脂质和生育酚的综合和定量分析制造技术

技术编号:22651138 阅读:59 留言:0更新日期:2019-11-26 18:50
本文描述了通过质谱法测定样品中来自一种或多种脂质类别的一种或多种脂质种类的存在、不存在或量的方法。一种或多种脂质类选自蜡酯(WE)、角鲨烯(SQ)、三酰基甘油(TAG)、二酰基甘油(DAG)、游离脂肪酸(FFA)、胆固醇酯(CE)、胆固醇(CH)及其组合。该方法包括a)在适合于从一种或多种脂质种类中的每一种产生一种或多种可通过质谱法检测的离子的条件下使样品经受电离源;b)通过质谱法测量来自一种或多种脂质种类中的每一种的一种或多种离子的量;和c)使用测量的一种或多种离子的量来确定样品中一种或多种脂质种类中的每一种的存在、不存在或量。

Comprehensive and quantitative analysis of lipids and tocopherols

A method for the determination of the presence, absence or amount of one or more lipid species from one or more lipid classes in samples by mass spectrometry is described. One or more lipids are selected from wax ester (we), squalene (SQ), triacylglycerol (tag), diacylglycerol (DAG), free fatty acid (FFA), cholesterol ester (CE), cholesterol (CH) and combinations thereof. The method includes a) subjecting a sample to an ionization source under conditions suitable for producing one or more ions that can be detected by mass spectrometry from each of one or more lipid species; b) measuring the amount of one or more ions from each of one or more lipid species by mass spectrometry; and C) determining one or more ions in a sample using the amount of one or more ions measured The presence, absence, or amount of each of the lipid species.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】脂质和生育酚的综合和定量分析相关申请的交叉引用本申请要求2017年3月31日提交的美国临时专利申请No.62/479,534、2017年5月31日提交的美国临时专利申请No.62/512,776、2017年9月14日提交的美国临时专利申请No.62/558,415、2017年11月30日提交的美国临时专利申请No.62/592,639的权益,其全部内容通过引用并入本文。背景提供以下用于描述本专利技术背景的信息以帮助理解本专利技术,并且不承认其构成或描述本专利技术的现有技术。皮脂是由脂质细胞(皮脂腺的特化细胞)产生的富含脂质的分泌物。在人体中,皮脂覆盖皮肤表面,并有助于抗菌防御、保水、光保护和伤口愈合。皮脂脂质组(lipidome)由脂质的复杂混合物组成。皮脂脂质组合物在物种之间不同,可能是由于各种功能要求。