鱼油软胶囊中EPA、DHA的测定方法技术

本发明专利技术公开了一种鱼油软胶囊中EPA、DHA的测定方法，属于EPA、DHA的检测技术领域。本发明专利技术通过对现有的检测EPA、DHA的方法进行改进，明显缩短了分析时间，分析效率提高了3倍，且改进后的检测方法依然符合色谱分析法的要求，目标物质的重复性也符合要求，为目标物质较单一的样品的检测提供了检测基础，具有重要的指导意义。

Determination of EPA and DHA in fish oil soft capsule

The invention discloses a determination method of EPA and DHA in fish oil soft capsule, belonging to the technical field of EPA and DHA detection. By improving the existing methods for detecting EPA and DHA, the analysis time is obviously shortened, the analysis efficiency is increased by three times, and the improved detection method still meets the requirements of chromatographic analysis method, and the repeatability of the target substance also meets the requirements, which provides the detection basis for the detection of the single sample of the target substance and has important guiding significance.

【技术实现步骤摘要】
鱼油软胶囊中EPA、DHA的测定方法
本专利技术属于EPA、DHA的检测
，具体涉及一种鱼油软胶囊中EPA、DHA的测定方法。
技术介绍
目前EPA、DHA的标准测定方法为GB5009.168-2016，此国标中有三种方法测定脂肪酸，色谱参考条件适用于此国标中所有方法的同时也适用于所有脂肪酸的测定。国标色谱参考条件的程序升温缓慢，因为不同脂肪酸气化后与色谱作用的温度要求不同，分析时间长达85min，目的是让样品中所有物质在长时间的逐步缓慢升温中都能被分离出来，适用于目标物质较复杂的样品分析。而对于目标物质较单一的样品，如荣格牌鱼油软胶囊基质比较简单，此色谱条件则存在分析耗时长，使得分析效率大大降低的缺陷。因此对于此类样品，我们可以结合目标物质的性质，创造性地改变气相色谱分析条件，以缩短分析时间，并保证分析的准确性。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了解决现有技术的不足，而提供一种鱼油软胶囊中EPA、DHA的测定方法，该测定方法显著缩短了分析时间，有效提高了分析效率，并符合色谱分析法的要求和色谱分析重复性要求。本专利技术采用如下技术方案：一种鱼油软胶囊中EPA、DHA的测定方法，包括如下步骤：步骤一，试剂准备：配制氢氧化钠甲醇溶液、配制饱和氯化钠水溶液，并准备14％三氟化硼甲醇溶液、正庚烷、无水硫酸钠；步骤二，标准溶液配制：分别配制EPA标准中间液、DHA标准中间液及EPA/DHA混标标准使用溶液；步骤三，试样脂肪的皂化和脂肪酸的甲酯化；>步骤四，测定：分别移取等量的试样和标准溶液，注入气相色谱仪中进行测定，测定条件：毛细管色谱柱：聚二氰丙基硅氧烷强极性固定相，柱长30m，内径0.25mm，膜厚0.2μm；进样器温度：270℃；检测器温度：280℃；程序升温：初始温度200℃，持续7min；200℃～230℃，升温速率5℃/min，保持15min(注意事项：此程序升温不适合面积归一化法的测定)；载气：氮气；分流比：100：1；进样体积：1.0μL。碳链越长、支链越多的物质色谱柱分析温度越高，EPA的出峰温度在213℃左右，DHA的出峰温度在230℃，EPA、DHA的出峰时间分别在70.36min和81.72min。我们在测定样品时只需保证我们的目标物质能被完全分离，因此缩短分析时间可以通过提高色谱柱初始温度及升温速率，让低沸点的物质在较高的温度下快速出峰、高沸点的物质在较高的温度下保持一段时间使其出峰。其中一些实施例中，所述配制氢氧化钠甲醇溶液具体为：称取2g氢氧化钠溶解在100mL甲醇中，混匀，得2％氢氧化钠甲醇溶液；所述配制饱和氯化钠水溶液具体为称取36g氯化钠溶于100mL水中，搅拌溶解，澄清备用；所述14％三氟化硼甲醇溶液是指每100mL甲醇中溶解14g三氟化硼。