一种生产长链二元酸的菌株及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种菌株，特别涉及一种生产长链二元酸的菌株，本发明专利技术还涉及发酵生产长链二元酸的方法。一种热带假丝酵母菌株，该菌株为热带假丝酵母10468(Candida topicalis 10468)，保藏号为CCTCC NO:M2017164。该菌株的用途是用于发酵长链二元酸。一种长链二元酸的生产方法，通过所述的热带假丝酵母菌株在29‑41℃的发酵温度发酵生产长链二元酸。本发明专利技术解决了目前热带假丝酵母菌株温度适应范围窄、无法实现高温发酵的技术问题，进而解决电能消耗、设备投资、人员投入大及由此带来的生产成本高的技术问题。

A strain producing long chain dicarboxylic acid and its application

The invention relates to a strain, in particular to a strain for producing long-chain dicarboxylic acid, and also to a method for producing long-chain dicarboxylic acid by fermentation. A strain of Candida tropicalis 10468 (Candida apicalis 10468) with the deposit no. of cctcc: m2017164. The purpose of the strain is to ferment long chain dicarboxylic acid. The invention relates to a production method of long-chain dicarboxylic acid. The long-chain dicarboxylic acid is produced by fermentation of the tropical Candida strain at a fermentation temperature of 29 \u2011 41 \u2103. The invention solves the technical problems of narrow temperature adaptation range of current Candida tropicalis strains and high temperature fermentation, and further solves the technical problems of large power consumption, equipment investment, personnel investment and high production cost.

【技术实现步骤摘要】
一种生产长链二元酸的菌株及其应用
本专利技术涉及一种菌株，特别涉及一种生产长链二元酸的菌株，本专利技术还涉及发酵生产长链二元酸的方法。
技术介绍
长链二元酸是合成香料、尼龙工程塑料、热熔胶、树脂、耐寒性增塑剂、医药和农药等的重要原料，其结构式为HOOC(CH2)nCOOH，其中n为大于7的整数。特别是十二碳二元酸(DC12)和十四碳二元酸(DC14)，它们分别是合成具有特殊性能和广泛用途的高级尼龙工程塑料尼龙1212和尼龙1414等的重要原料。十二碳以上的长链二元酸，自然界中不存在，化学法合成路线长，反应需要高温高压，对催化剂要求比较苛刻，因此在工业规模上的长链二元酸品种较少，只有十二碳长链二元酸等少数品种。目前化工上也没有经济可行的合成方法，因此，利用微生物的特异性转化能力，在常温常压下转化正烷烃或脂肪酸生成相应的长链二元酸，是目前业内研究的重点。生物法生产长链二元酸的一重要优点在于可以使用相同的微生物、相同设备、培养基，通过提供不同底物的方案生产各种不同碳链长度的长链二元酸，而化学合成法仅能生产单一二元酸。公开号CN1139659C、公开日为2002-09-18的中国专利公开了一种利用微生物同步发酵正十四烷(nC14)高产十二烷1，12-二羧酸(DC14)的方法，突变株NP-6-5接入含有C11-C18各种正烷烃为基质的培养基后，发酵的温度控制在27～31℃。公开号CN1502700A、公开日2004-06-09的中国专利公开了一种利用微生物氧化C14正烷烃高产α、ω－正长链十四碳二元酸(DCA14)的方法，发酵温度控制在28-35℃。公开号CN1928100A、公开日2007-03-14的中国专利申请公开了一种利用生物合成生产长链α、ω－二羧酸的方法，特别是高产十二碳二元酸(DC12)的方法，其发酵混合液的温度控制在26～32℃。公开号CN101225411A、公开日2008-07-23的中国专利公开了一种利用生物合成生产长链α、ω－二羧酸的方法，特别是高产C11～C14混合长链二元酸(DCm)的方法，发酵混合液的温度控制在26～32℃。虽有很多专利公开了不同高产菌株利用不同底物发酵产二元酸的方案，但其发酵温度都控制较低。由于菌体自身的呼吸代谢作用致使发酵培养物温度上升，尤其在环境温度较高时(如夏天)最为明显。在二元酸工业生产中，为了维持热带假丝酵母较低的最佳发酵温度(29℃～32℃)需要大量水来冷却降温，有时候所用的水也需要事先冷却降温，这无疑增加了电能消耗、设备投资、人员投入，增加了生产成本且不利于节能减排。
技术实现思路
本专利技术的第一方面目的在于提供一种热带假丝酵母菌株，以解决目前热带假丝酵母菌株温度适应范围窄、无法实现高温发酵的技术问题，进而解决电能消耗、设备投资、人员投入大及由此带来的生产成本高的技术问题。本专利技术通过以下技术方案解决上述技术问题，达到本专利技术的第一方面目的。一种热带假丝酵母菌株，该菌株为热带假丝酵母10468(Candidatopicalis10468)，保藏编号为CCTCCNO:M2017164。本专利技术的第二方面目的在于提出上述热带假丝酵母菌株的用途，所述热带假丝酵母菌株如上文所述，所述热带假丝酵母菌株的用途是用于生产长链二元酸；优选地，所述长链二元酸为C9-C18的直链饱和二元酸中的一种或多种；更优选地，所述长链二元酸为C9、C10、C11、C12、C13、C14、C15、C16、C17和C18的直链饱和二元酸中的一种或多种。本专利技术的第三方面目的在于提出一种长链二元酸的生产方法，以解决目前热带假丝酵母菌株温度适应范围窄、无法实现高温发酵的技术问题，以及由此带来的电能消耗大、设备投资高、人员投入多、生产成本高的技术问题。本专利技术通过以下技术方案解决上述第三方面技术问题，达到本专利技术的第三方面目的。一种长链二元酸的生产方法，通过如上文所述的热带假丝酵母菌株在29-41℃、29.5-41℃、30-41℃、30.5-41℃、31-41℃、31.5-41℃、32-41℃、32.5-41℃、33-41℃、33.5-41℃、34-41℃、34.5-41℃、35-41℃、35.5-41℃、36-41℃、36.5-41℃、37-41℃、37.5-41℃38-41℃、38.5-41℃、39-41℃、39.5-41℃、40-41℃或40.5-41℃的种子生产温度制备种子液和/或；在29-41℃、29.5-41℃、30-41℃、30.5-41℃、31-41℃、31.5-41℃、32-41℃、32.5-41℃、33-41℃、33.5-41℃、34-41℃、34.5-41℃、35-41℃、35.5-41℃、36-41℃、36.5-41℃、37-41℃、37.5-41℃38-41℃、38.5-41℃、39-41℃、39.5-41℃、40-41℃或40.5-41℃的发酵温度发酵生产长链二元酸。进一步，所述长链二元酸为C9-C18的直链饱和二元酸中的一种或多种；优选地，所述长链二元酸为C9、C10、C11、C12、C13、C14、C15、C16、C17和C18的直链饱和二元酸中的一种或多种。在上述任一技术方案的基础上进一步，所述发酵的底物包括或者是C9-C18的正烷烃、直链饱和脂肪酸、直链饱和脂肪酸酯、直链饱和脂肪酸盐中的一种或多种；优选地，所述发酵的底物包括或者是C9、C10、C11、C12、C13、C14、C15、C16、C17和C18的正烷烃、直链饱和脂肪酸、直链饱和脂肪酸酯、直链饱和脂肪酸盐中的一种或多种；优选地，所述发酵的底物的添加量为100-400mL/L。在上述任一技术方案的基础上进一步，所述的长链二元酸的生产方法，其中，所述发酵的发酵培养基包括：碳源10g/L-40g/L氮源每种所述氮源浓度为0.5-10g/L无机盐每种所述无机盐浓度为0.5-12g/L。又进一步，所述碳源包括或者是蔗糖、葡萄糖、麦芽糖、糖蜜、果糖、鼠李糖、阿拉伯糖和山梨醇中的一种或多种；所述氮源包括或者是酵母膏、玉米浆、尿素、氨水、硫酸铵、硝酸钾和硝酸铵中的一种或多种；所述无机盐包括或者是钾盐和钠盐中的一种或多种；优选地，所述钾盐包括或者是氯化钾、硝酸钾、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾中的一种或多种，所述钠盐包括或者是氯化钠、硝酸钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠中的一种或多种。优选地，所述发酵培养基包括：在上述任一技术方案的基础上进一步，所述生产方法包括以下步骤：a)菌种活化；b)利用种子培养基制备种子液；c)将所述种子液接种到发酵培养基中发酵。又进一步，所述菌种活化的培养基包括或者是YPD培养基。所述YPD培养基包括葡萄糖2.0％(w/v)、酵母膏1.0％(w/v)、蛋白胨2.0％(w/v)、琼脂2.0％(w/v)，余量为水。又进一步，所述种子培养基包括：蔗糖10-20g/L，玉米浆2-4g/L，酵母膏3-8g/L，磷酸二氢钾4-12g/L，尿素0.5-4g/L、本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种热带假丝酵母菌株，其特征在于，该菌株为热带假丝酵母10468(Candidatopicalis 10468)，保藏编号为CCTCC NO:M2017164。/n