人体皮脂脂质不仅包括游离脂肪酸(FFA)、胆固醇(CH)、胆固醇基/胆固醇酯(CE)和二酰基甘油酯和三酰基甘油(DAG和TAG),还包括皮脂独有的蜡酯(WE)和角鲨烯(SQ)。除了这些脂质外,皮脂还含有脂溶性分子,如生育酚。皮脂表征已经涉及薄层色谱以分离脂质类别,然后在不鉴定个体脂质种类的情况下测定每个类别中的大部分脂肪酸组成(Stewart等人,JInvestDermatol.1986;87(6):733-6)。最近,结合液相色谱(LC)和质谱(MS)的方法已被用于表征皮脂脂质(Camera等人,JLipidRes.2010;51(11);3377-88),但这些方法仅报告了总和组成并不鉴定脂质种类的脂肪酸组成。此外,这些方法仅提供相对定量,并且皮脂脂质组的脂肪酸组成不能跨脂质类别进行定量。此外,该方法需要预先分离或纯化步骤。在这里,我们提出了同时鉴定皮脂中主要脂质种类的脂肪酸组成和测量这些分子和脂溶性生育酚的绝对浓度的方法。本文描述了用于检测和定量皮脂样品中的脂质和生育酚的方法和测定。概述在本专利技术的第一方面,一种通过质谱法测定样品中来自选自蜡酯(WE)、角鲨烯(SQ)、三酰基甘油(TAG)、二酰基甘油(DAG)、游离脂肪酸(FFA)、胆固醇酯(CE)、胆固醇(CH)及其组合的一种或多种脂质类别的一种或多种脂质的存在、不存在或量的方法包括多个步骤。这些步骤包括在适于从一种或多种脂质种类中的每一种产生一种或多种可通过质谱法检测的离子的条件下使样品经受电离源;通过质谱法测量来自一种或多种脂质种类中的每一种的一种或多种离子的量;和使用测量的一种或多种离子的量来确定样品中一种或多种脂质种类中的每一种的存在、不存在或量。在本专利技术的第二方面,通过质谱法测定样品中一种或多种脂质种类和一种或多种生育酚的存在、不存在或量的方法包括多个步骤。所述一种或多种脂质种类来自一种或多种脂质类别,其选自蜡酯(WE)、角鲨烯(SQ)、三酰基甘油(TAG)、二酰基甘油(DAG)、游离脂肪酸(FFA)、胆固醇酯(CE)、胆固醇(CH)、生育酚(TOC)及其组合。一种或多种生育酚选自α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和δ-生育酚及其组合。所述步骤包括在适于从一种或多种脂质种类和一种或多种生育酚中的每一种产生一种或多种可通过质谱法检测的离子的条件下使样品经受电离源;通过质谱法测量来自一种或多种脂质种类和一种或多种生育酚中的每一种的一种或多种离子的量;和使用测量的一种或多种离子的量来确定样品中一种或多种脂质种类和一种或多种生育酚中的每一种的存在、不存在或量。在第一和第二方面的特征中,一种或多种脂质类别包括蜡酯(WE)、三酰基甘油(TAG)、二酰基甘油(DAG)、胆固醇酯(CE)或其组合,并且所述方法还包括测定一种或多种脂质种类的一种或多种脂肪酸的碳和双键的数量。在另一个特征中,样品是皮脂样品或皮脂细胞样品。在又一个特征中,来自一种或多种脂质类别的一种或多种脂质种类的存在、不存在或量是从单次注射确定的。在进一步的特征中,来自一种或多种脂质类别的一种或多种脂质种类包括蜡酯,并且该方法还包括测定蜡酯的脂肪醇组成。在更进一步的特征中,来自一种或多种脂质类别的一种或多种脂质种类包括二酰基甘油,并且该方法还包括测定二酰基甘油的两种脂肪酸的碳和双键的数量。在另外的特征中,测定来自至少两种脂质类别的一种或多种脂质种类的量。关于该特征,至少两种脂质类别包括角鲨烯和蜡酯。进一步关于该特征,至少两种脂质类别包括角鲨烯和二酰基甘油。更进一步关于该特征,至少两种脂质类别包括角鲨烯和三酰基甘油、角鲨烯和游离脂肪酸、角鲨烯和胆固醇酯、角鲨烯和胆固醇、蜡酯和三酰基甘油、蜡酯和二酰基甘油、蜡酯和游离脂肪酸、蜡酯和胆固醇酯、或蜡酯和胆固醇。在进一步的特征中,测定来自三种或更多种、四种或更多种、五种或更多种、或六种或更多种脂质类别的一种或多种脂质种类的量。在另一个特征中,测定来自脂质类别CH、CE、WE、SQ、TAG、DAG和FFA的每一种的一种或多种脂质种类的量。