纤维软骨组织损伤治疗用组合物制造技术

本发明专利技术的课题在于提供新的纤维软骨组织损伤治疗用组合物。本发明专利技术提供应用于对象的纤维软骨组织损伤部的、含有褐藻酸的一价金属盐、更优选低内毒素褐藻酸的一价金属盐的纤维软骨组织损伤治疗用组合物。

Composition for the treatment of fibrocartilage injury

The subject of the invention is to provide a new composition for the treatment of fibrocartilage tissue injury. The invention provides a composition for the treatment of fibrocartilage injury, which is applied to the fibrocartilage injury part of the object, contains a monovalent metal salt of alginic acid, more preferably a monovalent metal salt of low endotoxin alginic acid.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】纤维软骨组织损伤治疗用组合物
本专利技术涉及半月板等纤维软骨组织的损伤治疗用组合物。本专利技术还涉及纤维软骨组织损伤治疗用试剂盒和纤维软骨组织损伤的治疗方法。
技术介绍
膝关节、手关节等以填补相对的关节软骨面间隔的形式具有被称作半月板(meniscus)或关节盘的组织。其中，膝关节中的半月板是位于股骨与胫骨之间的纤维组织丰富的纤维软骨。半月板具有：分散体重对关节施加的负荷的缓冲(cushion)作用；以及使关节的位置稳定，使股骨与胫骨的关节运动滑润地进行，以保护关节软骨的功能。正常的半月板是白色且均匀的半透明纤维软骨。半月板的大部分由细胞外的纤维性基质构成，混杂存在少数的软骨样细胞、纤维软骨样细胞，维持其生理功能。虽然生物化学构成与关节软骨类似，但其组成比例或分子水平的组成大不相同。在成人的正常膝半月板中，水分占湿重的70%以上。水分以外的主要成分为胶原蛋白，其占干重的60～90%，略高于关节软骨中的组成比例。胶原蛋白的90%为I型胶原蛋白。另一方面，与关节软骨相比，蛋白多糖量非常少，为关节软骨含量的1/10左右，仅为湿重的1%。即使在组成方面，半月板中存在着作为蛋白多糖单体的粘多糖侧链的硫酸皮肤素，这方面也与关节软骨不同(非专利文献1)。半月板分为外侧半月板和内侧半月板，在成人的正常膝半月板中，仅在大致边缘侧的10～30%可见血管，这部分通过血液循环汲取营养。除此以外的大部分通过关节液汲取营养。已知边缘部以外的内缘部是不存在血管的无血管区，因此几乎没有自身修复能力，特别是在形成了较大的半月板损伤的情况下，损伤部不会得到修复。另外，由于通常中老年的半月板发生变性，因此更加难以修复。半月板损伤的形态是各种各样的，例如有水平撕裂、纵向撕裂、横向撕裂、桶柄撕裂、皮瓣撕裂等。作为针对这些损伤的治疗方法，往往采用半月板切除术或者半月板缝合术。半月板切除术或缝合术是通常经常采用的治疗方法，但预期会再生的区域限于半月板外缘部的血管区，如上所述，半月板内缘部的无血管区缺乏自身修复能力，几乎不会再生。另外，通常关于高龄者(老年人)的半月板损伤，由于半月板治愈能力低，且往往伴有变性，因此认为再生能力低，且缝合术的适应减少。在变形性关节炎所并发的半月板损伤或发生了交锁(locking)的例子中，即使施行缝合术，引起再撕裂的可能性也高，因此适合进行切除整形术。另外，已撕裂的半月板有时还伴有变性，认为再生能力更低。因此，在施行切除术后，由于形成一部分半月板完全缺损的状态，所以该部位的膝关节软骨会直接接触，若经过10年～20年，则关节变性进展、在许多情况下导致关节软骨的损伤。另外，据说若采用缝合术则在血管区半月板会相对再生，但再生的部分与正常半月板相比往往力学特性差，根据陈旧例或撕裂的形态，不能缝合的情况也较多。而且，在无血管区即使通过缝合物理性地使半月板的损伤部连接，间隙也不会由于再生而填满，所以若直接施加载荷，则周围的半月板会进一步损伤。因此，对于无血管区的撕裂等，几乎不采用缝合术。另外，有时还因年龄增加或关节的过度使用导致发生软骨变性而开始磨损关节表面，从所致的变形性关节炎的初期阶段起病情进展，结果也会导致在广泛区域的软骨缺损。如此，由于关节半月板的自身修复能力不充分，所以还尝试了组合细胞或生物体组织等、或者生物适应性材料等这些物质的治疗方法等。例如可以列举：将自身半月板小薄片(細片)移植到半月板损伤部、并用筋膜包覆的治疗方法(非专利文献2)；含有约10～50重量%的平均粒径为约10～500μm的同种半月板粒子移植片和透明质酸钠、明胶、褐藻酸盐(アルギン酸塩，藻酸盐)等载体和交联剂的半月板修复组合物(专利文献1)；以使用了带有电荷的不饱和单体和电中性的不饱和单体的网眼结构的水凝胶作为基材的人工半月板(专利文献2)等。另外，还存在以下技术：对于兔半月板缺损，局部给予结合有辛伐他汀的明胶水凝胶的技术(非专利文献3)；对于山羊半月板的全层缺损，以(1)hIGF-1基因修饰的骨髓间质细胞和褐藻酸钙凝胶、(2)骨髓间质细胞和褐藻酸钙凝胶、(3)单独的褐藻酸钙凝胶、(4)对照形式进行处置看到了效果的技术(非专利文献4)等。在非专利文献4中，细胞-褐藻酸钙凝胶是通过将细胞-褐藻酸钠溶液和氯化钙同时注入到缺损而形成的。另外，所使用的褐藻酸钙凝胶的详情还不清楚，但表1中显示了：褐藻酸钙凝胶单独组没有检测到I型胶原蛋白染色的吸光度、每单位面积的纤维软骨细胞数和软骨样组织的百分比。非专利文献5中显示了：使用直径为2mm的冲头在由人得到的半月板中制作缺损，移植含有半月板纤维软骨细胞的BioMVM的海藻酸盐球体(Sphere)，在37℃、5%CO2条件下培养3天。然而，像这样使用细胞或人组织的治疗方法存在着由生物体采集细胞或正常组织的患者方面的缺点或操作繁杂的课题。另外，再生具备了损伤前的组织组成或机械强度的半月板的技术还不充分。另一方面，尝试着在软骨损伤部的透明软骨的再生中使用含有褐藻酸钠的组合物(专利文献3)。现有技术文献专利文献专利文献1：WO2011/031637；专利文献2：日本专利第4709956号；专利文献3：WO2008/102855。非专利文献非专利文献1：标准整形外科学第12版，株式会社医学书院(2015)第62页；非专利文献2：TheAmericanJournalofSportsMedicine,(2010)第38卷,No.4,第740页-第748页；非专利文献3：TheAmericanJournalofSportsMedicine,(2016)第44卷,No.7,第1735-1743页；非专利文献4：ClinOrthopRelatRes(2009)467:第3165-3174页；非专利文献5：SCIENTIFICREPORTS6:28170DOI:10.1038/srep281702016年6月。
技术实现思路
专利技术所要解决的课题在上述状况下，本专利技术的课题在于提供：用于治疗半月板等纤维软骨组织的损伤的新的组合物。另外，还提供纤维软骨组织损伤治疗用试剂盒和纤维软骨组织损伤的治疗方法。本专利技术的又一课题在于提供：即使不使用获取及操作繁杂的细胞或组织也能够以比较简便的手法进行治疗、同时能够再生与损伤前的纤维软骨组织的组成或机械强度接近的纤维软骨组织的组合物及其治疗方法。用于解决课题的手段作为半月板损伤的治疗方法，本专利技术人研究了利用生物适应性材料来填补半月板损伤部的可能性。以往，在该治疗领域中，研究了在体外制作人工半月板、再将其埋入关节内的方法，但半月板也是经常承受载荷的部位，在耐久性、功能性方面应该满足的原材料还未开发。另外，在使用这样的人工半月板的情况下，还存在着生物适应性的问题。另外，以往主要尝试了使用细胞或组织的治疗方法。本专利技术人发现了：通过将含有低内毒素褐藻酸钠的组合物应用于半月板损伤部，会促进半月板的再生。即，组织学评价、机械强度评价等结果，发现了与正常的半月板组织接近的半月板组织再生。出乎意料的是，在该治疗本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.纤维软骨组织损伤治疗用组合物，该组合物应用于对象的纤维软骨组织损伤部，在应用于纤维软骨组织损伤部时具有流动性、或者为片状或粉末状，含有褐藻酸的一价金属盐。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170302 JP 2017-0396071.纤维软骨组织损伤治疗用组合物，该组合物应用于对象的纤维软骨组织损伤部，在应用于纤维软骨组织损伤部时具有流动性、或者为片状或粉末状，含有褐藻酸的一价金属盐。


