根据利用样本中微生物群落变化的早产风险预测制造技术

本发明专利技术涉及一种用于通过检测产妇的样本中的微生物群落的变化来诊断早产风险的组合物、诊断试剂盒和诊断方法。更具体地，本发明专利技术涉一种及用于通过从产妇的样本中检测魏斯氏菌微生物来诊断早产风险的组合物、诊断试剂盒和诊断方法。

Prediction of the risk of preterm birth based on the change of microbial community in the sample

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】根据利用样本中微生物群落变化的早产风险预测
本专利技术涉及用于通过检测产妇样本中微生物群落的变化来诊断早产风险的组合物、诊断试剂盒和诊断方法。更具体地，本专利技术涉及用于通过从母亲的样本中检测魏斯氏菌(Weissella)微生物来诊断早产风险的组合物、诊断试剂盒和诊断方法。
技术介绍
早产(PTB；在妊娠37周之前出生)通常是指20周之后且37周之前经行分娩。早产的新生儿有很高的死亡风险，约占所有婴儿死亡的60％。此外，即存活下来的婴儿也会由于神经系统发育障碍、呼吸系统并发症和产后发育延迟而需要新生儿重症监护，并且，长期和短期疾病的发病率极高。大约70％的早产是由于各种病理过程(如子宫内感染和炎症)所导致的早产阵痛(PTL)和胎膜早破(PPROM)引起的。然而，与早产有关的机制尚未明确，并且通常与自然阵痛有关的危险因素包括生殖器感染、多胎妊娠、妊娠中期和妊娠晚期出血、以及有早产史等。已知，早产儿存活已提高为最低妊娠周数27周，出生体重0.9kg，并且与出生体重相比，新生儿的患病率和死亡率主要受妊娠周数，即成熟度的影响。因此，在早期周数内出现早产迹象之时，通过适当的治疗使分娩延迟一周来增加新生儿的成熟度，是影响产妇和新生儿的健康、生活质量和成本的重要因素。迄今为止，对早产的治疗是通过对出现早产阵痛的产妇使用子宫收缩抑制剂、抗生素治疗、类固醇和孕酮来抑制阵痛并使分娩延迟。但是，在已经出现早产阵痛和胎膜早破的情况下，抗生素对子宫内感染和炎症的治疗作用是有限的，并且不能防止早产。此外，由于患有宫颈功能不全的产妇有极高的感染和流产的风险，因此虽然已经可以通过进行宫颈环扎术来作为治疗和预防早产的措施，但这种方法只有助于短暂地延长妊娠，而无法进行根本性的治疗。因此，相比于出现胎膜早破或早产症状后才进行治疗，更需要通过提前预测早产的风险来甄别有早产风险的产妇组，从而通过对其进行适当的护理来预防早产或开发有效的早产治疗方法。另外，早产的时间越提前，给新生儿留下后遗症的可能性就越大，并且后遗症也越严重，因此，如果可以预测早产，则有望大幅度降低早产儿以及因此导致的残疾儿童的出现率。通常用于预测早产的方法是通过妇产科学、人口统计学和各种综合症来确认需要特别关注的女性群体，但是该方法存在不具有敏感性和特异性的问题。为了克服该问题，已经进行了许多研究以寻找用于预测突发性早产或胎膜早破的生化标志物，然而，虽然已提出血浆雌二醇-17β(plasmaestradiol-17beta)，孕酮(progesterone)和C反应蛋白(C-reactiveprotein)等物质作为候选，但也已经证明这些物质不太准确。因此，有必要开发更易于检测，并且具有更高灵敏度和特异性的标志物。妇女的阴道微生物群落(microbiota)是细菌和病原体的屏障，对妇女的健康起着重要的作用，微生物群落的生化学和免疫学特征可以作为阴道环境的健康指标。正常的微生物群落可以保护妇女免受如酵母菌感染、性传播感染、尿路感染和人类免疫缺陷病毒(HIV)感染等的泌尿生殖系统疾病的侵害。据报道，在被诊断为细菌性阴道病(BV)的妇女中，早产和晚期流产的风险分别高出两倍和六倍。近期，虽然随着基因测序技术的发展，使得研究人体各个部位的人类微生物群落成为可能，但迄今为止，大多数关于阴道微生物群落的研究都集中在健康妇女、或患有细菌性阴道炎妇女的阴道微生物群落的构成上，而几乎没有以查明阴道微生物群与早产风险之间关系，并将其运用于诊断早产风险性为目的的研究。尤其，尚未对出现早产阵痛的产妇和胎膜早破的韩国产妇进行过阴道微生物特征的比较研究。因此，本专利技术的专利技术者通过对出现早产的主要原因的早产阵痛或胎膜早破的产妇的阴道微生物进行表征，并使用高通量基因测序鉴定来确认预测早产的阴道微生物参数，从而完成了本专利技术。[现有技术文献][专利文献]专利文献1：韩国专利公开号10-1559975(2015.10.14公告)。
