侧流装置制造方法及图纸

提供了用于进行侧流试验的侧流装置，方法和试剂盒。

Side flow device

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】侧流装置本申请要求2017年1月27日提交的美国临时申请62/451,501的权益，该申请通过引用整体并入本文。
技术介绍
生物科学中经常使用检测固定的分析物的方法。例如，常规印迹(例如，Southern、Northern、Western、FarWestern、Eastern、真空、MiddleEastern、Eastern-Western和Far-Eastern印迹等)可用于检测固定在基材或膜上或基质中的分析物(例如，在琼脂糖或丙烯酰胺中)。一般而言，这类印迹技术涉及固定待检测的分析物和使分析物接触结合剂(例如，抗体)。印迹也通常在固定和最终检测之间包括多个洗涤步骤和/或封闭步骤。这类洗涤和封闭步骤消耗了实施者有限的时间和/或试剂，并且可以是误差和不可再现性的来源。
技术实现思路
本文提供了侧流试验装置及使用这类装置的方法。在一个实施方式中，所述侧流装置包括含有多孔材料的芯吸垫，所述芯吸垫具有用于接触基材(例如，Western印迹)的平面区域，所述基材包含固定的分析物(例如蛋白质)；并且其中，所述芯吸垫具有第一端，第二端和两个侧边缘；粘合到芯吸垫的第一平面的支撑层；粘合到芯吸垫的第二平面的顶层，顶层包括在空间上彼此分开的两个或更多个贮存器，其中每个贮存器的纵轴垂直于芯吸垫的侧边缘，其中每个贮存器与芯吸垫的第一端流体连通，并且其中每个贮存器包括孔，溶液通过该孔从贮存器释放；和泵，包括位于芯吸垫的第二端上的吸收垫。在一些实施方式中，芯吸垫还包括被疏水或不可渗透的阻隔彼此分开的两个或更多个区域，所述阻隔平行于芯吸垫的侧边缘。在一些实施方式中，芯吸垫的边缘用防水材料或热封密封。在某些实施方式中，防水材料选自丙烯酸，蜡和光聚合物。在某些实施方式中，顶层还包括第一开口，基材通过该第一开口与贮存器下游的芯吸垫的平面区域接触。在一些实施方式中，顶层还包括第二开口，泵通过该第二开口与在第一开口下游的芯吸垫的第二平面接触。在一些实施方式中，顶层包括开口，基材通过该开口与平面区域接触，并且泵通过该开口与平面区域下游的芯吸垫接触。在一些实施方式中，孔是狭槽。在一些实施方式中，贮存器包括在侧向流动装置的宽度轴上在空间上彼此分离并且彼此相邻的两组或更多组贮存器。在一些实施方式中，每个贮存器跨越芯吸垫的宽度。在一些实施方式中，至少第一贮存器与至少第二贮存器共用壁。在一些实施方式中，支撑层和顶层由液体不可渗透的材料形成。在某些实施方式中，液体不可渗透的材料选自聚丙烯，聚碳酸酯，聚苯乙烯，聚对苯二甲酸乙二醇酯和二醇改性的聚对苯二甲酸乙二醇酯。在一些实施方式中，分析物是蛋白质。还提供了进行侧流试验的方法。在一些实施方式中，该方法包括提供如上文或本文其他地方所述的侧流装置；可选地将运行缓冲液施加于芯吸垫；将包含蛋白质的基材(例如Western印迹)施加于平面区域以供基材的接触；从最靠近平面区域的贮存器开始，将不同的试剂溶液施加到每个贮存器上以供基材的施加；并且允许试剂溶液从贮存器侧流到泵，使得试剂溶液中的每种试剂在芯吸垫中依次运输并与基材上的蛋白质接触。在一些实施方式中，将不同的试剂溶液依次或同时施加于贮存器。