【技术特征摘要】
1.一种热带假丝酵母菌株，其特征在于，该菌株为热带假丝酵母10468(Candidatopicalis10468)，保藏编号为CCTCCNO:M2017164。


2.一种热带假丝酵母菌株的用途，其特征在于，所述热带假丝酵母菌株如权利要求1所述，所述热带假丝酵母菌株的用途是用于生产长链二元酸；优选地，所述长链二元酸为C9-C18的直链饱和二元酸中的一种或多种；更优选地，所述长链二元酸为C9、C10、C11、C12、C13、C14、C15、C16、C17和C18的直链饱和二元酸中的一种或多种。


3.一种长链二元酸的生产方法，其特征在于，通过如权利要求1所述的热带假丝酵母菌株在29-41℃、29.5-41℃、30-41℃、30.5-41℃、31-41℃、31.5-41℃、32-41℃、32.5-41℃、33-41℃、33.5-41℃、34-41℃、34.5-41℃、35-41℃、35.5-41℃、36-41℃、36.5-41℃、37-41℃、37.5-41℃38-41℃、38.5-41℃、39-41℃、39.5-41℃、40-41℃或40.5-41℃的种子生产温度制备种子液和/或；
在29-41℃、29.5-41℃、30-41℃、30.5-41℃、31-41℃、31.5-41℃、32-41℃、32.5-41℃、33-41℃、33.5-41℃、34-41℃、34.5-41℃、35-41℃、35.5-41℃、36-41℃、36.5-41℃、37-41℃、37.5-41℃38-41℃、38.5-41℃、39-41℃、39.5-41℃、40-41℃或40.5-41℃的发酵温度发酵生产长链二元酸。


4.如权利要求3所述的长链二元酸的生产方法，其中，所述长链二元酸为C9-C18的直链饱和二元酸中的一种或多种；优选地，所述长链二元酸为C9、C10、C11、C12、C13、C14、C15、C16、C17和C18的直链饱和二元酸中的一种或多种。


5.如权利要求3或4所述的长链二元酸的生产方法，其中，所述发酵的底物包括或者是C9-C18的正烷烃、直链饱和脂肪酸、直链饱和脂肪酸酯...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪江林，李葳，刘修才，
申请(专利权)人：上海凯赛生物技术股份有限公司，CIBT美国公司，
类型：发明
国别省市：上海;31