一种刺五加多糖的提取工艺制造技术

本发明专利技术公开了一种刺五加多糖的提取工艺，向刺五加粉末中加入无水乙醇浸没，加热回1h，过滤取滤渣挥干乙醇，加入水浸泡30min，在50℃水浴下，以60W超声工作处理10min后，在微波功率550W下，提取10min，提取两次，合并滤液，浓缩至原体积的1/3，加四倍体积无水乙醇，醇沉两次，合并产物用丙酮、乙醚淋洗，干燥后得到刺五加多糖。本发明专利技术采用正交试验优化微波提取工艺参数，苯酚‑硫酸法测定多糖含量。本发明专利技术综合超声强机械剪切作用和微波强穿透性的优势，使提取更加高效、实用性更强。

Extraction technology of Acanthopanax Senticosus Polysaccharide

【技术实现步骤摘要】
一种刺五加多糖的提取工艺
本专利技术涉及多糖类提取
，具体的说涉及到一种刺五加多糖的提取工艺。专利技术背景刺五加多糖是从多年生五加科落叶灌木刺五加中提取的一种免疫活性多糖，具有调节动物免疫机能、抗氧化等功效，是理想的干扰素促诱生剂，具有较为广泛的生物活性，广泛应用于治疗心脏病、高血压、风湿病、糖尿病等多种疾病。提高刺五加多糖的分离提取效率是当前研究的热点之一。在现有技术中，对于刺五加多糖的提取方法有很多，例如，中国专利技术专利授权公告文献，授权公告号为CN104479039A，该专利技术专利公开了一种刺五加多糖超声提取的工艺，该工艺中超声提取利用的是超声波的强烈的机械剪切作用辅助提取的。超声波提取有着高选择性、提取效率高，所需时间短等优势，但是随着时间和功率的加大，会导致多糖断裂，分子变小，降低提取率。而且在整个提取过程中，没有除去脂、除蛋白的实验操作，致使所提多糖粗品含糖量不高。因此，需要提供一种新的技术方案来解决上述问题。微波提取的原理是微波强作用于植物细胞壁使之破裂，细胞膜的酶活性丧失，多糖更容易冲破障碍被提取出来。因此微波提取法能大大缩短多糖的提取时间、提高了提取效率，显著提高了刺五加多糖的提取率。因此结合超声和微波两种提取方法，综合提取优势，将提高多糖的提取率。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供一种刺五加多糖提取工艺，从而实现对实现对刺五加多糖简便、高效的提取。一种刺五加多糖提取工艺，具体步骤如下：a.向刺五加粉末中加入无水乙醇至浸没，加热回流1h，冷却，过滤，使无水乙醇完全挥发，然后以料水比(g：mL)加入5-15倍的水浸泡；b.将上述加水浸泡的刺五加放在50℃水浴中，置于60W超声功率下，超声10min；c.然后取出后，在微波功率350W-550W下，提取10min-30min，提取两次，合并滤液，浓缩至原体积的1/3；d.接着，利用sevage法除去提取液中的蛋白质，离心取滤液；e.最后，将滤液加入四倍体积无水乙醇调醇，低温静置12h后超速离心得一次醇沉产物，再将上述调醇、静置、离心的步骤重复一次，得二次醇沉产物，合并两次醇沉产物利用丙酮、乙醚淋洗，干燥后得到刺五加多糖。有益效果：本专利技术结合超声和微波提取两种方法，针对性强，提取效率高，多糖得率高，成本低廉，实用性强。具体实施方式下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1：一种刺五加多糖的提取工艺，包括以下几个步骤：a.向刺五加粉末中加入无水乙醇至浸没，加热回流1h，冷却，过滤，使无水乙醇完全挥发，然后以料水比(g：mL)加入15倍的水浸泡；b.将上述加水浸泡的刺五加放在50℃水浴中，置于60W超声功率下，超声10min；c.然后取出后，在微波功率550W下，提取10min，提取两次，合并滤液，浓缩至原体积的1/3；d.接着，在sevage法下，加入同体积正丁醇和氯仿的混合溶液(正丁醇：氯仿＝1:4)，震摇分层，分液后取水层，离心除去已变性蛋白质，取滤液备用；e.最后，将滤液加入四倍体积无水乙醇调醇，低温静置12h后超速离心得一次醇沉产物，再将上述调醇、静置、离心的步骤重复一次，得二次醇沉产物，合并两次醇沉产物，用丙酮、乙醚淋洗，干燥后得到刺五加多糖。实施例2一种刺五加多糖的提取工艺包括以下几个步骤：a.向刺五加粉末中加入无水乙醇至浸没，加热回流1h，冷却，过滤，使无水乙醇完全挥发，然后以料水比(g：mL)加入10倍的水浸泡；b.将上述加水浸泡的刺五加放在在50℃水浴中，置于60W超声功率下，超声10min；c.然后取出后，在微波功率550W下，提取30min，提取两次，合并滤液，浓缩至原体积的1/3；d.接着，在sevage法下，加入同体积正丁醇和氯仿的混合溶液(正丁醇：氯仿＝1:4)，震摇分层，分液后取水层，离心除去已变性蛋白质，取滤液备用；e.最后，将滤液加入四倍体积无水乙醇调醇，低温静置12h后超速离心得一次醇沉产物，再将上述调醇、静置、离心的步骤重复一次，得二次醇沉产物，合并两次醇沉产物利用丙酮、乙醚淋洗，干燥后得到刺五加多糖。对比试验一种刺五加多糖的提取工艺包括以下几个步骤：a.将与实施例1和实施例2同等量的刺五加放在在70℃水浴中，超声功率500w，提取三次，每次提取9min。b.合并三次滤液，浓缩；c.将滤液加入四倍体积无水乙醇调醇，低温静置12h，超速离心后得一次醇沉产物，再将上述调醇、静置、离心的步骤重复一次，合并两次醇沉产物，干燥得刺五加多糖。根据表1正交试验因素与水平设计正交试验，结合表2正交结果直观分析和表3正交结果方差分析确定最优提取工艺，通过表4中各实施例和对比实验的多糖提取率和纯度的对比，总结如下：本专利技术实施例1利用工艺条件A3B3C3D2下提取刺五加多糖，所得粗品提取率为3.41％，多糖纯度为25.63％；本专利技术实施例2选取A2B3C3D2工艺条件进行刺五加多糖的提取，所得粗品提取率为3.23％，多糖纯度为24.78％；而利用现有超声波法提取刺五加多糖进行对比试验，所得粗品提取率为3.85％，多糖纯度为17.22％。通过上述实施例1、实施例1以及对比试验，可以得出，对比试验中超声波法提取刺五加多糖由于工艺中无去脂、除蛋白的条件，因此多糖粗品提取率高，但多糖纯度低。本专利技术的技术方案充分考虑了多糖提取率和降低提取成本、节约能耗等方面，完全优于现有技术的提取工艺，可以进行推广和应用。表1刺五加多糖提取的正交试验因素与水平水平A水量/倍B微波功率/WC提取时间/minD提取次数15350101210400202315550303表2刺五加多糖提取的正交实验与试验结果表3正交试验结果方差分析表4刺五加多糖提取及纯度对比组别多糖粗品提取率％多糖纯度％实施例13.4125.63实施例23.2324.78对比试验3.8517.22本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种刺五加多糖提取工艺，具体步骤如下：a.向刺五加粉末中加入无水乙醇至浸没，加热回流1h，冷却，过滤，使无水乙醇完全挥发，然后以料水比（g：mL）加入5‑15倍的水浸泡；b.将上述加水浸泡的刺五加放在50℃水浴中，置于60W超声功率下，超声10min；c.然后取出后，在微波功率350W‑550W下，提取10min‑30min，提取两次，合并滤液，浓缩至原体积的1/3；d.接着，利用sevage法，加入同体积正丁醇和氯仿的混合溶液（正丁醇：氯仿=1:4），震摇分层，分液后取水层，离心除去已变性蛋白质，取滤液备用；e.最后，将滤液加入四倍体积无水乙醇调醇，低温静置12h后超速离心得一次醇沉产物，再将上述调醇、静置、离心的步骤重复一次，得二次醇沉产物，合并两次醇沉产物，用丙酮、乙醚淋洗，干燥后得到刺五加多糖。