在一些实施方式中，允许侧流的步骤包括使来自第一贮存器中的第一试剂溶液的一抗与基材上的靶蛋白(如果存在)结合，然后使来自第二贮存器中的第二试剂溶液的第一洗涤溶液从基材上除去未结合的一抗。在一些实施方式中，允许侧流的步骤还包括使来自第三贮存器中的第三试剂溶液的二抗或第二检测试剂接触与基材上的靶蛋白(如果存在)结合的一抗。在一些实施方式中，允许侧流的步骤还包括使来自第四贮存器中的第四试剂溶液的第二洗涤溶液从基材去除未结合的二抗。在一些实施方式中，第二洗涤溶液的体积是具有二抗的第三试剂溶液的体积的至少两倍。在某些实施方式中，该方法进一步包括在一抗与靶蛋白(如果存在)结合，任选地在二抗或第二检测试剂与一抗接触后，任选地移出基材，并检测一抗与靶蛋白(如果存在)的结合。在某些实施方式中，该方法还包括向泵施加基本均匀的压力。还提供了用于进行侧流的试剂盒。在一些实施方式中，该试剂盒包含上述或本文其它地方所述的侧流装置。在一些实施方式中，所述试剂盒包括多个用作泵的吸收垫，所有这些都在本文中描述。在一些实施方式中，试剂盒包括以待被最终用户施用于贮存器的溶液的形式而提供的试剂(例如，包括标记的一抗或一抗和二抗的结合剂、洗涤溶液和/或运行缓冲液)。在某些实施方式中，将一些或所有试剂在与装置的每个贮存器流体连通的芯吸垫的部分中干燥到芯吸垫上。在一些实施方式中，所述试剂盒还包括用于进行侧流的运行缓冲液，并且任选地包括封闭剂(例如，牛血清白蛋白、脱脂奶粉或酪蛋白)、表面活性剂(例如，吐温20或曲通X-100)、本文所述的蛋白质聚集改性剂、大分子拥挤剂(例如，葡聚糖、聚乙二醇和/或Ficoll)、密度剂和/或促进试剂均匀流动和/或促进对基材上的分子的反应并使基材上的背景最小化的试剂。另外的试剂可以以固体或液体形式提供在试剂盒中。在一些实施方式中，试剂盒还包括用来进行本文所述方法的说明。附图说明图1A和1B分别是根据一个实施方式的侧流装置的示意性截面侧视图和俯视图。该装置包括四个贮存器，其依次将试剂溶液运输到芯吸垫，该芯吸垫粘合到支撑件和四个贮存器。所示装置在贮存器下游的顶层中具有两个开口。图2A和2B分别是图1A和1B所示装置的示意性截面侧视图和俯视图，其中基材和泵与芯吸垫紧密接触。通过第一开口将基材施加到芯吸垫上，并且通过第一开口下游的第二开口将泵施加到芯吸垫上。图3A，3B和3C是根据一个实施方式的侧流装置的示意性截面侧视图和俯视图。在该实施方式中，顶层部分地覆盖芯吸垫，即，唯具有贮存器的顶层的部分覆盖并粘合到芯吸垫。在贮存器的下游，即在其上施加基材和泵的平面区域中不存在顶层。图3A显示了具有与芯吸垫紧密接触的泵和基材的装置。图3B和3C显示了没有施加到芯吸垫的泵或基材的装置。图4是根据一个实施方式的侧流装置的示意性俯视图，该侧流装置具有多组贮存器，使得可以同时分析多个基材。所示装置具有多个基材，其与多组贮存器下游的芯吸垫紧密接触。该装置还显示带泵，其与基材下游的芯吸垫紧密接触。图5是根据一个实施方式的侧流装置的示意性俯视图，该侧流装置具有多组贮存器，使得可以同时分析多个基材。在该实施方式中，芯吸垫包括被疏水或不可渗透的阻隔彼此分开的两个或更多个区域，所述阻隔平行于芯吸垫的侧边缘。所示装置具有多个基材，其与处于多组贮存器下游且被阻隔彼此分开的芯吸垫紧密接触。该装置还显示带泵，其与基材下游的芯吸垫紧密接触。图6A和6B是使用图1A-2B的侧流装置并如实施例1中所述的免疫印迹结果。