本发明专利技术公开了一株禽传染性支气管炎病毒（IBV）的天然弱毒株（CK/CH/2014/QL1403）。该IBV毒株不引起SPF鸡发病，基因分析属于一个新型IBV分支，该IBV分离株CK/CH/2014/QL1403可以用鸡胚增殖传代，鸡胚尿囊液繁殖的IBV稀释后免疫鸡，可以提供免疫鸡抵抗禽传染性支气管炎病毒强毒的攻击，可以用作疫苗研究。
A natural weak strain of avian infectious bronchitis virus and its application
The invention discloses a natural weak strain (CK / CH / 2014 / ql1403) of avian infectious bronchitis virus (IBV). The IBV strain does not cause SPF in chickens. Gene analysis belongs to a new branch of IBV. The IBV isolate CK / CH / 2014 / ql1403 can be propagated by chicken embryo. The diluted IBV produced by chicken embryo allantoic fluid can be used to immunize chickens to resist the attack of avian infectious bronchitis virus, and can be used for vaccine research.
【技术实现步骤摘要】
一株禽传染性支气管炎病毒的天然弱毒株及其应用
本专利技术属于生物
，涉及一株禽传染性支气管炎病毒的天然弱毒株及其应用。
技术介绍
禽传染性支气管炎(IB)是由禽传染性支气管炎病毒(IBV)引起的一种急性、高度接触性传染病。IBV感染发病后临床症状与病理变化主要集中在呼吸道、肾脏及生殖道，进而造成家禽肉料比降低，产蛋量与产蛋品质下降，继发感染后死亡率增加，给我国养禽业带来巨大经济损失。IBV最早于20世纪80年代初在我国分离报道，随后在我国广泛流行。该病病原的血清型很多，不同血清型毒株的交叉保护效果差，虽然IBV疫苗(Mass、4/91及tl/CH/LDT3/03型疫苗)广泛使用，但IB仍然频繁爆发，而且新的血清型、基因型或变异株不断出现，IB的防控带来巨大挑战。QX毒株于1997年在我国最早报道，随后在亚洲、欧洲及非洲等许多国家开始流行。该型病毒最早报道QXIBV毒株主要导致腺胃病变，属于腺胃型。但近些年报道显示该型毒株主要致肾脏与呼吸道病变，并且可以引起雏鸡死亡。有文献报道我国1995至2009年间分离IBV毒株中超过50％属于QX型IBV，而这一比例在我国南部部分地区可能更高。在IB流行地区使用Mass、4/91及tl/CH/LDT3/03型弱毒苗，如H120、H52、4/91及LDT3-A，部分地区甚至进行联合使用，但免疫后该型IBV仍然频繁爆发与分离报道，同样有文献报道Mass型弱毒苗H120不能预防该型病毒。综上所述，我国目前频繁使用的商品化疫苗不能有效预防QX型IBV发病。为了控制该病的流行和发生，经对发病鸡进行病原分离鉴定和序列分析，并进行了相关动物免疫试验，取得了较好效果。
技术实现思路
专利技术目的：本专利技术基于专利技术人对IBV(CK/CH/2014/QL1403)的分离和鉴定，提供了一种可以作为疫苗的IBV分离毒株。所述病毒是最近在中国的一个鸡群中进行常规病原监测过程中分离出来的，由禽类预防医学省部共建教育部实验室保管。该分离病毒有囊膜的单链RNA病毒，属巢病毒(Nidovirales)目冠状病毒科(Coronaviridae)。该禽传染性支气管炎病毒的天然弱毒株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2019年1月27日，保藏编号为CCTCCNO：V201907，其分类命名为鸡传染性支气管炎病毒QL1403。本专利技术涉及已知的冠状病毒科成员相关的分离的一株禽传染性支气管炎病毒。本专利技术所要解决的技术问题是提供了该禽传染性支气管炎病毒的天然弱毒株在制备预防或治疗禽传染性支气管炎药物方面的应用。本专利技术还要解决的技术问题是提供了一种预防或治疗禽传染性支气管炎滴剂。本专利技术最后要解决的技术问题是提供了一种预防禽传染性支气管炎疫苗。技术方案：为实现上述技术目的，本专利技术采取如下的技术方案：一株禽传染性支气管炎病毒的天然弱毒株，该禽传染性支气管炎病毒的天然弱毒株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2019年1月27日，保藏编号为CCTCCNO：V201907，其分类命名为鸡传染性支气管炎病毒QL1403。其中，应用重组技术分析发现，CK/CH/2014/QL1403天然弱毒株的基因组20395-24840片段发生了重组。进一步对基因组序列重组来源分析显示CK/CH/2014/QL1403来源于QX与TC07-2型毒株自然重组，通过进化树分析分析得到该毒株属于IBV新型毒株。本
