消痞和胃中药制剂中三七含量的HPLC测定方法技术

本发明专利技术公开了一种消痞和胃中药制剂中三七含量的HPLC测定方法。该方法包括：(1)对照品人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1及三七皂苷R1溶液的制备；(2)供试品消痞和胃中药制剂溶液的制备；(3)HPLC测定。本发明专利技术的方法操作简便、准确度高、专属性好、精密度和重现性良好，能保证消痞和胃中药制剂的质量稳定。

Determination of Notoginseng in Xiaopi Hewei Traditional Chinese Medicine by HPLC

【技术实现步骤摘要】
消痞和胃中药制剂中三七含量的HPLC测定方法
本专利技术涉及药物质量控制方法
，具体涉及一种消痞和胃中药制剂中三七含量的HPLC测定方法。
技术介绍
消痞和胃中药制剂主要是隔山消、刺梨叶、柳枝、三七按一定重量配比制备而成。理气和胃，消痞止痛。用于脾胃气滞所致的胃脘灼热胀痛，泛吐酸水，痞满嘈杂。消痞和胃中药制剂顾名思义就是用来消痞和胃的，因为消痞和胃中药制剂四种不同的中药成分共奏理气和胃，消痞止痛之功效。在临床试验上也证明消痞和胃中药制剂具有不错的治疗效果，比如消痞和胃中药制剂具有调节胃肠运动，促进胃排空的作用。试验证明：消痞和胃中药制剂临床和动物实验均未观察到明显毒副作用，服用消痞和胃中药制剂安全，临床疗效显著,具有推广应用价值。有关消痞和胃中药制剂的质量标准和质量控制方法，现有技术中的测量方法是测定人参皂苷Rg1(C42H72O14)和三七皂苷R1(C47H80O18)的总量，为三七有效成分中的两个目标物，而中药混合物药材中有可能某一个的有效成分含量高，某一个有效成分含量低，不能全面的体现三七药材的质量。目前尚未有统一成熟的标准，也尚未有关于消痞和胃中药制剂中三七含量控制的成熟做法，因此迫切需要一种能够快速、高效地测定消痞和胃中药制剂中三七活性成分含量的测定方法。
技术实现思路
本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题。为此，本专利技术的一个目的在于提出一种所需时间短、简单易行、鉴定结果客观准确的消痞和胃中药制剂中三七含量的检测方法。本专利技术的技术方案为，建立一种消痞和胃中药制剂中三七含量的HPLC测定方法，包括分别制备供试品溶液和对照品溶液，用高效液相色谱法测定，其特征在于：所述对照品：人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1及三七皂苷R1；所述色谱的条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.01-0.1％磷酸溶液为流动相B，A+B＝100％，采用梯度洗脱：0-35min，15-25％A，35-55min，19-29％A，55-60min，25-35％A，60-80min，29-40％A；检测波长为203nm±3nm；柱温：25-35℃。优选的，所述流动性B为0.05％磷酸溶液；所述检测波长为203nm；所述梯度洗脱为0-35min，19％A，35-55min，19-29％A，55-60min，29％A，60-80min，29-40％A。优选的，所述对照品溶液的制备方法为：称取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rb1对照品及三七皂苷R1对照品，加甲醇制成每lml含人参皂苷Rg10.4mg、人参皂苷Rb10.4mg、三七皂苷R10.lmg的混合溶液。优选的，所述供试品溶液的制备方法为：取消痞和胃中药制剂0.5～1.0g，精密称定，置烧瓶中，加人甲醇25ml，称定重量，放置过夜，加热回流2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液制成。优选的，所述柱温为30℃。优选的，所述高效液相色谱的进样量为10μl。本专利技术的有益效果：本专利技术人经过多次研究探索，探究了适于消痞和胃中药制剂中三七有效成分含量的HPLC测定方法，该测定方法操作简单，高效且省时，具有高精密度和重现性，因此其鉴定结果客观准确。本专利技术的方法测定人参皂苷Rg1(C42H72O14)、人参皂苷Rb1(C54H92O23)及三七皂苷R1(C47H80O18)的总量，比现有方法只测定其中的人参皂苷Rg1(C42H72O14)和三七皂苷R1(C47H80O18)的总量更能体现三七药材有效成分含量情况。附图说明图1为消痞和胃中药制剂空白溶剂的色谱图。图2为消痞和胃中药制剂阴性对照品的色谱图。图3为消痞和胃中药制剂供试品溶液的色谱图。图4为三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1对照品混合溶液的色谱图。图5为三七皂苷R1对照品的色谱图。图6为人参皂苷Rg1对照品的色谱图。图7为人参皂苷Rb1对照品的色谱图。图8为三七皂苷R1浓度与峰面积的线性关系图。图9为人参皂苷Rg1浓度与峰面积的线性关系图。图10为人参皂苷Rb1浓度与峰面积的线性关系图。具体实施方式以下配合图式及本专利技术的较佳实施例，进一步阐述本专利技术为达成预定专利技术目的所采取的技术手段。