一种“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法技术

本发明专利技术公开了一种“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法，包括“黄芩加味消毒饮”提取物中野菊花的薄层色谱鉴别方法，野菊花的薄层色谱鉴别方法步骤包括：蒙花苷对照品溶液的配制；野菊花对照药材溶液和供试药材溶液制备；黄芩加味消毒饮供试样液的配制：取本品，加甲醇超声处理，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水溶解，用乙酸乙酯萃取2~3次，合并萃取液，水浴蒸干，残渣加甲醇使溶解；野菊花阴性对照溶液的制备；薄层层析检查。“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法还包括黄芩和山银花的薄层色谱鉴别方法。本发明专利技术中的检测方法为产品提供可靠、准确且操作简单的质量控制方法，确保产品的质量和疗效，保证患者用药安全。

A TLC method for the determination of the extract of \Huangqin Jiawei Xiaoxiao drink\

The invention discloses a thin-layer chromatography detection method for the extract of Huangqin Jiawei Xiaoxiao drink, which includes the thin-layer chromatography identification method for the wild chrysanthemum in the extract of Huangqin Jiawei Xiaoxiao drink. The thin-layer chromatography identification method steps of the wild chrysanthemum include: preparation of the reference solution of smectin; preparation of the reference and test medicinal solutions of wild chrysanthemum; preparation of the sample of Huangqin Jiawei Xiaoxiao drink Liquid preparation: take this product, add methanol for ultrasonic treatment, cool it down, filter it, evaporate the filtrate, dissolve the residue with water, extract it with ethyl acetate for 2-3 times, combine the extraction liquid, evaporate it in water bath, dissolve the residue with methanol; prepare negative control solution of Chrysanthemum indicum; check by TLC. The TLC detection method of the extract of Huangqin Jiawei Xiaoxiao drink also includes the TLC identification method of Huangqin and shanyinhua. The detection method in the invention provides a reliable, accurate and simple quality control method for the product, ensures the quality and efficacy of the product, and ensures the medication safety of the patient.

