The invention provides a digital PCR chip, which comprises a base, a rotating upper cover, a microarray reaction chamber, a sealing layer, a sealing ring, an elastic buckle, a rotating shaft I, a rotating shaft II and a torsion spring. Among them, 40-100 million micropores are distributed on the surface of the microarray reaction chamber, which are used to separate and carry the reaction reagent system independently; the rotating upper cover and the base rotate around the rotating shaft to realize sample filling; the rotating upper cover is equipped with a sealing layer and a sealing ring, which are used to isolate and seal the microarray reaction chamber to avoid cross contamination and evaporation; the elastic clasp and the base rotate around the rotating shaft to avoid cross contamination and evaporation The torsion spring in the second shaft realizes compression and sealing. The digital PCR chip of the invention does not need external driving device, saves reagent and is simple in operation.
【技术实现步骤摘要】
一种数字PCR芯片
本专利技术涉及数字PCR
,特别是数字PCR芯片。
技术介绍
聚合酶链式反应(PCR)是一种可将DNA片段体外扩增的分子生物技术,数字PCR(dPCR)是一种核酸分子绝对定量的新技术,它不依赖标准曲线和参照样本,无需设对照,可直接检测出目标分子的拷贝数。dPCR原理类似于计算机科学中的“分治算法”,将低模板的试剂分配到大量微孔中,经过统计学分析,大部分微孔中没有或者只有1个目标分子,扩增完成后,通过光学检测模块计数,即为初始模板量。相比于传统的定量PCR,dPCR具有更高的灵敏度、特异性、高耐受性和精确性,此项技术已经在极微量核酸样本检测、CNV分析和复杂样本基因表达检测等方面有着广泛应用。数字PCR可以有两种检测方法。其一为乳滴法检测模板量,将含有核酸分子的反应体系形成上万个微滴,微滴体积约为1nL左右,遵循统计学规律,每个微滴最多含有1个核酸分子(个别差异除外),把每个微滴作为一个PCR反应容器,经过循环扩增后,使用微滴分析仪,逐个检验每个微滴是否扩增,对扩增的微滴进行计数,最后根据泊松分布原理及阳性微滴的比例,计算出模板的拷贝数。这种方法,生成微滴时误差较大,影响检测结果,且成本高。其二为使用微流控芯片检测,微流控原理为通过外界施加压力将试剂挤入芯片孔道内,但驱动结构复杂、占用空间较大、成本高,流体通道阻力大,很容易有气体残留,这种方式一般需要试剂留有大量余量才能注满芯片,对试剂造成极大的浪费。材料需要综合考虑导热性、耐热性、生物相容性、透光性,可选用硅 ...
【技术保护点】
1.一种数字PCR芯片,其特征在于,其包括基座、旋转上盖、微阵列反应仓、密封层、密封圈、弹力卡扣、转轴一、转轴二、扭簧;/n所述基座与所述旋转上盖之间由所述转轴一连接;/n所述转轴二通过扭簧与所述基座和所述弹力卡扣之间相连;/n所述基座上置有微阵列反应仓;/n所述旋转上盖上置有密封层;/n所述密封层为低熔点固态直链烷烃;/n所述微阵列反应仓,由微孔组成。/n
【技术特征摘要】
1.一种数字PCR芯片,其特征在于,其包括基座、旋转上盖、微阵列反应仓、密封层、密封圈、弹力卡扣、转轴一、转轴二、扭簧;
所述基座与所述旋转上盖之间由所述转轴一连接;
所述转轴二通过扭簧与所述基座和所述弹力卡扣之间相连;
所述基座上置有微阵列反应仓;
所述旋转上盖上置有密封层;
所述密封层为低熔点固态直链烷烃;
所述微阵列反应仓,由微孔组成。
2.根据权利要求1所述的数字PCR芯片,其特征在于,所述微阵列反应仓制作材料包括树脂、塑料、硅片、玻璃、石英、金属和陶瓷。
3.根据权利要求1所述的数字PCR芯片,其特征在于,所述微阵列反应仓表面分布400~1亿个微孔,微孔容积为0.5pL~1μL,所述微阵列反应仓分隔为1~100个分区,用于1~100个样品同时进行数字PCR反应。
4.根据权利要求1所述的数字PCR芯片,其特征在于,所述微孔形状为圆形、方形、三角形、六边形、多边形,排布为横纵或密排。<...
【专利技术属性】
技术研发人员:任鲁风,李洁昆,蔡亦梅,高静,范东雨,
申请(专利权)人:北京中科生仪科技有限公司,
类型:发明
国别省市:北京;11
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