一种葡萄中氯吡脲残留量的检测方法技术

本发明专利技术属于食品检测技术领域，具体涉及一种葡萄中氯吡脲残留量的检测方法。本申请的葡萄中氯吡脲残留量的检测方法，通过采用高效液相色谱‑质谱联用法间进行检测，在葡萄基质中该检测方法的回收率达到95.8％‑99.2％，相对标准偏差在1.5％‑3.4％之间，解决了现有方法不能准确测定葡萄中氯吡脲药物残留的缺陷，有效的防止氯吡脲滥用或过度使用于食品上；本发明专利技术具有操作简便，分析速度快，灵敏度高，重现性好的特点，显著降低了测试人员的劳动强度，提升了检测效率，对食品检测领域的葡萄中氯吡脲药物残留的定量检测有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
一种葡萄中氯吡脲残留量的检测方法
本专利技术属于食品检测
，具体涉及一种葡萄中氯吡脲残留量的检测方法。
技术介绍
氯吡脲(英文名称Forchlorfenuron，CAS号：68157-60-8；分子式：C12H10ClN3O)；化学名称为1-(2-氯-4-吡啶)-3-苯基脲，是一种新型的调节植物生长类农药，具有细胞分裂素活性，能促进细胞分裂、蛋白质合成，提高光合作用，增强抗逆性。广泛应用于瓜果类植物，具有良好的促进花芽分化、保花、保果和促进果实肥大的作用，同时提高坐果率等。但是，滥用和过度使用氯吡脲，对农产品安全会带来严峻的挑战与威胁。最新修订版《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》(GB2763-2014)规定了葡萄中氯吡脲的的限量为0.05mg/kg，但目前氯吡脲的国家检测标准只有GB20770-2008，此方法比较适用大米、小麦和玉米等含水量较少粮谷中的检测，但对含水量高的瓜果类水果，并无针对性的国家标准/行业标准。且GB20770-2008中前处理过程中净化步骤需适用凝胶净化色谱仪，步骤繁琐，净化时间长等问题。而目前国家食品安全监督抽检实施细则(2019年)已经将氯吡脲纳入瓜果类风险监测范围，因此，根据该客观情况需要提供一种针对瓜果类中氯吡脲农药残留的快速检测方法。
技术实现思路
为了防止氯吡脲滥用或过度使用于食品上，解决现有的氯吡脲检测方法步骤繁琐，准确度低等问题，本专利技术提供一种葡萄中氯吡脲残留量的检测方法。为实现上述目的，本专利技术所采用的技术方案是：一种葡萄中氯吡脲残留量的检测方法，采用高效液相色谱-质谱联用法进行检测；包括对待测样品前处理的步骤；其中，对待测样品前处理所用提取试剂为乙腈、dSPE萃取包；所述乙腈与dSPE萃取包的体积比为10:1-5，以mL/g计；对待测样品提取液采用吸附剂、固相萃取柱进行净化处理。进一步的，待测样品前处理步骤如下：步骤一，采集：待测样品粉碎，过筛并匀浆，密封保存；步骤二，提取：准确称取5.00g样品(精确到0.001g)于50mL离心管中，加入10mL乙腈，1包dSPE萃取包；在2000r/min涡旋提取20-35min，并在4500r/min离心3-8min，获得第一提取液并转移至净化管中；再往离心管内加入10mL乙腈，在4500r/min高速均质1-4min，并在4500r/min离心3-8min，获得第二提取液，并与第一提取液的合并待净化；步骤三，吸附净化：往净化管内加入吸附剂，并震荡1-3min，在4500r/min离心3-8min，获得第一净化液；取10mL离心后净化液于50mL蒸馏瓶中，在60℃水浴下旋转蒸发至1mL，待固相萃取柱净化；步骤四，固相萃取净化：预先用洗脱液活化淋洗固相萃取柱；接着将旋蒸浓缩液转移至固相萃取柱中，用洗脱液洗脱柱子，并用接收瓶接收洗脱液，洗脱完成后在40℃水浴下旋转蒸发至干；再加入2mL的10％乙腈溶液定容至1mL，经0.45μm微孔滤膜过滤，获得供液相色谱-质谱联用仪测定的测试样品液。进一步的，吸附剂包括PSA吸附剂、C18吸附剂、无水硫酸镁吸附剂中的一种或多种。进一步的，PSA吸附剂、C18吸附剂、无水硫酸镁吸附剂的重量比为1:1-3:2-4。进一步的，固相萃取柱包括氨基固相萃取柱，其中，所述洗脱液包括乙腈、甲苯，所述乙腈与甲苯的体积比为1-3:1。进一步的，dSPE萃取包包括MgSO4、NaCl，所述MgSO4与NaCl的质量比为3-5:1。进一步的，高效液相色谱-质谱联用法中液相色谱的条件如下：流动相：A相，水；B相，乙腈；采用如下条件进行梯度洗脱：时间/min流动相A/％流动相B/％0.00-1.0060401.00-1.5060-1040-901.50-3.0010903.00-3.1010-6090-403.10-7.006040进一步的，液相色谱采用C18色谱柱，和/或柱温40℃，和/或流速0.3mL/min，和/或进样量5μL。进一步的，高效液相色谱-质谱联用法中质谱条件如下：进一步的，质谱采用离子源负离子扫描模式(ESI)，监测方式为多反应监测模式(MRM)，毛细管温度为270℃，雾化电压为3500V，雾化气温度300℃，鞘气45psi，辅助气15arb。本专利技术提供一种葡萄中氯吡脲残留量的检测方法，通过采用高效液相色谱-质谱联用法间进行检测，在葡萄基质中该检测方法的回收率达到95.8％-99.2％，相对标准偏差在1.5％-3.4％之间，解决了现有方法不能准确测定葡萄中氯吡脲药物残留的缺陷，有效的防止氯吡脲滥用或过度使用于食品上；本专利技术具有操作简便，分析速度快，灵敏度高，重现性好的特点，显著降低了测试人员的劳动强度，提升了检测效率，对食品检测领域的葡萄中氯吡脲药物残留的定量检测有重要意义。附图说明图1为氯吡脲标准品的TIC离子流色谱图；图2为葡萄中氯吡脲空白基质的TIC离子流色谱图；图3为氯吡脲在葡萄中的TIC离子流色谱图；图4为氯吡脲校正曲线图；图5为A份溶液的TIC离子流色谱图；图6为B份溶液的TIC离子流色谱图；图7为C份溶液的TIC离子流色谱图；图8为D份溶液的TIC离子流色谱图；图9为E份溶液的TIC离子流色谱图；图10为F份溶液的TIC离子流色谱图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本专利技术的一部分实施例，而不是全部的实施例。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道商购买得到的常规产品。除非特殊说明，以下所用仪器及试剂：主要仪器：ThermoTSQQUANTUMULTRA；主要试剂：氯吡脲标准品(纯度≥96％)；乙腈(色谱纯)；水(色谱纯)；dSPE萃取包(分析纯)；PSA吸附剂(N-丙基乙二胺，primerysecondaryamine)(40-63μm)；C18吸附剂(40-63μm)；无水硫酸镁吸附剂(40-63μm)；乙腈(分析纯)；甲苯(分析纯)。实施例一一种葡萄中氯吡脲残留量的检测方法，采用高效液相色谱-质谱联用法进行检测；包括对待测样品前处理的步骤，其步骤具体如下：步骤一，采集：将葡萄样品放粉碎机粉碎，样品全部过20目标准网筛，混匀制备好的试样分成两份，贴上样品标签，密封保存；步骤二，提取：准确称取5.00g样品(精确到0.001g)于50m本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种葡萄中氯吡脲残留量的检测方法，其特征在于：采用高效液相色谱-质谱联用法进行检测；包括对待测样品前处理的步骤；其中，对待测样品前处理所用提取试剂为乙腈、dSPE萃取包；所述乙腈与dSPE萃取包的体积比为10:1-5，以mL/g计；对待测样品提取液采用吸附剂、固相萃取柱进行净化处理。/n