具体实施方式本文描述了侧流装置和使用这类装置的方法，其允许使用特异性结合剂(例如抗体)对固定在基材(例如Western印迹膜)或芯吸垫(例如诊断应用)上的分析物(例如蛋白质，核酸)进行高效侧流检测。本文描述的装置和方法还允许对由固定在基材上的特异性结合剂捕获的分析物进行高效侧流检测。已经发现了侧流装置和使用这种装置的方法，其将不同溶液(例如，具有一种或多种分析物的样品、特异性结合剂、运行缓冲液、洗涤溶液)依次地且免手动地递送到与其上固定有分析物或结合剂的基材紧密接触的芯吸垫。将溶液从本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种侧流装置，其包括：包含多孔材料的芯吸垫，所述芯吸垫具有用于接触包含固定的分析物的基材的平面区域；并且其中，所述芯吸垫具有第一端、第二端和两个侧边缘；粘合到所述芯吸垫的第一平面的支撑层；粘合到所述芯吸垫的第二平面的顶层，顶层包括在空间上彼此分开的两个或更多个贮存器，其中每个贮存器的纵轴垂直于所述芯吸垫的侧边缘，其中每个贮存器与所述芯吸垫的第一端流体连通，并且其中每个贮存器包括孔，溶液通过该孔从贮存器释放；和泵，包括位于接触所述芯吸垫的第二端的吸收垫。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2017.01.27 US 62/451,5011.一种侧流装置，其包括：包含多孔材料的芯吸垫，所述芯吸垫具有用于接触包含固定的分析物的基材的平面区域；并且其中，所述芯吸垫具有第一端、第二端和两个侧边缘；粘合到所述芯吸垫的第一平面的支撑层；粘合到所述芯吸垫的第二平面的顶层，顶层包括在空间上彼此分开的两个或更多个贮存器，其中每个贮存器的纵轴垂直于所述芯吸垫的侧边缘，其中每个贮存器与所述芯吸垫的第一端流体连通，并且其中每个贮存器包括孔，溶液通过该孔从贮存器释放；和泵，包括位于接触所述芯吸垫的第二端的吸收垫。2.如权利要求1所述的装置，其中所述孔是狭槽。3.如权利要求1或2所述的装置，其中所述贮存器包括在侧流装置的宽度轴上在空间上彼此分离并且彼此相邻的两组或更多组贮存器。4.如权利要求3所述的装置，其中所述芯吸垫还包括被疏水或不可渗透的屏障彼此分开的两个或更多个区域，所述屏障平行于芯吸垫的侧边缘。5.如权利要求1-4中任一项所述的装置，其中所述顶层还包括第一开口，基材通过所述第一开口与贮存器下游的芯吸垫的平面区域接触。6.如权利要求5所述的装置，其中所述顶层还包括第二开口，泵通过该第二开口与在第一开口下游的芯吸垫的第二平面接触。7.如权利要求1-6中任一项所述的装置，其中所述顶层包括开口，基材通过该开口与平面区域接触，并且泵通过该开口与平面区域下游的芯吸垫接触。8.如权利要求1-7中任一项所述的装置，其中所述支撑层和所述顶层由液体不可渗透的材料形成。9.如权利要求8所述的装置，其中所述液体不可渗透的材料选自聚丙烯，聚碳酸酯，聚苯乙烯，聚对苯二甲酸乙二醇酯和二醇改性的聚对苯二甲酸乙二醇酯。10.如权利要求1-9中任一项所述的装置，其中所述芯吸垫的边缘用防水材料或热封密封。11.如权利要求10所述的装置，其中所述防水材料选自丙烯酸，蜡和光聚合物。12.如权利要求1-11中...

【专利技术属性】
技术研发人员：W·斯特朗，C·T·麦基，
申请(专利权)人：生物辐射实验室股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US