其中一些实施例中，所述配制EPA标准中间液具体为：精密称取20.0mgEPA甲酯标准品于10ml容量瓶中，用正庚烷定容至刻度，摇匀，即得2mg/ml的EPA标准中间液，于-10℃以下环境中贮存，有效期3个月；所述配制DHA标准中间液具体为：精密称取20.0mgDHA甲酯标准品于10ml容量瓶中，用正庚烷定容至刻度，摇匀，即得2mg/mlDHA标准中间液，于-10℃以下环境中贮存，有效期3个月。其中一些实施例中，所述配制EPA/DHA混标标准使用溶液具体为：精密移取2mg/mlEPA标准中间液、2mg/mlDHA标准中间液各0.5ml置于1ml容量瓶中，摇匀，即得，并吸取该溶液到进样瓶中待测定。临配现用其中一些实施例中，所述试样脂肪的皂化和脂肪酸的甲酯化具体如下：称取0.5g试样于圆底烧瓶中，加入步骤一配制的氢氧化钠甲醇溶液8mL，连接回流冷凝管，置于80±1℃水浴中回流，直至油滴消失(约30min)；加入14％三氟化硼甲醇溶液7mL，在80±1℃水浴中继续回流2min，并用少量水冲洗回流冷凝管后，停止加热，取下烧瓶，迅速冷却至室温；准确加入10mL正庚烷，振摇2min，再加入饱和氯化钠水溶液，摇匀后转移至25mL比色管(不用润洗)静置分层；精密称取上层正庚烷提取溶液1mL，置于10mL容量瓶中，加正庚烷稀释至刻度，摇匀，加入约3～5g无水硫酸钠，振摇1min，静置5min，吸取上层溶液到进样瓶中待测定(相当于样品稀释100倍)。其中一些实施例中，所述检测条件应满足理论塔板数n至少2000/m，分离度R应大于1.5。其中一些实施例中，所述正庚烷为色谱纯。其中一些实施例中，所述甲醇为色谱纯。本专利技术与现有技术相比，其有益效果为：本专利技术通过对现有的检测EPA、DHA的方法进行改进，明显缩短了分析时间，分析效率提高了3倍，且改进后的检测方法依然符合色谱分析法的要求，目标物质的重复性也符合要求，为目标物质较单一的样品的检测提供了检测基础，具有重要的指导意义。附图说明图1为本专利技术EPA、DHA混标对照1.gcd色谱图；图2为本专利技术EPA、DHA混标对照2.gcd色谱图；图3为本专利技术鱼油样品1-1色谱图；图4为本专利技术鱼油样品1-2色谱图；图5为本专利技术鱼油样品2-1色谱图；图6为本专利技术鱼油样品2-2.gcd色谱图；图7为本专利技术鱼油对照001.gcd色谱图；图8为本专利技术鱼油对照002.gcd色谱图；图9为本专利技术鱼油样品1-1.gcd色谱图；图10为本专利技术鱼油样品1-2.gcd色谱图；图11为本专利技术鱼油样品2-1.gcd色谱图；图12为本专利技术鱼油样品2-2.gcd色谱图；图13为本专利技术鱼油样品3-1.gcd色谱图；图14为本专利技术鱼油样品3-2.gcd色谱图；图15为本专利技术鱼油样品4-1.gcd色谱图；图16为本专利技术鱼油样品4-2.gcd色谱图；图17为本专利技术鱼油样品5-1.gcd色谱图；图18为本专利技术鱼油样品5-2.gcd色谱图；图19为本专利技术鱼油样品6-1.gcd色谱图；图20为本专利技术鱼油样品6-2.gcd色谱图；图21为本专利技术data001.gcd色谱图；图22为本专利技术data002.gcd色谱图；图23为本专利技术data003.gcd色谱图；图24为本专利技术data004.gcd色谱图；图25为本专利技术data005.gcd色谱图；图26为本专利技术data006.gcd色谱图。具体实施方式下面结合附图和具体实施例，进一步阐明本专利技术，应理解这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围，在阅读了本专利技术之后，本领域技术人员对本专利技术的各种等效形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。一种鱼油软胶囊中EPA、DHA的测定方法，包括如下步骤：步骤一，试剂准备：配制氢氧化钠甲醇溶液、配制饱和氯化钠水溶液，并准备14％三氟化硼甲醇溶液本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.鱼油软胶囊中EPA、DHA的测定方法，其特征在于，包括如下步骤：/n步骤一，试剂准备：配制氢氧化钠甲醇溶液、配制饱和氯化钠水溶液，并准备14％三氟化硼甲醇溶液、正庚烷、无水硫酸钠；/n步骤二，标准溶液配制：分别配制EPA标准中间液、DHA标准中间液及EPA/DHA混标标准使用溶液；/n步骤三，试样脂肪的皂化和脂肪酸的甲酯化；/n步骤四，测定：分别移取等量的试样和标准溶液，注入气相色谱仪中进行测定，测定条件：/n毛细管色谱柱：聚二氰丙基硅氧烷强极性固定相，柱长30m，内径0.25mm，膜厚0.2μm；/n进样器温度：270℃；/n检测器温度：280℃；/n程序升温：初始温度200℃，持续7min；200℃～230℃，升温速率5℃/min，保持15min；/n载气：氮气；/n分流比：100：1；/n进样体积：1.0μL。/n

