一种具有抗炎和皮肤屏障保护作用的桉叶素联合糖皮质激素的复方制剂制造技术

本发明专利技术涉及生物医学研究领域，公开了一种具有抗炎和皮肤屏障保护作用的桉叶素联合糖皮质激素的复方制剂，包括桉叶素和糖皮质激素，所述桉叶素的浓度为0.5％～5％，所述糖皮质激素的浓度为0.01～2.5％。本发明专利技术初次将桉叶素与糖皮质激素联合使用以治疗皮肤疾病，本发明专利技术的复方制剂除了既有糖皮质激素抗炎抗过敏的效应外，加入的桉叶素还可减轻因激素使用不当而引起的皮肤屏障损伤，可减少因激素外用不当导致的激素依赖性皮炎的发生，提高治疗水平。

A compound preparation of eucalyptin combined with glucocorticoid with anti-inflammatory and skin barrier protective effects

【技术实现步骤摘要】
一种具有抗炎和皮肤屏障保护作用的桉叶素联合糖皮质激素的复方制剂
本专利技术涉及生物医学研究领域，具体涉及一种具有抗炎和皮肤屏障保护作用的桉叶素联合糖皮质激素的复方制剂。
技术介绍
皮肤是人体最大的器官，对外界病原体变应原和物理损伤提供了保护性屏障，而且具有免疫监视、感觉器官的作用。细胞外基质(Extracellularmatrix，ECM)是表皮和真皮的重要组成部分，对维持正常的生理结构至关重要。ECM作为正常稳态过程的一部分，ECM的重塑始终参与机械刺激、血管生成和伤口愈合的过程。此外，ECM还与其他ECM组织、免疫细胞和血管细胞相互作用，以调节细胞增殖、分化和细胞内信号传导。完整的皮肤屏障功能包括角质层结构完整、表皮足够涵养水份的能力以及抵抗外界刺激的能力，表皮水合作用的失衡将导致角质层分化异常、结构缺陷和屏障功能下降，临床出现干燥、瘙痒和皮肤敏感。水通道蛋白(Aquaporins，AQPs)是水、甘油和其他小溶质通过细胞膜的选择性通道，在上皮细胞和内皮细胞中表达，其中AQP3也是AQPs中的一种；Caspase-14是角质形成细胞(Kerotinocyte，KC)激活角化过程中的一种蛋白酶，一方面在KC的角化和角质层的形成起重要作用；另一方面，Caspase-14可以直接裂解Pro-FLG，将中间丝聚合蛋白(Filaggrin，FLG)降解为天然保湿因子(Naturalmoisturizingfactors，NMFs)，对维持角质层的含水量和屏障功能具有重要作用；FLG与其他几种蛋白一起交联成一个机械坚固的角化包膜，为细胞外脂质基质提供支架，FLG可通过多种机制影响皮肤屏障；骨膜素蛋白(Periostin，Per)是一种ECM蛋白，与Ⅰ型胶原蛋白和纤连蛋白直接相连，参与ECM网状结构的形成，此外还作为整合素受体的配体直接作用于各种细胞，并可能与皮肤老化、伤口愈合和特应性皮炎的炎症过程有关；基质金属蛋白酶9(Matrixmetalloproteinase9，MMP-9)又称明胶酶B，可由中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞以及KC表达，可破坏基底膜的完整性，从而促使组织发生炎症、延迟愈合等改变，同时，MMP-9也是调节细胞生长、迁移、浸润、炎症及血管生成的关键信号之一；透明质酸(Hyaluronan，HA)是皮肤ECM中含量丰富的成分，HA具有吸水及锁水、润滑、调节渗透压等作用，在细胞增生和分化、组织重塑、血管形成、创伤愈合、肿瘤生长及转移、预防光老化、保护正常细胞免受毒性细胞及自由基等的侵袭中发挥着重要的生物学意义，在维持KC、表皮和真皮结构弹性和水结合力的功能中发挥重要作用。外用糖皮质激素(Topicalglucocorticoids，TGCs)因其抗炎、抗增殖作用，是皮肤科中重要的治疗手段。但长期使用糖皮质激素会出现一系列皮肤屏障破坏的问题，表现为皮肤变薄，弹性下降、血管扩张、紫癜、毳毛增多和痤疮样皮损，并伴有不同程度的瘙痒、灼热等自觉症状。目前的激素依赖性皮炎就是由于外用含糖皮质激素制剂后原有皮肤病皮损和症状显著好转，一旦停药就会导致原有症状、体征复发、甚至加重，而迫使患者再次外用糖皮质激素的一种亚急性炎症性皮肤病。研究发现糖皮质激素对伴有表皮屏障功能异常的炎症性皮肤病可改善其屏障功能，早期可因其抗炎作用修复皮肤屏障，长期使用可通过破坏KC及其结构蛋白、角质层脂质等影响皮肤屏障功能。倍他米松(Betamethasone，BT)是糖皮质激素类药物中的一种。研究认为，激素依赖性皮炎与长期超剂量、超浓度、超范围外用糖皮质激素制剂有关。桉树脑(Eucalyptol)，又名1，8-桉叶素(1,8-cineole，Cin)，是一种单萜类化合物，在桉树叶、巴豆、紫花苜蓿、山香属、蔷薇属、鼠尾草属等芳香植物中天然存在。桉树脑已被广泛用于治疗呼吸道疾病，包括支气管炎、鼻窦炎、支气管哮喘和慢性阻塞性肺疾病。目前研究表明，桉树脑具有抗微生物、抗炎、抗氧化、保湿、抗肿瘤、抗组胺、促进伤口愈合、促渗透、抗焦虑等作用。桉树脑在皮肤科的应用较少，但其强大的生物活性可能对皮肤屏障有修复作用。因此，本专利技术欲研发一种可减少激素依赖性皮炎的桉叶素和糖皮质激素的复方制剂。
