免疫调节剂、疫苗、细胞及应用制造技术

本发明专利技术公开免疫调节剂、疫苗、细胞及应用。本发明专利技术的免疫调节剂包含(a)能够与其受体结合的IL‑15或其编码核酸；(b)IL‑15受体alpha或其编码核酸；和(c)含TGF beta受体3蛋白胞外结构域的多肽或其编码核酸。本发明专利技术的免疫调节剂一方面能够与TGF‑beta结合，解除TGF‑beta对T细胞功能和DC细胞的抗原呈递的抑制作用；另一方面，IL‑15‑IL‑15Ra能够调节T细胞和NK细胞的活化和增殖，还能促进DC细胞致敏T细胞的能力，诱导出更强的抗肿瘤的特异T细胞应答，表现出比传统的DC疫苗更强的抗肿瘤效果。

Immunomodulators, vaccines, cells and Applications

The invention discloses immunomodulator, vaccine, cell and application. The immunomodulator of the present invention includes (a) IL-15 or its encoded nucleic acid which can bind to its receptor; (b) IL-15 receptor alpha or its encoded nucleic acid; and (c) polypeptide containing the extracellular domain of TGF beta receptor 3 protein or its encoded nucleic acid. On the one hand, the immunomodulator of the invention can combine with TGF \u2011 beta to release the inhibitory effect of TGF \u2011 beta on T cell function and antigen presentation of DC cells; on the other hand, IL \u2011 15 \u2011 IL \u2011 15ra can regulate the activation and proliferation of T cells and NK cells, promote the sensitization ability of DC cells to T cells, induce stronger specific T cell response against tumor, and show better performance than traditional DC epidemic The vaccine has stronger antitumor effect.