【技术特征摘要】
1.一种刺五加多糖提取工艺，具体步骤如下：a.向刺五加粉末中加入无水乙醇至浸没，加热回流1h，冷却，过滤，使无水乙醇完全挥发，然后以料水比（g：mL）加入5-15倍的水浸泡；b.将上述加水浸泡的刺五加放在50℃水浴中，置于60W超声功率下，超声10min；c.然后取出后，在微波功率350W-550W下，提取10min-30min，提取两次，合并滤液，浓缩至原体积的1/3；d.接着，利用sevage法，加入同体积正丁醇和氯仿的混合溶液（正丁醇：氯仿=1:4），震摇分层，分液后取水层，离心除去已变性蛋白质，取滤液备用；e.最后，将滤液加入四倍体积无水乙醇调醇，低温静置12h后超速离心得一次醇沉产物，再将上述调醇、静置、离心的步骤重复一次，得二次醇沉产物，合并两次醇沉产物，用丙酮、乙醚淋洗，干燥后得到刺五加多糖。2.根据权利要求1所述的一种刺五加多糖提取工艺，其特征在于：包括以下几个步骤：a.向刺五加粉末中加入无水乙醇至浸没，加热回流1h，冷却，过滤，使无水乙醇完全挥发，然后以料水比（g：mL）加入15倍的水浸泡；b.将上述加水浸泡的刺五加放在50℃水浴中，置于60W超声功率下，超声10min；c.然后取出后，在微波功率550W下，提取10min，提取两次，合并滤液，浓缩至原体积的1/3；d.接...

【专利技术属性】
技术研发人员：曲宝涵，费雪，陈晓洁，郝智慧，黄婷婷，
申请(专利权)人：青岛农业大学，
类型：发明
国别省市：山东,37