一种苯并杂卓生物碱类化合物及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种苯并杂卓生物碱类化合物及其制备方法与应用。所述的苯并杂卓生物碱类化合物是从星毛唐松草中分离得到，命名为5,6‑二氢‑8‑羟基‑9‑甲氧基‑2‑甲基‑11H‑吡咯并[2,1‑b][3]苯并杂卓‑11‑酮，英文名为：5,6‑dihydro‑8‑hydroxy‑9‑methoxy‑2‑methyl‑11H‑yrrolo[2,1‑b][3]benzazepin‑11‑one其分子式为C15H15NO3，为棕红色胶状物，具有下述结构式：

A benzo heterozhuo alkaloid compound and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
一种苯并杂卓生物碱类化合物及其制备方法与应用
本专利技术属于植物化学
，具体涉及一种苯并杂卓生物碱类化合物及其制备方法与应用。
技术介绍
唐松草属(拉丁学名：ThalictrumL.)属于毛茛科多年生草本植物。该属植物全球约有200种，其中中国约有67种，多数分布于西南部。在全世界约200种唐松草属植物中，有化学成分报道的该属植物有90余种，主要活性成分有生物碱、皂甙、黄酮等类型。超过43种的该属植物在中国有民间药用记载。星毛唐松草（拉丁名：ThalictrumcirrhosumH.Lev.），是一种唐松草属草本植物，其主要分布在我国云南昆明至大理一带海拔2200-2400米间山地沟旁灌丛中或山坡上。该植物全草可入药，可用于治疗黄疸、肝炎、消化道炎症、过敏等症状。前期研究表明星毛唐松草富含生物碱类活性成分。为了持续推进云南特色药用植物资源的开发利用，从星毛唐松草中发现更多的活性化学成分，本研究对产自云南大理的星毛唐松草全草进行了化学成分研究，并从中分离到一个新的苯并杂卓生物碱类化合物。该化合物至今尚未见到相关报道，值得一提的是该化合物具有显著的抗烟草花叶病病毒活性。
技术实现思路
本专利技术的第一目的在于提供一种苯并杂卓生物碱类化合物；第二目的在于提供所述的苯并杂卓生物碱类化合物的制备方法；第三目的在于提供所述的苯并杂卓生物碱类化合物的应用。本专利技术的第一目的是这样实现的，所述的苯并杂卓生物碱类化合物是从星毛唐松草中分离得到，命名为5,6-二氢-8-羟基-9-甲氧基-2-甲基-11H-吡咯并[2,1-b][3]苯并杂卓-11-酮，英文名为：5,6-dihydro-8-hydroxy-9-methoxy-2-methyl-11H-yrrolo[2,1-b][3]benzazepin-11-one其分子式为C15H15NO3，为棕红色胶状物，具有下述结构式：。本专利技术的第二目的是这样实现的，是以星毛唐松草为原料，经浸膏提取、硅胶柱层析和高压液相色谱分离纯化步骤，具体包括：A、浸膏提取：将星毛唐松草的全草粉碎，用95%乙醇回流提取2~3次，每次35~80min，合并提取液浓缩得到物料a，物料a中加入酒石酸溶液稀释得到物料b，物料b采用乙酸乙酯萃取1~3次，收集水相得到物料c，物料c用碳酸钠饱和，再次用乙酸乙酯萃取1~3次，合并萃取的乙酸乙酯相，减压浓缩得到浸膏d；B、硅胶柱层析：浸膏d用浸膏d重量3~10倍量的150~200目硅胶干法装柱进行硅胶柱层析，以体积配比为20：1~0:1的三氯甲烷-丙酮溶液进行梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，合并相同的部分；C、高压液相色谱分离：B步骤洗脱液的8:2部分经反相C18中压液相色谱分离纯化，所得36.5min的色谱峰对应的洗脱液，进一步经高压液相色谱分离纯化得到目标物苯并杂卓生物碱类化合物。以上述方法制备的苯并杂卓生物碱类化合物的结构是通过以下方法鉴定出来的：本专利技术苯并杂卓生物碱类化合物为棕红色胶状物，HRESI-MS显示其准分子离子峰为280.0942[M+Na]+，结合1H和13CNMR谱确定分子式为C15H15NO3，为生物碱类化合物，且化合物的不饱合度为9。其红外光谱显示化合物中有羟基(3408cm-1)、羰基(1655cm-1)，和芳环(1600、1564和1443cm-1)信号吸收，紫外光谱在252、324和352nm有吸收峰也证实化合物中存在芳环结构。根据1H和13CNMR信号，化合物中总共有15个碳和15个氢，根据其化学位移值的DEPT谱信号，可初步分类为1个甲基、两个亚甲基、1个甲氧基、1个羰基、4个双键次甲基、6个双键季碳(其中2个为氧化季碳)，以及1个酚羟基。结合其HSQC和HMBC相关谱，这些信号可进一步归类为1个1,2,4,5-四取代苯环(C-7~C-13，H-7和H-10),1个1,2,4-三取代的吡咯环(C-1~C-3,C-12,H-1和H-3),1个和N-连接的-CH2-CH2-片段(C-5和C-6,H2-5和H2-6)，1个羰基(C-11),1个甲基(C-15和H3-15)，一个甲氧基(δC56.2q，δH3.80s)，以及一个酚羟基(δH10.94)。