在又一个特征中,测定选自CH、CE、WE、SQ、TAG、DAG和FFA的一种或多种脂质种类的量,和测定选自α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和δ-生育酚的一种或多种TOC种类的量。在更进一步的特征中,测定20种或更多种脂质种类的量。在另一个特征中,使用一种或多种内标来测定样品中一种或多种脂质种类的量。关于该特征,一种或多种内标选自一种或多种脂质类别,其选自蜡酯(WE)、角鲨烯(SQ)、三酰基甘油酯(TAG)、二酰基甘油(DAG)、游离脂肪酸(FFA)、胆固醇酯(CE)及其组合。进一步关于该特征,一种或多种内标选自脂质类别蜡酯(WE),并且内标选自WE(FA19:1/OH8:0)和WE(FA17:1/OH8:0)。另外,关于该特征,一种或多种内标中的至少一种是同位素标记的。在另一个特征中,样品是皮脂样品并使用皮脂带、拭子或滤纸收集。在进一步的特征中,该方法还包括测定胆固醇的量。在另一个特征中,该方法还包括测定样品中一种或多种脂肪酸异构体的存在、不存在或量。在又一个特征中,将样品直接注入质谱仪而无需预先分离或纯化步骤。在本专利技术的另一个方面,试剂盒包含针对选自蜡酯(WE)、角鲨烯(SQ)、三酰基甘油酯(TAG)、二酰基甘油(DAG)、游离脂肪酸(FFA)、胆固醇(CH)、胆固醇酯(CE)及其组合的一种或多种脂质类别中的每一种的一种或多种内标,以及包装材料和使用该试剂盒的说明书。在该方面的特征中,一种或多种内标中的至少一种是同位素标记的。在本专利技术的进一步的方面,试剂盒包含针对选自蜡酯(WE)、角鲨烯(SQ)、三酰基甘油酯(TAG)、二酰基甘油(DAG)、游离脂肪酸(FFA)、胆固醇(CH)、胆固醇酯(CE)及其组合的一种或多种脂质类别中的每一种和针对选自α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和δ-生育酚及其组合的一种或多种生育酚(TOC)中的每一种的一种或多种内标,以及包装材料和使用该试剂盒的说明书。在该方面的特征中,一种或多种内标中的至少一种是同位素标记的。在本专利技术的另外的方面,一种通过质谱法测定样品中选自角鲨烯(SQ)、游离脂肪酸(FFA)、复合脂质及其组合的一种或多种脂质种类本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种通过质谱法测定样品中来自一种或多种脂质类别的一种或多种脂质种类的存在、不存在或量的方法,其中所述一种或多种脂质类别选自蜡酯(WE)、角鲨烯(SQ)、三酰基甘油(TAG)、二酰基甘油(DAG)、游离脂肪酸(FFA)、胆固醇酯(CE)、胆固醇(CH)及其组合,所述方法包括:/na)在适于从一种或多种脂质种类中的每一种产生一种或多种可通过质谱法检测的离子的条件下使样品经受电离源;/nb)通过质谱法测量来自一种或多种脂质种类中的每一种的一种或多种离子的量;和/nc)使用测量的一种或多种离子的量来确定样品中一种或多种脂质种类中的每一种的存在、不存在或量。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170331 US 62/479,534;20170531 US 62/512,776;20171.一种通过质谱法测定样品中来自一种或多种脂质类别的一种或多种脂质种类的存在、不存在或量的方法,其中所述一种或多种脂质类别选自蜡酯(WE)、角鲨烯(SQ)、三酰基甘油(TAG)、二酰基甘油(DAG)、游离脂肪酸(FFA)、胆固醇酯(CE)、胆固醇(CH)及其组合,所述方法包括:
a)在适于从一种或多种脂质种类中的每一种产生一种或多种可通过质谱法检测的离子的条件下使样品经受电离源;
b)通过质谱法测量来自一种或多种脂质种类中的每一种的一种或多种离子的量;和
c)使用测量的一种或多种离子的量来确定样品中一种或多种脂质种类中的每一种的存在、不存在或量。