【技术实现步骤摘要】
一种“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法
本专利技术属于中药质量检测
领域，特别涉及一种“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法。
技术介绍
五味消毒饮方出自清代吴谦编纂的《医宗金鉴》，处方由金银花、野菊花、蒲公英、紫花地丁、天葵子等五味药材组成，作为传统中药方剂在我国已有数百年的应用历史，为中医治疗疮疔痈肿的常用方剂。随着人们对该方剂的认识加深，近代该方剂及其加减方广泛应用于急性咽炎、扁桃体炎、严重外耳道疖肿等耳鼻喉科感染，眼科的麦粒肿、复发性单纯疱疹性角膜炎、色素膜炎等，外科的体表化脓性疾病、颌面部蜂窝织炎、痤疮等，生殖泌尿科的热淋症、前列腺综合症、老年泌尿系感染等；妇科的慢性盆腔炎、淋菌性阴道炎、带下等，内科治疗疥疮感染性肾炎、急性肾小球肾炎、急性泌尿道感染、大叶性肺炎、上呼吸道感染等。在研究应用五味消毒饮临床应用经验的基础上，本专利技术人创制了黄芩加味消毒饮，该方剂组方如下：黄芩、山银花、栀子、野菊花、蒲公英、紫花地丁、薄荷脑。通过多年的应用实践，证明该方剂对急性咽炎、扁桃体炎等上呼吸道感染，对外科的体表化脓性疾病、蜂窝织炎、痤疮等，男性科的前列腺炎等有非常好的疗效，且未见毒副反应。专利技术人根据临床组方，将组方药材通过科学方法提取，制成便于病人服用和携带的现代口服制剂(如胶囊剂、片剂)，为控制这些制剂的质量，保证临床用药的安全、有效，特建立了黄芩加味消毒饮药材提取物中黄芩、山银花、野菊花的薄层色谱鉴别方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法，以便更好的控制该制剂的质量，保证临床用药的安全、有效。为实现上述目的，本专利技术提供了一种“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法，包括“黄芩加味消毒饮”提取物中野菊花的薄层色谱鉴别方法，所述野菊花的薄层色谱鉴别方法，包括如下步骤：A1.蒙花苷对照品溶液的配制：精密称取蒙花苷对照品，加甲醇制成浓度为0.5～1mg/ml的蒙花苷对照品溶液；A2.野菊花对照药材溶液的制备：取野菊花对照药材0.2～0.4g，加甲醇10～20ml，超声处理30～40min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加3～6.5ml甲醇使溶解，作为对照药材溶液；A3.野菊花供试药材溶液的制备：取野菊花供试药材0.5～0.7g，加甲醇10～20ml，超声处理30～40min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加4～6ml甲醇使溶解，作为供试药材溶液；A4.黄芩加味消毒饮供试样液的配制：取本品1～3g，加甲醇10～20ml，超声处理30～40min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加5～15ml水溶解，用乙酸乙酯萃取2～3次，合并萃取液，水浴蒸干，残渣加1～3ml甲醇使溶解，作为黄芩加味消毒饮供试样液；A5.野菊花阴性对照溶液的制备：取野菊花阴性“黄芩加味消毒饮”提取物1～3g，加甲醇10～20ml，超声处理30～40min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加5～15ml水溶解，用乙酸乙酯萃取2～3次，合并萃取液，水浴蒸干，残渣加1～3ml甲醇使溶解，作为阴性对照溶液；A6.薄层层析检查：照《中国药典》薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μL，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以体积比15:15:6:4:1的乙酸乙酯-丁酮-三氯甲烷-甲酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝溶液，热风吹干，置365nm波长的紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。优选的，上述野菊花的薄层色谱鉴别方法中，步骤A2中取野菊花对照药材0.3g，加甲醇15ml，超声处理30min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加5ml甲醇使溶解；步骤A3中取野菊花供试药材0.6g，加甲醇15ml，超声处理30min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加5ml甲醇使溶解；步骤A4中取本品2g，加15ml甲醇，超声处理30min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加10ml水溶解，用乙酸乙酯萃取2次，每次10ml，合并萃取液，水浴蒸干，残渣加2ml甲醇使溶解；步骤A5中取野菊花阴性“黄芩加味消毒饮”提取物2g，加甲醇15ml，超声处理30min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加10ml水溶解，用乙酸乙酯萃取2次，每次10ml，合并萃取液，水浴蒸干，残渣加2ml甲醇使溶解。进一步，“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法还包括黄芩的薄层色谱鉴别方法，所述黄芩的薄层色谱鉴别方法包括如下步骤：B1.黄芩素、汉黄芩素混合对照品溶液的配制：分别精密称取黄芩素对照品和汉黄芩素对照品，加甲醇制成浓度为0.5～1mg/ml的黄芩素对照品和0.5～1mg/ml的汉黄芩素对照品混合溶液；B2.黄芩对照药材溶液的制备：取黄芩对照药材0.8～1.2g，加体积比为0.8～3.0:0.5～2.0的乙酸乙酯-甲醇混合溶液25～35ml，加热回流30～60min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加4～6ml甲醇使溶解作为对照药材溶液；B3.黄芩供试药材溶液的制备：取黄芩供试药材0.8～1.2g，加体积比为0.8～3.0:0.5～2.0的乙酸乙酯-甲醇的混合溶液25～35ml，加热回流30～60min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加4～6ml甲醇使溶解作为供试药材溶液；B4.黄芩加味消毒饮供试样液的配制：取本品2～4g，加水10～20ml溶解，用乙酸乙酯萃取2～3次，合并萃取液，水浴蒸干，残渣加2～5ml甲醇使溶解，作为供试样液；B5.黄芩阴性对照溶液的制备：取黄芩阴性“黄芩加味消毒饮”提取物2～4g，加10～20ml水溶解，用乙酸乙酯萃取2～3次，合并萃取液，水浴蒸干，残渣加2～5ml甲醇使溶解，作为阴性对照溶液；B6.薄层层析检查：照《中国药典》薄层色谱法试验，吸取上述混合对照品溶液、供试样液、阴性对照溶液各5μL，对照药材溶液、供试药材溶液各3μL，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以体积比为10:3:1:2的甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，预饱和30～40min后展开，取出，晾干，置365nm波长的紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的暗色斑点。优选的，上述黄芩的薄层色谱鉴别方法中，所述步骤B1中对照品混合溶液为1mg/ml的黄芩素对照品和1mg/ml的汉黄芩素对照品混合溶液；步骤B2中取黄芩对照药材1g，加体积比为3:1的乙酸乙酯-甲醇的混合溶液30ml，加热回流30min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加5ml甲醇；步骤B3中取黄芩供试药材1g，加体积比为3:1的乙酸乙酯-甲醇的混合溶液30ml，加热回流30min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加5ml甲醇；步骤B4中取本品3g，加水15ml溶解，用乙酸乙酯萃取3次，每次15ml，所述甲醇为4ml；步骤B5中取黄芩阴性“黄芩加味消毒饮”提取物3g，加水15ml溶解，用乙酸乙酯萃取3次，每次15ml，所述甲醇为4ml。进一步，所述“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法还包括山银花的薄层色谱鉴别方本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法，包括“黄芩加味消毒饮”提取物中野菊花的薄层色谱鉴别方法，其特征在于，所述野菊花的薄层色谱鉴别方法，包括如下步骤：/nA1.蒙花苷对照品溶液的配制：精密称取蒙花苷对照品，加甲醇制成浓度为0.5~1mg/ml的蒙花苷对照品溶液；/nA2.野菊花对照药材溶液的制备：取野菊花对照药材0.2~0.4g，加甲醇10~20ml，超声处理30~40min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加3~6.5ml甲醇使溶解，作为对照药材溶液；/nA3.野菊花供试药材溶液的制备：取野菊花供试药材0.5~0.7g，加甲醇10~20ml，超声处理30~40min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加4~6ml甲醇使溶解，作为供试药材溶液；/nA4.黄芩加味消毒饮供试样液的配制：取本品1~3g，加甲醇10~20ml，超声处理30~40min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加5~15ml水溶解，用乙酸乙酯萃取2~3次，合并萃取液，水浴蒸干，残渣加1~3ml甲醇使溶解，作为黄芩加味消毒饮供试样液；/nA5.野菊花阴性对照溶液的制备：取野菊花阴性“黄芩加味消毒饮”提取物1~3g，加甲醇10~20ml，超声处理30~40min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加5~15ml水溶解，用乙酸乙酯萃取2~3次，合并萃取液，水浴蒸干，残渣加1~3ml甲醇使溶解，作为阴性对照溶液；/nA6.薄层层析检查：照《中国药典》薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μL，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以体积比15:15:6:4:1的乙酸乙酯-丁酮-三氯甲烷-甲酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝溶液，热风吹干，置365nm波长的紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。/n...

