The invention relates to a method for quantitative determination of fecal bacteria, which comprises the following steps: (1) dilution of fecal bacteria solution; (2) adding dye to the fecal bacteria solution obtained in step (1); (3) measuring the fecal bacteria solution obtained in step (2) with flow cytometer to obtain the bacterial concentration in the fecal bacteria solution. Compared with the prior art, the fecal bacteria quantitative method of the invention is simple and quick in operation, can operate dozens of samples in large quantities at the same time, and can determine the total number of fecal bacteria, and the result is relatively accurate.
【技术实现步骤摘要】
一种粪菌定量的方法
本专利技术属于粪菌移植
,尤其是涉及一种粪菌定量的方法。
技术介绍
粪菌移植(FMT),也称为粪菌治疗或肠微生菌移植,是将健康人粪便中的功能菌群,移植到患者胃肠道内,重建具有正常功能的肠道菌群,实现肠道及肠道外疾病的诊疗。目前,粪菌移植已被视为一种特殊的器官移植,用于治疗难辨梭状芽胞杆菌感染、炎症性肠病、肠易激综合征、代谢综合征、神经发育不良与神经退行性疾病、自身免疫性肠病、肠道食物过敏等。现代粪菌移植技术主要是器械介入的方法,比如胃镜、胃管、肠镜.空肠管等,腹泻型IBS.溃疡性结肠炎等治疗需要多次移植,而每次粪便菌群都需要通过导管经过胃、十二指肠,注入十二指肠远端,过程复杂,患者有一定痛苦,应用受到限制。制备的粪菌样本在室温存放时间短,需要立即进行移植,加入无菌甘油后虽然可以置于-80'C冰冻,但是取用不便。
技术实现思路
本专利技术的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种粪菌定量的方法。本专利技术的目的可以通过以下技术方案来实现:一种粪菌定量的方法,包括以下步骤:(1)粪菌液稀释;(2)将步骤(1)所得粪菌稀释液加入染料;(3)使用流式细胞仪测定步骤(2)所得粪菌稀释液,得到粪菌稀释液中细菌浓度。优选地,步骤(1)中,粪菌液采用高温灭菌的生理盐水进行稀释。优选地,步骤(1)中,粪菌液稀释到1000倍。优选地,步骤(2)中,所述染料选自染料Sybrgreen,其用于结合于细菌的dsDNA上激发荧光 ...
【技术保护点】
1.一种粪菌定量的方法,其特征在于,包括以下步骤:/n(1)粪菌液稀释;/n(2)将步骤(1)所得粪菌稀释液加入染料;/n(3)使用流式细胞仪测定步骤(2)所得粪菌稀释液,得到粪菌稀释液中细菌浓度。/n
【技术特征摘要】
1.一种粪菌定量的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)粪菌液稀释;
(2)将步骤(1)所得粪菌稀释液加入染料;
(3)使用流式细胞仪测定步骤(2)所得粪菌稀释液,得到粪菌稀释液中细菌浓度。
2.根据权利要求1所述的一种粪菌定量的方法,其特征在于,步骤(1)中,粪菌液采用高温灭菌的生理盐水进行稀释。
3.根据权利要求1所述的一种粪菌定量的方法,其特征在于,步骤(1)中,粪菌液稀释到1000倍。
4.根据权利要求1所述的一种粪菌定量的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述染料选自染料Sybrgreen。
5.根据权利要求1所述的一种粪菌定量的方法,其...
【专利技术属性】
技术研发人员:严菲月,孟和,郑书钰,徐珂,郑煜明,韩铖潇,秦超,罗凌霄,肖璐,何川,杨凌宇,丁金梅,
申请(专利权)人:上海交通大学,
类型:发明
国别省市:上海;31
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