2.一种通过质谱法测定样品中的以下物质的存在、不存在或量的方法:
来自一种或多种脂质类别的一种或多种脂质种类,其中所述一种或多种脂质类别选自蜡酯(WE)、角鲨烯(SQ)、三酰基甘油(TAG)、二酰基甘油(DAG)、游离脂肪酸(FFA)、胆固醇酯(CE)、胆固醇(CH)及其组合;和
选自α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和δ-生育酚及其组合的一种或多种生育酚,
所述方法包括:
a)在适于从一种或多种脂质种类和一种或多种生育酚中的每一种产生一种或多种可通过质谱法检测的离子的条件下使样品经受电离源;
b)通过质谱法测量来自一种或多种脂质种类和一种或多种生育酚中的每一种的一种或多种离子的量;和
c)使用测量的一种或多种离子的量来确定样品中一种或多种脂质种类和一种或多种生育酚中的每一种的存在、不存在或量。


3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法,其中所述一种或多种脂质类别包括蜡酯(WE)、三酰基甘油(TAG)、二酰基甘油(DAG)、胆固醇酯(CE)或其组合,并且所述方法还包括测定一种或多种脂质种类的一种或多种脂肪酸的碳和双键的数量。


4.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述样品是皮脂样品或皮脂细胞样品。


5.根据权利要求1所述的方法,其中来自一种或多种脂质类别的一种或多种脂质种类的存在、不存在或量是从单次注射测定的。


6.根据权利要求2所述的方法,其中来自一种或多种脂质类别的一种或多种脂质种类的存在、不存在或量以及一种或多种生育酚的存在、不存在或量是从单次注射测定的。


7.根据权利要求1、2或3所述的方法,其中来自一种或多种脂质类别的一种或多种脂质种类包括蜡酯,并且所述方法还包括测定蜡酯的脂肪醇组成。


8.根据权利要求1、2或3中任一项所述的方法,其中来自一种或多种脂质类别的一种或多种脂质种类包括二酰基甘油,并且所述方法还包括测定二酰基甘油的两种脂肪酸的碳和双键的数量。


9.根据权利要求1、2、3、7或8中任一项所述的方法,其中测定来自至少两种脂质类别的一种或多种脂质种类的量。


10.根据权利要求9所述的方法,其中所述至少两种脂质类别包括角鲨烯和蜡酯。


11.根据权利要求9所述的方法,其中所述至少两种脂质类别包括角鲨烯和二酰基甘油。


12.根据权利要求9所述的方法,其中所述至少两种脂质类别包括角鲨烯和三酰基甘油。


13.根据权利要求9所述的方法,其中所述至少两种脂质类别包括角鲨烯和游离脂肪酸。


14.根据权利要求9所述的方法,其中所述至少两种脂质类别包括角鲨烯和胆固醇酯。


15.根据权利要求9所述的方法,其中所述至少两种脂质类别包括角鲨烯和胆固醇。


16.根据权利要求9所述的方法,其中所述至少两种脂质类别包括蜡酯和三酰基甘油。


17.根据权利要求9所述的方法,其中所述至少两种脂质类别包括蜡酯和二酰基甘油。


18.根据权利要求9所述的方法,其中所述至少两种脂质类别包括蜡酯和游离脂肪酸。


19.根据权利要求9所述的方法,其中所述至少两种脂质类别包括蜡酯和胆固醇酯。


20.根据权利要求9所述的方法,其中所述至少两种脂质类别包括蜡酯和胆固醇。


21.根据权利要求1、2、3、7或8中任一项所述的方法,其中测定来自三种或更多种脂质类别的一种或多种脂质种类的量。


22.根据权利要求1、2、3、7或8中任一项所述的方法,其中测定来自四种或更多种脂质类别的一种或多种脂质种类的量。


23.根据权利要求1、2、3、7或8中任一项所述的方法,其中测定来自五种或更多种脂质类别的一种或多种脂质种类的量。


24.根据权利要求1、2、3、7或8中任一项所述的方法,其中测定来自六种或更多种脂质类别的一种或多种脂质种类的量。


25.根据权利要求1、2、3、7或8中任一项所述的方法,其中测定来自脂质类别...

【专利技术属性】
技术研发人员:E·弗赖克曼A·M·伊万斯K·古德曼R·J·罗宾逊
申请(专利权)人:梅塔博隆股份有限公司
类型:发明
国别省市:美国;US

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1
相关领域技术
  • 暂无相关专利