一种银耳菌种选育方法技术

本发明专利技术属于食用菌育种领域，具体涉及一种银耳菌种选育方法，包括如下步骤：S1、出发菌株选择；S2、诱变：采用

A breeding method of Tremella

【技术实现步骤摘要】
一种银耳菌种选育方法
本专利技术属于食用菌育种领域，具体涉及一种银耳菌种选育方法。
技术介绍
银耳(Tremellafuciformis)，俗称白木耳、雪耳、川耳等，有＂苗中之冠＂的美名，是一种兼有食用和药用的真菌，在分类上，银耳属于Eumycota(真菌门)，Basidiomycetes(担子菌纲)，Heterobasidiomycetes(有隔担子菌亚纲)，Tremellales(银耳目)，Tremellaceae(银耳科)，Tremella(银耳属)，是一种中温型和好氧性真茜。银耳品质鲜嫩，营养价值高，是一种著名的食药用胶质真菌，子实体内富含大量的蛋白质、维生素、碳水化合物、微量元素等营养物质，其中，银耳干品一般每100g含有5g的粗蛋白、总碳水化合物79g、纤维2.69g、脂肪0.6g、灰分3.1g、磷250mg、钙380mg、铁30.4g，此外，还有维生素A、B1、B2、D和其它的银耳多糖。然而，单独的银耳菌丝却不能在以木质纤维素为主料的栽培培养基上长出子实体，银耳在完成其生活史的过程中，需要有另一种真苗伴生，即为香灰菌。香灰菌丝生长速度快，生长初期菌丝白色，后期会分泌黑色素。由于育种工作选育的滞后，严重影响了该产业的发展，因此对银耳高产优质菌株的筛选和选育工作势在必行。目前的栽培银耳品种普遍存在菌种衰退快、产量不高、抗逆性差、适应性弱等现象，已严重影响银耳的产量与品质，阻碍了银耳产业的健康发展。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种银耳菌种选育方法，用以提高银耳菌种产生的纤维素酶活力。为了解决上述技术问题，本专利技术的技术方案为：一种银耳菌种选育方法，包括如下步骤：S1、出发菌株选择：选择Tr21菌株和AS5.91菌株作为出发菌株；S2、诱变：将Tr21菌株和AS5.91菌株分别转入复苏培养基中，置于20～30℃恒温摇床上培养3～5天；然后分别转至扩增培养基中培养3～5天，得Tr21扩增液和AS5.91扩增液；将Tr21扩增液用60Co-γ射线进行辐射，辐射剂量为50～260Gy，辐射剂量率为25～60Gy/h；辐射结束后，将扩增液涂布在平皿内的固体培养基上，置于18～28℃的恒温培养箱内培养5～8天；将AS5.91扩增液用60Co-γ射线进行辐射，辐射剂量为50～200Gy，辐射剂量率为30～50Gy/h；辐射结束后，将扩增液涂布在平皿内的固体培养基上，置于18～28℃的恒温培养箱内培养5～8天；S3、杂交：挑选Tr21平皿上萌发菌丝的菌落进行镜检，挑取单孢子萌发的菌落；挑选AS5.91平皿上萌发菌丝的菌落进行镜检，挑取单孢子萌发的菌落；将挑取的Tr21单孢子与挑取的AS5.91单孢子进行杂交，杂交后接种在CM培养基平皿上，置于26～30℃恒温培养箱中进行培养，菌丝萌发后进行镜检，有锁状联合的菌丝表明杂交成功，将其挑至扩增培养基中置于18～30℃的恒温摇床上进行培养4～8天，保存；按重量份数计，所述CM培养基的组成为：杨树木屑60～95份、去皮土豆170～205份、蔗糖10～17份、蛋白胨3～7份、琼脂15～18份、硫酸镁1～5份、磷酸二氢钾1～4份和水1000份，调pH5.0～5.8。在本专利技术提供的银耳菌种选育方法中，优选地，按重量份数计，所述复苏培养基的组成为：去皮土豆140～190份、葡萄糖10～17份、酵母浸膏5～10份、蛋白胨1～5份、磷酸二氢钾1～4份、三七总皂苷0.5～2份和水1000份。在本专利技术提供的银耳菌种选育方法中，进一步优选地，按重量份数计，所述扩增培养基的组成为：去皮土豆140～180份、葡萄糖10～18份、蛋白胨1～5份、磷酸二氢钾1～4份、天麻素0.3～1.5份和水1000份。在本专利技术提供的银耳菌种选育方法中，更进一步优选地，按重量份数计，所述固体培养基的组成为：去皮土豆140～180份、葡萄糖10～18份、蛋白胨1～5份、磷酸二氢钾1～4份、天麻素0.3～1.5份、琼脂15～20份和水1000份。在本专利技术提供的银耳菌种选育方法中，优选地，所述用于Tr21扩增液的60Co-γ射线的辐射剂量为200Gy，辐射剂量率为50Gy/h。在本专利技术提供的银耳菌种选育方法中，进一步优选地，所述用于AS5.91扩增液的60Co-γ射线的辐射剂量为160Gy，辐射剂量率为40Gy/h。采用上述技术方案，由于采用了60Co-γ射线进行辐射诱变并结合杂交育种，使得所得银耳菌株产生的纤维素酶活力增强了，并缩短了栽培周期。在复苏培养基中添加三七总皂苷，在扩增培养基中添加天麻素，在固体培养基中添加天麻素，提高了银耳的折干率。具体实施方式下面对本专利技术的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本专利技术，但并不构成对本专利技术的限定。此外，下面所描述的本专利技术各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。实施例1本实施例提供了一种银耳菌种选育方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、出发菌株选择：选择Tr21菌株和AS5.91菌株作为出发菌株；S2、诱变：将Tr21菌株和AS5.91菌株分别转入复苏培养基中，置于20℃恒温摇床上培养5天；然后分别转至扩增培养基中置于30℃恒温摇床上培养5天，得Tr21扩增液和AS5.91扩增液；将Tr21扩增液用60Co-γ射线进行辐射，辐射剂量为50Gy，辐射剂量率为25Gy/h；辐射结束后，将扩增液涂布在平皿内的固体培养基上，置于18℃的恒温培养箱内培养5天；将AS5.91扩增液用60Co-γ射线进行辐射，辐射剂量为200Gy，辐射剂量率为30Gy/h；辐射结束后，将扩增液涂布在平皿内的固体培养基上，置于28℃的恒温培养箱内培养5天；S3、杂交：挑选Tr21平皿上萌发菌丝的菌落进行镜检，挑取单孢子萌发的菌落；挑选AS5.91平皿上萌发菌丝的菌落进行镜检，挑取单孢子萌发的菌落；将挑取的Tr21单孢子与挑取的AS5.91单孢子进行杂交，杂交后接种在CM培养基平皿上，置于26℃恒温培养箱中进行培养，菌丝萌发后进行镜检，有锁状联合的菌丝表明杂交成功，将其挑至扩增培养基中置于30℃的恒温摇床上进行培养4天，保存；按重量份数计，CM培养基的组成为：杨树木屑60份、去皮土豆205份、蔗糖10份、蛋白胨3份、琼脂15份、硫酸镁5份、磷酸二氢钾1份和水1000份，调pH5.8。按重量份数计，复苏培养基的组成为：去皮土豆140份、葡萄糖10份、酵母浸膏10份、蛋白胨1份、磷酸二氢钾1份、三七总皂苷2份和水1000份。按重量份数计，扩增培养基的组成为：去皮土豆180份、葡萄糖10份、蛋白胨1份、磷酸二氢钾1份、天麻素1.5份和水1000份。按重量份数计，固体培养基的组成为：去皮土豆140份、葡萄糖10份、蛋白胨5份、磷酸二氢钾1份、天麻素0.3份、琼脂20份和水1000份。实施例2本实施例提供了一种银耳菌种选育方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、出发菌株选择：选择Tr21菌株和AS5.91菌株作为出发菌株；S2、诱变：将Tr21菌株和AS5.91菌株分别转入复苏培养基中，置于30℃恒温摇床上培养3天；然后分别转至扩增培养基中置于20℃恒温摇床上培养3天，得Tr21扩增液和AS5.91扩增液；将Tr21扩增液用60Co本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种银耳菌种选育方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、出发菌株选择：选择Tr21菌株和AS5.91菌株作为出发菌株；S2、诱变：将Tr21菌株和AS5.91菌株分别转入复苏培养基中，置于20～30℃恒温摇床上培养3～5天；然后分别转至扩增培养基中培养3～5天，得Tr21扩增液和AS5.91扩增液；将Tr21扩增液用