技术实现思路
基于以上问题，本专利技术提供一种具有抗炎和皮肤屏障保护作用的桉叶素联合糖皮质激素的复方制剂，以通过该复方制剂减少激素依赖性皮炎。为解决以上技术问题，本专利技术提供了一种具有抗炎和皮肤屏障保护作用的桉叶素联合糖皮质激素的复方制剂，包括桉叶素和糖皮质激素，所述桉叶素的浓度为0.5％～5％，所述糖皮质激素的浓度为0.01～2.5％。进一步的，所述糖皮质激素的浓度为0.05％～0.1％。进一步的，所述糖皮质激素为倍他米松。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术初次将桉叶素与糖皮质激素联合使用以治疗皮肤疾病，本专利技术的复方制剂除了既有糖皮质激素抗炎抗过敏的效应外，加入的桉叶素还可减轻因激素使用不当而引起的皮肤屏障损伤，可减少因激素外用不当导致的激素依赖性皮炎的发生，提高治疗水平。附图说明图1为本专利技术的实施例中的HA标准品稀释示意图；图2为本专利技术的实施例的研究方法的框架图。具体实施方式为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面结合实施例和附图，对本专利技术作进一步的详细说明，本专利技术的示意性实施方式及其说明仅用于解释本专利技术，并不作为对本专利技术的限定。实施例：一种具有抗炎和皮肤屏障保护作用的桉叶素联合糖皮质激素的复方制剂，包括桉叶素、糖皮质激素和必要的常规复方制剂中的赋形剂和基质，桉叶素的浓度为0.5％～5％，糖皮质激素的浓度为0.01～2.5％，在本实施例中，所用的糖皮质激素的浓度为0.05％～0.1％，本实施例中所用的糖皮质激素为倍他米松。为了验证桉叶素与糖皮质激素联合使用可减少激素依赖性皮炎的发生，本实施例在实验室内进行了如下研究：S1：细胞培养(1)细胞复苏A.用紫外灯照射生物安全柜30min，用70％酒精棉球擦拭桌面、移液枪、离心管以及拿进生物安全柜的物品，并将完全培养液预热至37℃；B.从-80℃冰箱取出装有细胞的冻存管，并迅速放置于37℃水浴锅中轻轻摇动约1min，使其尽快完全解冻；C.吸取冻存管中的细胞悬液，转移至含有的完全细胞培养液的15mL离心管中提前加入预热的含10％FBS的培养液3mL，1000r/min，5min，用负吸泵吸弃上清，注意勿吸到细胞沉淀；D.加入1mL10％FBS的完全培养基，轻轻重悬细胞，均匀滴入10cm细胞培养皿，十字摇匀法摇匀，放入37℃、5％CO2培养箱中培养，隔天换液；(2)细胞传代A.在显微镜下观察细胞融合至70％-80％时进行细胞传代。B.紫外灯照射消毒生物安全柜30min，70％酒精棉球擦拭桌面移液枪、离心管、以及拿进生物安全柜的物品。预热完全培养基、PBS、胰蛋白酶/EDTA至37℃。C.吸弃培养皿中的培养基，用PBS缓冲液洗涤细胞2次(勿直接冲打细胞)，吸除PBS；D.消化：培养皿中加入适量的0.25％EDTA-胰蛋白酶，以没过培养皿底为宜，在显微镜下观察细胞变圆、细胞间隙变大；或者肉眼见皿底见白色流沙样物质脱落，则消化完全(HaCaT细胞约3-5min)，加入含有10％胎牛血清培养基后终止消化；E.轻轻敲本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有抗炎和皮肤屏障保护作用的桉叶素联合糖皮质激素的复方制剂，其特征在于，包括桉叶素和糖皮质激素，所述桉叶素的浓度为0.5％～5％，所述糖皮质激素的浓度为0.01～2.5％。

【技术特征摘要】
1.一种具有抗炎和皮肤屏障保护作用的桉叶素联合糖皮质激素的复方制剂，其特征在于，包括桉叶素和糖皮质激素，所述桉叶素的浓度为0.5％～5％，所述糖皮质激素的浓度为0.01～2.5％。2.根据权利要求1所述的一种具有抗炎和皮肤屏...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶兴东，张怡，
申请(专利权)人：广州市皮肤病防治所广州市性病防治监测中心，
类型：发明
国别省市：广东,44