技术实现思路
还包括所述的禽传染性支气管炎病毒的天然弱毒株在制备预防禽传染性支气管炎疫苗方面的应用。本
技术实现思路
还包括一种预防禽传染性支气管炎疫苗，所述疫苗包括所述的禽传染性支气管炎病毒的天然弱毒株。其中，所述禽传染性支气管炎为鸡传染性支气管炎。与现有技术相比，本专利技术具有如下优点和有益效果：1、本专利技术涉及的禽传染性支气管炎病毒的天然弱毒株IBVCK/CH/2014/QL1403，动物实验显示该毒株不引起SPF鸡产生临床症状与病理变化，属于天然弱毒株。2、本专利技术涉及的IBV疫苗，是由本专利技术的专利技术人将分离的禽传染性支气管炎病毒的天然弱毒株IBVCK/CH/2014/QL1403接种SPF鸡胚增殖后收集制成。免疫SPF鸡14天后，鸡群IBV抗体反应全部阳性；免疫SPF鸡28天后，用QX基因型IBV的野毒株攻击接受新疫苗的鸡群。新的疫苗提供了足够的针对QX基因型IBV的抗体滴度，并为鸡群提供了有效的保护。附图说明图1显示IBVCK/CH/2014/QL1403S1基因(GenBank检索号KU361188)进化树分析结果。S1基因进化树分析显示CK/CH/2014/QL1403与ck/CH/IBTZ/2012(GenBank检索号KF663559)及CK/CH/SD09/005(GenBank检索号KF668605)株同属一个基因分支，属于IBV新型毒株，系统树是通过邻接法构建的，自引导值是从1000个重复中推断得出的。图2A显示IBVCK/CH/2014/QL1403基因组序列(GenBank检索号KU361188)位点同源性分析结果。参考株CK/CH/SD09/005(GenBank检索号KF668605)与CK/CH/2014/QL1403基因组序列位点同源性以红线显示；参考株SDIB821/2012(GenBank检索号KF574761)与CK/CH/2014/QL1403基因组序列位点同源性以蓝线显示；参考株M41(GenBank检索号DQ834384)与CK/CH/2014/QL1403基因组序列位点同源性以灰线显示。图2B显示IBVCK/CH/2014/QL1403基因组序列(GenBank检索号KU361188)不同片段进化树分析结果。进化树分析显示CK/CH/2014/QL1403基因组序列片段1至20394和24841至27691与SDIB821/2012(GenBank检索号KF574761)及YX10(GenBank检索号JX840411)株同属一个基因分支，属于IBVQX型毒株；CK/CH/2014/QL1403基因组序列片段20395～24840与ck/CH/IBTZ/2012(GenBank检索号KF663559)及CK/CH/SD09/005(GenBank检索号KF668605)株同属一个基因分支，属于IBV新型毒株。系统树是通过邻接法构建的。自引导值是从1000个重复中推断得出的。具体实施方式下面申请人将结合具体的实施例对本专利技术产品的制备过程及应用过程做详细说明，便于本领域技术人员清楚地理解本专利技术。但应该理解，以下实施例不应以任何方式被解释为对本申请权利要求书请求保护范围的限制。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。IBV分离株CK/CH/2014/QL1403分离自江苏某鸡群。具体分离方法如下：取临床送检鸡，采集气管、肺、肾脏、输卵管等。组织样品用PBS(含10000U青霉素和100μg链霉素，pH7.2)制成10％w/本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一株禽传染性支气管炎病毒的天然弱毒株，其特征在于，该禽传染性支气管炎病毒的天然弱毒株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2019年1月27日，保藏编号为CCTCC NO:V201907，其分类命名为鸡传染性支气管炎病毒QL1403。/n
【技术特征摘要】
1.一株禽传染性支气管炎病毒的天然弱毒株，其特征在于，该禽传染性支气管炎病毒的天然弱毒株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2019年1月27日，保藏编号为CCTCCNO:V201907，其分类命名为鸡传染性支气管炎病毒QL1403。
2.根据权利要求1所述的禽传染性支气管炎病毒的天然弱毒株，其特征在于，所述天然弱毒株的基因组第20395位~第24840位基因片段为自然重组基因片段。
3.权利要求1或2所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：秦爱建，耿仁浩，周海生，钱琨，邵红霞，叶建强，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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