实施例1(1)精密称取三七皂苷R1对照品约10mg、人参皂苷Rg1对照品约40mg、人参皂苷Rb1对照品约40mg、置25ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取2.5ml置10ml的容量瓶中，加甲醇稀释至刻度；对照品来源信息见表1：表1对照品来源信息名称批号含量来源人参皂苷Rg1110703-20153091.7％中国食品药品检定研究院人参皂苷Rb1110704-20122395.9％中国食品药品检定研究院三七皂苷R1110745-20131894.0％中国食品药品检定研究院(2)取供试品消痞和胃胶囊1.0g，精密称定，置烧瓶中，精密加人甲醇25ml，称定重量，放置过夜，加热回流2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。上述供试品消痞和胃胶囊为中国专利技术专利公开号为CN1413712A所公开的消痞和胃胶囊。色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.05％磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为203nm；柱温：30℃。理论板数按三七皂苷R1峰计算应不低于6000。(3)分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪测定；上述实验的仪器与试剂信息见表2表2.实验仪器与试剂图1至图7为所测得的HPLC的色谱图，可以对照图3的供试品色谱图和其他对照品的色谱图，出峰效果良好。(4)用外标法以峰面积计算样品三七的含量；取所述消痞和胃胶囊样品3批分别进行测定，所检测的消痞和胃胶囊中的三七的平均含量为2.23mg/粒。实施例2实施例2同实施例1相同，其供试品溶液为改进后的消痞和胃胶囊，该消痞和胃胶囊制备方法如下：原料：隔山消120重量份，刺梨叶80重量份，柳枝60重量份和三七60重量份；步骤：先将上述各味中草药净选，将三七在60℃～80℃的温度下干燥后，粉碎成细粉、过筛备用；然后将隔山消、刺梨叶、柳枝加14倍量的水(8、6)煎煮二次：第一次1.5小时，第二次1小时，合并两次煎煮滤液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度1.20(50℃热测)的清膏；清膏中加入三七细粉，经真空干燥成干膏，粉碎成细粉，过80目筛，加微粉硅胶5-10g，装入胶囊，制成300粒，即得。供试品溶液消痞和胃胶囊溶液制备如下：取上述胶囊内容物，混匀，取约0.5g，置烧瓶中，精密加人甲醇25ml，称定重量，放置过夜，加热回流2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。实施例3实施例3同实施例1相同，其供试品溶液为消痞和胃颗粒，该消痞和胃颗粒制备方法如下：原料：隔山消120重量份，刺梨叶80重量份，柳枝60重量份，三七60重量份，步骤：先将上述各味中草药净选，将三七在60℃～80℃的温度下干燥后，粉碎成细粉、过筛备用；然后将隔山消、刺梨叶、柳枝加14倍量的水(8、6)煎煮二次：第一次1.5小时，第二次1小时，合并两次煎煮滤液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度1.20(50℃热测)的清膏；清膏中加入三七细粉搅拌均本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种消痞和胃中药制剂中三七含量的HPLC测定方法，包括分别制备供试品溶液和对照品溶液，用高效液相色谱法测定，其特征在于：所述对照品：人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1及三七皂苷R1；所述色谱的条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.01‑0.1％磷酸溶液为流动相B，A+B＝100％，采用梯度洗脱：0‑35min，15‑25％A，35‑55min，19‑29％A，55‑60min，25‑35％A，60‑80min，29‑40％A；检测波长为203nm±3nm；柱温：25‑35℃。

【技术特征摘要】
1.一种消痞和胃中药制剂中三七含量的HPLC测定方法，包括分别制备供试品溶液和对照品溶液，用高效液相色谱法测定，其特征在于：所述对照品：人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1及三七皂苷R1；所述色谱的条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.01-0.1％磷酸溶液为流动相B，A+B＝100％，采用梯度洗脱：0-35min，15-25％A，35-55min，19-29％A，55-60min，25-35％A，60-80min，29-40％A；检测波长为203nm±3nm；柱温：25-35℃。2.如权利要求1所述的HPLC测定方法，其特征在于，所述流动相B为0.05％磷酸溶液；所述检测波长为203nm；所述梯度洗脱为0-35min，19％A，35-55min，19-29％A，55-60min，2...

【专利技术属性】
技术研发人员：于泳，
申请(专利权)人：数源汇通北京医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11