过抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)受体，影响其转导的多种信号通路，从而发挥抗血管生成、阻滞细胞周期和促进细胞凋亡等多种作用，对肿瘤的增殖、侵袭和转移等过程产生影响。纳米制剂具有高度的分散性，表面积巨大，有利于增加药物与吸收部位生物膜的接触时间和接触面积，增加药物的溶解性；纳米粒可通过内吞机理进入细胞，与一般药物的跨膜转运机理不一样，所以可能增加药物对生物膜的透过率。纳米载药系统作为一种优化药效的有效手段已经成为了药剂学和现代生物医学领域的研究热点。雷帕霉素属于疏水性药物，不能直接用于注射，需要一定的有机溶剂溶解才可注射，易对人体造成不良影响；雷帕霉素的体内生物利用度很低，易造成未到达病症部位就已经失效的问题。目前市面上有使用磷脂类或胆固酮类作为雷帕霉素的纳米缓释剂载体，这类载体与人体的亲和性非常高，但是由于磷脂类或胆固酮类血液中自然降解速率快，使得雷帕霉素达到作用部位浓度低，靶向性不足。
技术实现思路
为了克服现有技术的不足，本专利技术的目的之一在于提供一种能有效控制雷帕霉素的缓释速度、提高其在肿瘤组织中的停留时间、延长其在血浆内的半衰期的雷帕霉素纳米缓释剂。本专利技术的目的之二在于提供该雷帕霉素纳米缓释剂的制备方法。本专利技术的目的之一采用如下技术方案实现：一种雷帕霉素纳米缓释剂，由按重量份计的以下原料制成：1份雷帕霉素、0.5-20份可溶性高分子聚合物载体、40-200份有机溶剂和400-20000份的水相液。该纳米缓释剂通过可溶性高分子聚合物对雷帕霉素的包覆作用，形成缓释型的包覆结构，同时通过有机溶剂与水相液的分散性，将包覆结构分散成纳米级的包覆粒子。进一步地，所述可溶性高分子聚合物载体为聚乙二醇-2000、聚乙二醇-4000、聚乙二醇-10000、聚乙二醇-15000、PLGA、PEO、PVP、聚丙烯、聚氨基酸、聚山梨酯和聚氧乙烯酯脂肪酸中的一种或两种以上。相对于小分子量的载体，高分子聚合物载体形成的缓释剂的亲水时间相对较长，可以提高雷帕霉素形成的注射液在体内的缓释时间，延长半衰期。进一步地，所述可溶性高分子聚合物载体为甲氧基聚乙二醇嵌段共聚物。该可溶性高分聚合物在配制成缓释剂时，可有效形成缓释时间可控的纳米粒子。进一步地，所述可溶性高分子聚合物载体为mPEG-PLA，分子量为3000-20000。即为甲氧基聚乙二醇和聚乳酸的嵌段共聚物。进一步地，所述有机溶剂为无水乙醇、二氯甲烷、丙酮和甲醇中的一种或两种以上。有机溶剂需满足对雷帕霉素及可溶性高分子聚合物载体具有较佳的溶解性，同时在水中也具有较佳的分散性，与水可以互溶。即有机溶剂可溶于水。进一步地，所述水相液为蒸馏水、生理盐水、细胞培养液、体液、组织液、缓冲液或葡萄糖注射液中一种或两种。水相液为有机相提供较佳的分散介质，通过亲水性的可溶性高分子聚合物载体以及有机溶剂的分散作用，可以有效地提高雷帕霉素在水相液中的分散性，从而形成纳米级别的粒子。进一步地，原料还包括冻干保护剂。冻干保护剂为乳糖、葡萄糖、甘露醇或蔗糖中的一种或两种以上。本专利技术的目的之二采用如下技术方案实现：一种如上述的雷帕霉素纳米缓释剂的制备方法，包括以下步骤：1)把雷帕霉素原料药和可溶性高分子聚合物载体加入到有机溶剂中，形成有机相；2)将有机相吸入注射器中，按1-10滴每分钟的速度滴加入水相液中，室温搅拌30min-3h；3)减压回收有机溶剂；4)离心5-120min，取上清，0.22-0.45μm滤膜过滤后得到胶束溶液；5)将胶束溶液冷冻干燥，得到雷帕霉素纳米缓释剂。即该方法中，通过有机溶剂分散雷帕霉素原料药和可溶性高分子聚合物载体，使形成均匀分散的有机相。再通过将有机相缓慢地释放至水相液中，而溶解速率的差异且随着水相消液的搅拌，使雷帕霉素和可溶性高分子聚合物形成纳米级的胶束。进一步地，步骤2)中，搅拌速度为500-800rpm；步骤4)中，离心速率为4000-8000rpm。进一步地，步骤4)中，每100mL胶束溶液中加入5-10g的冻干保护剂。相比现有技术，本专利技术的有益效果在于：本专利技术提供一种雷帕霉素纳米缓释剂，通过可溶性高分子聚合物的包覆作用以及有机溶剂的助溶和分散作用，最后在水相液中形成胶束状的纳米粒子结构。该胶束型纳米粒子结构提高了雷帕霉素在血浆、组织液或进一步地消化道内的缓释性，其半衰期相对可控，可使雷帕霉素达到患处。本专利技术提供的雷帕霉素纳米缓释剂为纳米胶束结构，其粒径为10-200nm之间，载药量为0.1-20％，包封率可达80％以上，其具有均一且稳定的粒径分布，稳定的包封率和载药量，对血管风险小；该雷帕霉素纳米缓释剂具有稳定的包封率和载药量，具有较佳的肿瘤靶向作用；该雷帕霉素纳米缓释剂在血液内的半衰期可高达50个小时以上，能直达肿瘤患处，持续用药，肿瘤的消退率可达50％。附图说明图1为实施例1-5的制剂外观；图2为实施例4的雷帕霉素纳米缓释剂的表征图；图3为实施例4的雷帕霉素纳米缓释剂的体外抗肿瘤试验结果图；图4为实施例4的雷帕霉素纳米缓释剂的体内靶向结果图；图5为实施例4的雷帕霉素纳米缓释剂的体内抗肿瘤效果图。具体实施方式下面，结合附图和具体实施方式，对本专利技术做进一步描述，需要说明本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种雷帕霉素纳米缓释剂，其特征在于，由按重量份计的以下原料制成：1份雷帕霉素、0.5-20份可溶性高分子聚合物载体、40-200份有机溶剂和400-20000份的水相液。/n