【技术特征摘要】
1.一种银耳菌种选育方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、出发菌株选择：选择Tr21菌株和AS5.91菌株作为出发菌株；S2、诱变：将Tr21菌株和AS5.91菌株分别转入复苏培养基中，置于20～30℃恒温摇床上培养3～5天；然后分别转至扩增培养基中培养3～5天，得Tr21扩增液和AS5.91扩增液；将Tr21扩增液用60Co-γ射线进行辐射，辐射剂量为50～260Gy，辐射剂量率为25～60Gy/h；辐射结束后，将扩增液涂布在平皿内的固体培养基上，置于18～28℃的恒温培养箱内培养5～8天；将AS5.91扩增液用60Co-γ射线进行辐射，辐射剂量为50～200Gy，辐射剂量率为30～50Gy/h；辐射结束后，将扩增液涂布在平皿内的固体培养基上，置于18～28℃的恒温培养箱内培养5～8天；S3、杂交：挑选Tr21平皿上萌发菌丝的菌落进行镜检，挑取单孢子萌发的菌落；挑选AS5.91平皿上萌发菌丝的菌落进行镜检，挑取单孢子萌发的菌落；将挑取的Tr21单孢子与挑取的AS5.91单孢子进行杂交，杂交后接种在CM培养基平皿上，置于26～30℃恒温培养箱中进行培养，菌丝萌发后进行镜检，有锁状联合的菌丝表明杂交成功，将其挑至扩增培养基中置于18～30℃的恒温摇床上进行培养4～8天，保存；按重量份数计，所述CM培养基的组成为：杨树...

【专利技术属性】
技术研发人员：姚远，孙跃明，金宏伟，刘德育，
申请(专利权)人：昆明旭日丰华农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：云南,53