【技术特征摘要】
1.一种“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法，包括“黄芩加味消毒饮”提取物中野菊花的薄层色谱鉴别方法，其特征在于，所述野菊花的薄层色谱鉴别方法，包括如下步骤：
A1.蒙花苷对照品溶液的配制：精密称取蒙花苷对照品，加甲醇制成浓度为0.5~1mg/ml的蒙花苷对照品溶液；
A2.野菊花对照药材溶液的制备：取野菊花对照药材0.2~0.4g，加甲醇10~20ml，超声处理30~40min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加3~6.5ml甲醇使溶解，作为对照药材溶液；
A3.野菊花供试药材溶液的制备：取野菊花供试药材0.5~0.7g，加甲醇10~20ml，超声处理30~40min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加4~6ml甲醇使溶解，作为供试药材溶液；
A4.黄芩加味消毒饮供试样液的配制：取本品1~3g，加甲醇10~20ml，超声处理30~40min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加5~15ml水溶解，用乙酸乙酯萃取2~3次，合并萃取液，水浴蒸干，残渣加1~3ml甲醇使溶解，作为黄芩加味消毒饮供试样液；
A5.野菊花阴性对照溶液的制备：取野菊花阴性“黄芩加味消毒饮”提取物1~3g，加甲醇10~20ml，超声处理30~40min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加5~15ml水溶解，用乙酸乙酯萃取2~3次，合并萃取液，水浴蒸干，残渣加1~3ml甲醇使溶解，作为阴性对照溶液；
A6.薄层层析检查：照《中国药典》薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5μL，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以体积比15:15:6:4:1的乙酸乙酯-丁酮-三氯甲烷-甲酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝溶液，热风吹干，置365nm波长的紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。


2.根据权利要求1所述的“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法，其特征在于，步骤A1中所述蒙花苷对照品溶液浓度为0.5mg/ml；
步骤A2中取野菊花对照药材0.3g，加甲醇15ml，超声处理30min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加5ml甲醇使溶解；
步骤A3中取野菊花供试药材0.6g，加甲醇15ml，超声处理30min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加5ml甲醇使溶解；
步骤A4中取本品2g，加15ml甲醇，超声处理30min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加10ml水溶解，用乙酸乙酯萃取2次，每次10ml，合并萃取液，水浴蒸干，残渣加2ml甲醇使溶解；
步骤A5中取野菊花阴性“黄芩加味消毒饮”提取物2g，加甲醇15ml，超声处理30min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加10ml水溶解，用乙酸乙酯萃取2次，每次10ml，合并萃取液，水浴蒸干，残渣加2ml甲醇使溶解。


3.根据权利要求1所述的“黄芩加味消毒饮”提取物的薄层层析检测方法，其特征在于，还包括黄芩的薄层色谱鉴别方法，所述黄芩的薄层色谱鉴别方法，包括如下步骤：
B1.黄芩素、汉黄芩素混合对照品溶液的配制：分别精密称取黄芩素对照品和汉黄芩素对照品，加甲醇制成浓度为0.5~1mg/ml的黄芩素对照品和0.5~1mg/ml的汉黄芩素对照品混合溶液；
B2.黄芩对照药材溶液的制备：取黄芩对照药材0.8~1.2g，加体积比为0.8~3.0:0.5~2.0的乙酸乙酯-甲醇混合溶液25~35ml，加热回流30~60min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加4~6ml甲醇使溶解作为对照药材溶液；
B3.黄芩供试药材溶液的制备：取黄芩供试药材0.8~1.2g，加体积比为0.8~3.0:0.5~2.0的乙酸乙酯-甲醇的混合溶液25~35ml，加热回流30~60min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加4~6ml甲醇使溶解作为供试药材溶液；
B4.黄...

【专利技术属性】
技术研发人员：蓝鸣生，陈路，吴无畏，刘钰，蒙桂宾，潘宇，吴芳芳，
申请(专利权)人：广西壮族自治区药用植物园，
类型：发明
国别省市：广西;45