【技术特征摘要】
1.鱼油软胶囊中EPA、DHA的测定方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤一，试剂准备：配制氢氧化钠甲醇溶液、配制饱和氯化钠水溶液，并准备14％三氟化硼甲醇溶液、正庚烷、无水硫酸钠；
步骤二，标准溶液配制：分别配制EPA标准中间液、DHA标准中间液及EPA/DHA混标标准使用溶液；
步骤三，试样脂肪的皂化和脂肪酸的甲酯化；
步骤四，测定：分别移取等量的试样和标准溶液，注入气相色谱仪中进行测定，测定条件：
毛细管色谱柱：聚二氰丙基硅氧烷强极性固定相，柱长30m，内径0.25mm，膜厚0.2μm；
进样器温度：270℃；
检测器温度：280℃；
程序升温：初始温度200℃，持续7min；200℃～230℃，升温速率5℃/min，保持15min；
载气：氮气；
分流比：100：1；
进样体积：1.0μL。


2.根据权利要求1所述的鱼油软胶囊中EPA、DHA的测定方法，其特征在于，所述配制氢氧化钠甲醇溶液具体为：称取2g氢氧化钠溶解在100mL甲醇中，混匀，得2％氢氧化钠甲醇溶液；所述配制饱和氯化钠水溶液具体为称取36g氯化钠溶于100mL水中，搅拌溶解，澄清备用；所述14％三氟化硼甲醇溶液是指每100mL甲醇中溶解14g三氟化硼。


3.根据权利要求1所述的鱼油软胶囊中EPA、DHA的测定方法，其特征在于，所述配制EPA标准中间液具体为：精密称取20.0mgEPA甲酯标准品于10ml容量瓶中，用正庚烷定容至刻度，摇匀，即得2mg/ml的EPA标准中间液，于-10℃以下环境中贮存；所述配制DHA标准中间液具体为：精密称取20.0mgDHA甲酯标准品...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘兵，于荣贤，熊伟，冯绍坤，王祖忠，李阿姑，苗玉洁，李珊珊，曹佳丽，王施棋，卢文杰，曾晓娴，孙小玲，
申请(专利权)人：深圳市荣格保健品有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44