【技术实现步骤摘要】
免疫调节剂、疫苗、细胞及应用
本专利技术涉及医药制品，具体涉及免疫调节剂、疫苗、细胞和提高淋巴细胞群中TNF-a+和/或IFN-r+细胞的比例的方法。
技术介绍
机体的免疫反应首先是由抗原递呈细胞(APC)捕获抗原，经过加工和处理后将抗原信息递呈给淋巴细胞，继而引发一系列的特异性免疫应答。树突状细胞(DC)是目前认为的功能最强的APC，其最大的特点是能够刺激初始型T细胞的增殖和活化，是启动、调控并维持特异性免疫应答的中心环节。在机体抗肿瘤免疫中，由T细胞介导的细胞免疫发挥着重要作用。研究发现，肿瘤患者存在DC数量减少及功能缺陷的特点，肿瘤组织及其周围浸润DC的数量、功能与肿瘤的发生、发展、转移、预后有着密切的关系。DC密集浸润的肿瘤分化程度高，预后较好；而DC轻度浸润的肿瘤常伴有分化程度低和恶性进展。肿瘤细胞具有较高水平的Fas表达，能诱导FasL表达的淋巴细胞凋亡，并能分泌TGF-β、IL-10等免疫抑制性细胞因子，导致抗原提呈能力下降，从而逃避免疫攻击。近年来，已经清楚了免疫系统确实识别肿瘤抗原，但是尽管存在肿瘤抗原，T细胞却保持静止状态。对此有观点认为：患者体内的抗原呈递细胞，不能正确识别肿瘤抗原，将之呈递给T淋巴细胞，引起肿瘤特异的免疫应答。近年来，如何增加抗原呈递细胞的数量，提高抗原呈递细胞，特别是DC细胞摄取、转运、呈递抗原、刺激T细胞的能力，是目前肿瘤免疫研究中的一个重点。转化生长因子-β(TGF-β)是一种多功能的细胞因子，可以影响细胞的生长、分化、凋亡等。此外，TGF-β还有重要的免疫调节作用。TGF-β可以有效的抑制T细胞功能和DC细胞的抗原呈递能力。最近的研究已经阐明了TGF-β在上调浆细胞样DC免疫调节酶吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)表达中的直接作用，并导致长期的T细胞耐受。通过催化必需氨基酸色氨酸的降解，IDO抑制效应T细胞的活性和促进Treg分化和活化。转化生长因子-β(TGF-β)通过结合转化生长因子-β受体(TGFBR)复合物而进行信号转导。根据分子结构和功能特征的不同，TGFBR家族包括I型受体(TGFBR1)、II型受体(TGFBR2)和III型受体(TGFBR3)。TGFBR1/2均属于跨膜型受体丝氨酸/苏氨酸激酶家族，胞内均含有丝氨酸/苏氨酸激酶区。转化生长因子-β与TGFBR1/2异源二聚体结合后，活化下游信号分子，进而激活信号传导。TGFBR3胞内段不含有激酶活性区，不直接参与信号传导，主要是调节TGF-β与信号受体的结合，又被称为协同受体。近年来，DC肿瘤疫苗在肿瘤的预防和治疗中方面展现了较好的应用前景。DC相关疫苗在前列腺癌中的研究较为深入。如Sipuleucel-T直接将前列腺癌酸性磷酸酶抗原转染DC激发机体产生特异性的抗肿瘤反应。IMPACT研究显示，尽管客观有效率评价显示治疗效果有限(<5％),Sipuleucel-T组的中位生存时间(25.8个月)要高于对照组(21.7个月)4.1个月。2010年4月，美国FDA批准Sipuleucel-T用于治疗无症状或症状轻微的转移性去势治疗无效的难治性前列腺癌(CRPC)。在胶质瘤中，负载自体肿瘤裂解物的DC疫苗DC-VAX-L尚在进行III期临床试验中。有电穿孔法将自体肾脏肿瘤的RNA和CD40LmRNA电转到DC的肿瘤疫苗，与靶向药物舒尼替尼联用的报道，目前也在临床试验中。近期的研究发现，DC疫苗能显著延长患者生存期。目前有大量的使用负载了抗原的DC疫苗治疗肿瘤的报道，从目前报道的数据来看，DC疫苗似乎代表了一种用于改善的肿瘤免疫治疗的新的非常有潜力的方法。然而，单独的DC疫苗的使用通常不能导致所期待的免疫治疗效果的改善，不能得到令人满意的临床效果。目前的临床实验表明，DC治疗性疫苗的应答率很少超过15％，总体应答率偏低。
技术实现思路
为解决现有技术中的至少部分技术问题，本专利技术在深入研究后发现了一种可协同增强或提高疫苗的免疫力的免疫调节剂。至少部分地基于此完成了本专利技术。具体地，本专利技术包括以下内容。本专利技术的第一方面，提供一种免疫调节剂，所述免疫调节剂包含(a)-(c)三种成分：(a)能够与其受体结合的IL-15或其编码核酸；(b)IL-15受体alpha或其编码核酸；和(c)含TGFbeta受体3蛋白胞外结构域的多肽或其编码核酸。在某些实施方案中，所述(a)为IL-15的编码核酸，其具有SEQIDNO:1所示的序列。在某些实施方案中，所述(b)为IL-15受体alpha的编码核酸，其具有SEQIDNO:2所示的序列。在某些实施方案中，所述(a)和(b)通过化学键连接形成一个分子。在某些实施方案中，所述(c)成分的多肽进一步包括免疫球蛋白的Fc片段。在某些实施方案中，所述(c)为多肽的编码核酸，其具有SEQIDNO:3所示的序列。本专利技术的第二方面，提供一种疫苗，其包含至少一种抗原或其编码核酸，和第一方面的免疫调节剂。在某些实施方案中，所述抗原为肿瘤抗原或病原体抗原。本专利技术的第三方面，提供一种细胞，其包含(a’)IL-15的编码核酸、(b’)IL-15受体alpha的编码核酸和(c’)含TGFbeta受体3蛋白胞外结构域的多肽的编码核酸。本专利技术的第四方面，提供一种提高淋巴细胞群中TNF-a+和/或IFN-r+细胞的比例的方法，其包括使第一方面的免疫调节剂或第二方面的疫苗作用于所述淋巴细胞群的步骤。本专利技术的免疫调节剂一方面能够与TGF-beta结合，解除TGF-beta对T细胞功能和DC细胞的抗原呈递的抑制作用；另一方面，IL-15-IL-15Ra能够调节T细胞和NK细胞的活化和增殖，还能促进DC细胞致敏T细胞的能力，诱导出更强的抗肿瘤的特异T细胞应答，表现出比传统的DC疫苗更强的抗肿瘤效果。本专利技术的免疫调节剂成分之间协同作用，大大增强疫苗的免疫力，可以提供免于病原体感染的保护性免疫，特别是可用于增强预防和/或者治疗多种肿瘤的效果。附图说明图1CD8阳性T细胞应答结果。每组柱中从左向右侧依次为CD8IFN-r+，CD8IFN-r+TNF-a+，CD8TNF-a+。图2CD4阳性T细胞应答结果。具体实施方式现详细说明本专利技术的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本专利技术的限制，而应理解为是对本专利技术的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。应理解本专利技术中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本专利技术。另外，对于本专利技术中的数值范围，应理解为具体公开了该范围的上限和下限以及它们之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本专利技术内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本专利技术所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本专利技术仅描述了优选的方法和材料，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种免疫调节剂，其特征在于，所述免疫调节剂包含(a)-(c)三种成分：/n(a)IL-15或其编码核酸；/n(b)IL-15受体alpha或其编码核酸；和/n(c)含TGF beta受体3蛋白胞外结构域的多肽或其编码核酸。/n

【技术特征摘要】
1.一种免疫调节剂，其特征在于，所述免疫调节剂包含(a)-(c)三种成分：
(a)IL-15或其编码核酸；
(b)IL-15受体alpha或其编码核酸；和
(c)含TGFbeta受体3蛋白胞外结构域的多肽或其编码核酸。


2.根据权利要求1所述的免疫调节剂，其特征在于，所述(a)为IL-15的编码核酸，其具有SEQIDNO:1所示的序列。


3.根据权利要求2所述的免疫调节剂，其特征在于，所述(b)为IL-15受体alpha的编码核酸，其具有SEQIDNO:2所示的序列。


4.根据权利要求3所述的免疫调节剂，其特征在于，所述(a)和(b)通过化学键连接形成一个分子。


5.根据权利要求1所述的免疫调节剂，其特征在于，所述(c)成分的多肽进一步包括免疫球蛋白的...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋俊，林鑫，其他发明人请求不公开姓名，
申请(专利权)人：启辰生生物科技珠海有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44