技术实现思路
技术问题在本专利技术中，通过对产妇阴道内微生物群落进行分析来发掘可暗示早产危险性的早产预测标志物，从而为早产的预防作出贡献。为此，在一个实施例中，提供一种用于诊断产妇早产风险的组合物，所述组合物包括能够检测魏斯氏菌微生物的试剂。在另一个实施例中，提供了一种包含所述组合物的用于诊断产妇早产风险的试剂盒。在另一个实施例中，提供了一种提供诊断早产风险所必需的信息的方法，该方法包括从产妇样本中检测魏斯氏菌微生物。技术方案一方面，本专利技术涉及用于诊断产妇早产风险的组合物，其包含能够检测魏斯氏菌微生物的试剂。优选地，本专利技术的用于诊断的组合物可以进一步包括能够检测选自乳杆菌(Lactobacillus)、拟杆菌(Bacteroides)和普氏菌(Prevotella)的微生物的试剂。优选地，在本专利技术中，能够检测所述微生物的试剂可以是对微生物具有特异性的引物、探针、反义寡核苷酸、适体或抗体。更优选地，所述引物可以是能够扩增微生物的16SrRNA(16SrDNA)的引物。在另一个方面，本专利技术涉及一种包含所述组合物的用于诊断产妇早产风险的试剂盒。在又另一个方面，本专利技术涉及一种通过从产妇样本中检测魏斯氏菌微生物来提供诊断早产风险所必需的信息的方法。此外，本专利技术涉及一种用于提供诊断早产风险所必需的信息的方法，该方法包括从产妇样本中检测魏斯氏菌微生物的步骤。优选地，所述方法可以进一步包括检测选自乳杆菌、拟杆菌和普氏菌的微生物的步骤。同样优选地，所述方法包括：(a)从产妇的样本中提取基因组DNA的步骤，(b)使提取的基因组DNA与对魏斯氏菌微生物具有特异性的引物进行反应的步骤，以及(c)对所述反应物进行扩增的步骤。同样优选地，所述步骤(c)可以通过聚合酶反应进行。同样优选地，所述步骤(c)可以进一步包括将扩增产物的量与正常产妇样本的扩增产物、或截止值(cut-off)进行比较的步骤。同样优选地，所述样本可以是源自产妇的宫颈阴道的样本，例如，阴道样本，具体可为阴道粘液样本。有益效果本专利技术提供了一种用于诊断早产风险的微生物生物标志物，可通过利用该微生物生物标志物，和进行简单的采样来快速检测早产风险，并且还可以开发与其相关的快速诊断试剂盒。附图说明图1a-1c示出了根据产妇首次住院时的诊断得出的PCoA图标。图1a和1b示出了主坐标分析(PCoA，n＝65)，而图1c示出了关于诊断的Chao1(n＝65)。图2示出了56名产妇的阴道样本中的基于乳杆菌物种的微生物群图谱的分级聚类(Hierarchicalclustering)。CST(Communitystatetypes，群落状态类型)I、II、III和IV为乳杆菌优势群落，分别由卷曲乳杆菌(L.crispatus)、格氏乳杆菌(L.gasseri)、惰性乳杆菌(L.iners)和詹氏乳杆菌(L.jensenii)组本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测产妇的早产风险的组合物，所述组合物包含能够检测魏斯氏菌微生物的试剂。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170904 KR 10-2017-01126931.一种用于检测产妇的早产风险的组合物，所述组合物包含能够检测魏斯氏菌微生物的试剂。


2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，
还包含能够检测选自乳杆菌、拟杆菌、普氏菌中的微生物的试剂。


3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，
能够检测所述微生物的所述试剂为对微生物具有特异性的引物、探针、反义寡核苷酸、适体或抗体。


4.根据权利要求3所述的组合物，其特征在于，
所述引物为能够扩增微生物的16SrRNA的引物。


5.一种用于诊断早产风险的试剂盒，所述试剂盒包含权利要求1-4中任一项所述的组合物。


6.一种提供诊断早产所必需的信息的方法，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：金英珠，俞泳我，杜智恩，权恩震，朴美惠，
申请(专利权)人：梨花女子大学校产学协力团，
类型：发明
国别省市：韩国;KR