【技术特征摘要】
1.一种葡萄中氯吡脲残留量的检测方法，其特征在于：采用高效液相色谱-质谱联用法进行检测；包括对待测样品前处理的步骤；其中，对待测样品前处理所用提取试剂为乙腈、dSPE萃取包；所述乙腈与dSPE萃取包的体积比为10:1-5，以mL/g计；对待测样品提取液采用吸附剂、固相萃取柱进行净化处理。


2.根据权利要求1所述的葡萄中氯吡脲残留量的检测方法，其特征在于，所述待测样品前处理步骤如下：
步骤一，采集：待测样品粉碎，过筛并匀浆，密封保存；
步骤二，提取：准确称取5.00g样品(精确到0.001g)于50mL离心管中，加入10mL乙腈，1包dSPE萃取包；在2000r/min涡旋提取20-35min，并在4500r/min离心3-8min，获得第一提取液并转移至净化管中；再往离心管内加入10mL乙腈，在4500r/min高速均质1-4min，并在4500r/min离心3-8min，获得第二提取液，并与第一提取液的合并待净化；
步骤三，吸附净化：往净化管内加入吸附剂，并震荡1-3min，在4500r/min离心3-8min，获得第一净化液；取10mL离心后净化液于50mL蒸馏瓶中，在60℃水浴下旋转蒸发至1mL，待固相萃取柱净化；
步骤四，固相萃取净化：预先用洗脱液活化淋洗固相萃取柱；接着将旋蒸浓缩液转移至固相萃取柱中，用洗脱液洗脱柱子，并用接收瓶接收洗脱液，洗脱完成后在40℃水浴下旋转蒸发至干；再加入2mL的10％乙腈溶液定容至1mL，经0.45μm微孔滤膜过滤，获得供液相色谱-质谱联用仪测定的测试样品液。


3.根据权利要求2所述的葡萄中氯吡脲残留量的检测方法，其特征在于：所述吸附剂包括PSA吸附剂、C18吸附剂、无水硫酸镁吸附剂中的一种或多种。


4.根据权利要求3所述的葡萄中氯吡脲残留量的检测方法，其特征在于：所述PSA吸附剂、C18吸附剂、无水硫酸镁吸附剂的重量比为1:1-3:2-4。

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【专利技术属性】
技术研发人员：李少军，林雪伦，庄泽龙，陈海强，黄丽娥，柯良蓉，刘芸芸，
申请(专利权)人：福建省国鼎检测技术有限公司，
类型：发明
国别省市：福建;35