The invention relates to a multiplex fluorescent quantitative PCR kit for detection of 19 kinds of human respiratory viruses, which comprises a PCR amplification kit and a reference kit, and the PCR amplification kit comprises a rvd19 amplification solution 1 \u00d7 18 \u00d7 10. The kit of the invention adopts 8-hole joint detection method, each hole contains three fluorescent channels, each channel corresponds to a pathogen, which can qualitatively detect 19 viruses of human respiratory tract at the same time. It is the most comprehensive detection method for pathogens of viral respiratory tract infection at present, which can comprehensively judge pathogens of viral respiratory tract infection and provide laboratory auxiliary diagnosis for clinical examination The basis of the break.
【技术实现步骤摘要】
用于19种人呼吸道病毒检测的多重荧光定量PCR试剂盒
本专利技术涉及生物
，具体涉及一种用于19种人呼吸道病毒检测和区分的多重荧光定量PCR试剂盒，以及该试剂盒的检测方法。
技术介绍
病毒性呼吸道感染分为病毒性上呼吸道感染和病毒性下呼吸道感染，前者表现为急性鼻炎、咽炎和喉炎，后者表现为急性气管炎、支气管炎和肺炎。本类疾病发病率高，人群普遍易染，小儿、老人、营养不良及患有慢性病者更易患病。以冬春季发病较多。该病四季、任何年龄均可发病，通过含有病毒的飞沫、雾滴，或经污染的用具进行传播。常于机体抵抗力降低时，如受寒、劳累、淋雨等情况，原已存在或由外界侵入的病毒或细菌，迅速生长繁殖，导致感染，一般5-7天痊愈。常继发支气管炎、肺炎、副鼻窦炎，少数人可并发急性心肌炎、肾炎、风湿热等。呼吸道感染是世界范围内低龄儿童（<5岁）死亡的首位原因，每年可造成约5百万儿童死亡。儿童上呼吸道感染的患病次数平均为3-8次/年，下呼吸道感染率比URTI低，在1岁儿童中感染的比例约1-3%，学龄儿童至5-10%。呼吸道感染的症状相似，主要表现为感冒的典型症状，但感染病原学复杂，包括细菌、病毒、支原体、衣原体、真菌等，其中80%以上是病毒性的。呼吸道病毒习惯上是指侵害呼吸道的病毒，至少涉及到8个科，200多种型别的病毒。其中主要包括甲型流感病毒、乙型流感病毒、人副流感病毒Ⅰ型、人副流感病毒Ⅱ型、人副流感病毒Ⅲ型、人腺病毒、人呼吸道合胞病毒、人冠状病毒229E组、人冠状病毒OC43组、人冠状病毒NL63组、人冠状病毒HKUI组、人...
【技术保护点】
1.一种用于19种人呼吸道病毒检测的多重荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，包括PCR扩增试剂盒和参考品试剂盒，所述PCR扩增试剂盒包括19种人呼吸道病毒的RVD19扩增液1#-8#，所述RVD19扩增液1#-8#包括：RVD19扩增液1#：IAV引物探针、HCoV-NL63引物探针、内标引物探针，RVD19扩增液2#：HADV引物探针、HPIVⅡ引物探针、内标引物探针，RVD19扩增液3#：HCoV-OC43引物探针、HBoV引物探针、内标引物探针，RVD19扩增液4#：HPIVⅠ引物探针、HRV引物探针、内标引物探针，RVD19扩增液5#：HRSV引物探针、CP引物探针、MP引物探针、内标引物探针，RVD19扩增液6#：HCoV-229E引物探针、HMPV引物探针、IBV引物探针、内标引物探针，RVD19扩增液7#：HPIVⅢ引物探针、MeV引物探针、RV引物探针、内标引物探针，RVD19扩增液8#：MuV引物探针、HCoV-HKU1引物探针、内标引物探针；其中，19种人呼吸道病毒的引物、探针序列如下：/nMP：/n上游引物：SEQ ID NO:1/n下游引物：SEQ ID NO:2...
【技术特征摘要】
1.一种用于19种人呼吸道病毒检测的多重荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，包括PCR扩增试剂盒和参考品试剂盒，所述PCR扩增试剂盒包括19种人呼吸道病毒的RVD19扩增液1#-8#，所述RVD19扩增液1#-8#包括：RVD19扩增液1#：IAV引物探针、HCoV-NL63引物探针、内标引物探针，RVD19扩增液2#：HADV引物探针、HPIVⅡ引物探针、内标引物探针，RVD19扩增液3#：HCoV-OC43引物探针、HBoV引物探针、内标引物探针，RVD19扩增液4#：HPIVⅠ引物探针、HRV引物探针、内标引物探针，RVD19扩增液5#：HRSV引物探针、CP引物探针、MP引物探针、内标引物探针，RVD19扩增液6#：HCoV-229E引物探针、HMPV引物探针、IBV引物探针、内标引物探针，RVD19扩增液7#：HPIVⅢ引物探针、MeV引物探针、RV引物探针、内标引物探针，RVD19扩增液8#：MuV引物探针、HCoV-HKU1引物探针、内标引物探针；其中，19种人呼吸道病毒的引物、探针序列如下：
MP：
上游引物：SEQIDNO:1
下游引物：SEQIDNO:2
探针：ROX-SEQIDNO:3-BHQ2
CP：
上游引物：SEQIDNO:4
下游引物：SEQIDNO:5
探针：HEX-SEQIDNO:6-BHQ1
IAV：
上游引物：SEQIDNO:7
下游引物：SEQIDNO:8
探针：FAM-SEQIDNO:9-BHQ1
IBV：
上游引物：SEQIDNO:10
下游引物：SEQIDNO:11
探针：ROX-SEQIDNO:12-BHQ2
HPIVⅠ：
上游引物：SEQIDNO:13
下游引物：SEQIDNO:14
探针：FAM-SEQIDNO:15-BHQ1
HPIVⅡ：
上游引物：SEQIDNO:16
下游引物：SEQIDNO:17
探针：ROX-SEQIDNO:18-BHQ2
HPIVⅢ：
上游引物：SEQIDNO:19
下游引物：SEQIDNO:20
探针：FAM-SEQIDNO:21-BHQ1
HADV：
上游引物：SEQIDNO:22
下游引物：SEQIDNO:23
探针：FAM-SEQIDNO:24-BHQ1
HRSV：
上游引物：SEQIDNO:25
下游引物：SEQIDNO:26
探针：FAM-SEQIDNO:27-BHQ1
HCoV-229E：
上游引物：SEQIDNO:28
下游引物：SEQIDNO:29
探针：FAM-SEQIDNO:30-BHQ1
HCoV-OC43：
上游引物：SEQIDNO:31
下游引物：SEQIDNO:32
探针：FAM-SEQIDNO:33-BHQ1
HCoV-NL63：
上游引物：SEQIDNO:34
下游引物：SEQIDNO:35
探针：ROX-SEQIDNO:36-BHQ2
HCoV-HKU1：
上游引物：SEQIDNO:37
下游引物：SEQIDNO:38
探针：HEX-SEQIDNO:39-BH...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈泽斌，王伟毅，魏超，魏劭，
申请(专利权)人：厦门安普利生物工程有限公司，南京安浦精准医学检验有限公司，
类型：发明
国别省市：福建;35
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