进一步分析其HMBC谱(图3和4)：1,2,4,5-四取代苯环和通过H-7和C-8、C-9、C-13、C-14，以及H-10和C-8,C-9、C-13、C-14的HMBC相关得到证实；1,2,4-三取代的吡咯环可通过H-1和C-2、C-3、C-12，以及H-3和C-1、C-2、C-12的HMBC相关得到证实；存在-N-CH2-CH2-结构片段可通过H2-5和C-6，以及H2-6和C-5的HMBC相关得到证实。此外，化合物的不饱合度为9，除去苯环的不饱合度4、吡咯环的不饱合度3、羰基的不饱合度1，化合物中还应该有一个环以支持其不饱合度。从HMBC相关谱(图2)中可观测到H2-6和C-7、C-13、C-14，H-5和C-3、C-12，以及H-3和C-5的HMBC相关，可推测N-CH2-CH2-结构片段的一端和苯环相了解，另一端和吡咯环的氮相连接。根基苯环上的氢(H-10)和吡咯环上的氢(H-1)和羰基都有HMBC相关信号，这可证实该羰基一端连接到苯环上、另一端连接到和吡咯环上。这样，苯环，吡咯环、羰基、-N-CH2-CH2-结构片段形成了一个氮杂卓环，化合物的母体结构可确定为三环苯并杂卓类生物碱。化合物的母体结构确定后，进一步通过HMBC相关信号确定取代基团(甲氧基、甲基和酚羟基)的位置。根据H3-15与C-1、C-2、C-3，以及H-1和H-2与C-15的HMBC相关，可证实该甲基取代在C-2位。根据甲氧基氢信号(δH3.80s)和C-9有HMBC相关信号，可证实该甲氧基分别取代在C-9位，根据酚羟基氢信号(δH10.94s)和C-7、C-8、C-9有HMBC相关，可证实该酚羟基取代在C-8位。至此化合物1的结构得到确认，该化合物命名为：5,6-二氢-8-羟基-9-甲氧基-2-甲基-11H-吡咯并[2,1-b][3]苯并杂卓-11-酮(1)。化合物的红外、紫外和质谱数据：UV(CH3OH)λmax(logε)252(3.64)、324(3.72)、352(3.92)nm；IR(KBr)νmax3408、3042、2930、1655、1600、1564、1443、1262、1165、1132、1074、1038、927、782cm-1;1HNMR和13CNMR数据(CDCl3,125和500MHz)见表-1；正离子模式ESIMSm/z280[M+Na]+，HRESIMSm/z280.0942[M+Na]+(计算值C15H15NNaO3,280.0950)。本专利技术的第三目的是这样实现的，所述的苯并杂卓生物碱类化合物在制备防治烟草花叶病药物中的应用。用半叶法进行了本专利技术化合物的抗烟草花叶病毒活性测试，结果明本化合物的相对抑制率为55.2%，超过对照宁南霉素的相对抑制率30.3%，说明化合物有很好的抗烟草花叶病毒活性。本专利技术化合物是首次被分离出来的，通过上述核磁共振和质谱测定方法确定为苯并杂卓生物碱类化合物，并表征了其具体结构。活性检测结果揭示了本专利技术的化合物在制备抗烟草花叶病毒生物农药中有本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种苯并杂卓生物碱类化合物，其特征在于所述的苯并杂卓生物碱类化合物是从星毛唐松草中分离得到，命名为5,6‑二氢‑8‑羟基‑9‑甲氧基‑2‑甲基‑11

【技术特征摘要】
1.一种苯并杂卓生物碱类化合物，其特征在于所述的苯并杂卓生物碱类化合物是从星毛唐松草中分离得到，命名为5,6-二氢-8-羟基-9-甲氧基-2-甲基-11H-吡咯并[2,1-b][3]苯并杂卓-11-酮，英文名为：5,6-dihydro-8-hydroxy-9-methoxy-2-methyl-11H-yrrolo[2,1-b][3]benzazepin-11-one其分子式为C15H15NO3，为棕红色胶状物，具有下述结构式：。2.一种权利要求1所述的苯并杂卓生物碱类化合物的制备方法，其特征在于是以星毛唐松草为原料，经浸膏提取、硅胶柱层析和高压液相色谱分离纯化步骤，具体包括：A、浸膏提取：将星毛唐松草的全草粉碎，用95%乙醇回流提取2~3次，每次35~80min，合并提取液浓缩得到物料a，物料a中加入酒石酸溶液稀释得到物料b，物料b采用乙酸乙酯萃取1~3次，收集水相得到物料c，物料c用碳酸钠饱和，再次用乙酸乙酯萃取1~3次，合并萃取的乙酸乙酯相，减压浓缩得到浸膏d；B、硅胶柱层析：浸膏d用浸膏d重量3~10倍量的150~200目硅胶干法装柱进行硅胶柱层析，以体积配比为20：1~0:1的三氯甲烷-丙酮溶液进行梯度洗脱，收集梯度洗脱液、浓缩，合并相同的部分；C、高压液相色谱分离：B步骤洗脱液的8:2部分经反相C18中压液相色谱分离纯化，...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴玉萍，孔光辉，师君丽，李薇，胡秋芬，杨光宇，李晶，宋春满，刘欣，黄海涛，李雪梅，
申请(专利权)人：云南省烟草农业科学研究院，云南中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：云南,53