【技术特征摘要】
1.一种雷帕霉素纳米缓释剂，其特征在于，由按重量份计的以下原料制成：1份雷帕霉素、0.5-20份可溶性高分子聚合物载体、40-200份有机溶剂和400-20000份的水相液。


2.如权利要求1所述的雷帕霉素纳米缓释剂，其特征在于，所述可溶性高分子聚合物载体为聚乙二醇-2000、聚乙二醇-4000、聚乙二醇-10000、聚乙二醇-15000、PLGA、PEO、PVP、聚丙烯、聚氨基酸、聚山梨酯和聚氧乙烯酯脂肪酸中的一种或两种以上。


3.如权利要求1所述的雷帕霉素纳米缓释剂，其特征在于，所述可溶性高分子聚合物载体为甲氧基聚乙二醇嵌段共聚物。


4.如权利要求1所述的雷帕霉素纳米缓释剂，其特征在于，所述可溶性高分子聚合物载体为mPEG-PLA，分子量为2000-20000。


5.如权利要求1所述的雷帕霉素纳米缓释剂，其特征在于，所述有机溶剂为无水乙醇、二氯甲烷、丙酮和甲醇中的一种或两种以上。


6.如权利要求1所述的雷帕霉素纳米缓释剂，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：严鹏科，
申请(专利权)人：严鹏科，
类型：发明
国别省市：广东;44