2.权利要求1所述的组合物，其中，上述褐藻酸的一价金属盐为低内毒素褐藻酸的一价金属盐。


3.权利要求1或2中任一项所述的组合物，其中，上述组合物应用于纤维软骨组织损伤部时是指上述组合物与纤维软骨组织损伤部接触时。


4.权利要求1～3中任一项所述的组合物，其中，上述具有流动性的组合物以应用于纤维软骨组织损伤部后将至少一部分固化的方式使用。


5.权利要求1～4中任一项所述的组合物，其中，通过使交联剂与上述组合物表面的至少一部分接触来进行上述具有流动性的组合物的固化。


6.权利要求1～5中任一项所述的组合物，其中，上述具有流动性的组合物的表观粘度通过使用锥板式粘度计在20℃的条件下测定为100mPa·s～30000mPa·s。


7.权利要求1～6中任一项所述的组合物，其中，上述褐藻酸的一价金属盐通过GPC-MALS法测定的重均分子量即绝对分子量为3万以上。


8.权利要求1～7中任一项所述的组合物，其中，上述具有流动性的组合物中的褐藻酸的一价金属盐的浓度为0.1w/w%～5w/w%。


9.权利要求3～8中任一项所述的组合物，其中，上述具有流动性的组合物在与上述对象的纤维软骨组织损伤部接触时不含使上述组合物固化的量的交联剂。


10.权利要求3～9中任一项所述的组合物，其中，用于使上述具有流动性的组合物固化的、该组合物与交联剂的接触是在该组合物与对象的纤维软骨组织损伤部接触后进行的。


11.权利要求1～10中任一项所述的组合物，其中，上述具有流动性的组合物在将组合物于20℃下静置1小时后具有可通过21G的注射针注入的流动性。

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【专利技术属性】
技术研发人员：近藤英司，岩崎伦政，小野寺智洋，金佑泳，河口泰之，
申请(专利权)人：持田制药株式会社，国立大学法人北海道大学，
类型：发明
国别省市：日本;JP