结合共刺激性和检查点受体的双特异性免疫调节抗体制造技术

本发明专利技术涉及双特异性异二聚体免疫调节抗体。

Bispecific immunoregulatory antibodies binding to costimulatory and checkpoint receptors

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】结合共刺激性和检查点受体的双特异性免疫调节抗体相关申请交叉引用本申请要求于2016年8月30日提交的美国临时专利申请62/381,239、2017年2月7日提交的美国临时专利申请62/456,033、2017年3月31日提交的美国临时专利申请62/479,723和2017年6月14日提交的美国专利申请15/623,314的优先权，它们的内容明确地通过引用整体并入。序列表本申请包含序列表，所述序列表已经以ASCII格式电子提交，并且其全部内容通过引用并入本文。2017年8月29日创建的所述ASCII拷贝命名为067461_5198-WO_SL.txt，大小为26,061,282千字节。
技术介绍
由于抑制性免疫检查点如PD-1和CTLA-4的上调，肿瘤反应性T细胞随时间丧失其细胞毒性能力。正在寻求两种平行的治疗策略来去抑制肿瘤反应性T细胞，以便它们可以继续杀死肿瘤细胞。第一种方法是免疫的免疫调节阻断，其是通过与免疫调节本身(PD-1、CTLA-4等)或其配体(PD-L1、PD-L2、CD80、CD86等)结合的拮抗性单克隆抗体进行治疗，从而去除抑制肿瘤反应性T细胞免受肿瘤细胞杀伤的抑制信号。免疫调节受体如CTLA-1、PD-1(程序性细胞死亡1)、TIM-3(T细胞免疫球蛋白和粘蛋白结构域3)、LAG-3(淋巴细胞活化基因3)、TIGIT(具有Ig和ITIM结构域的T细胞免疫受体)和其他，抑制T细胞和其他细胞类型的活化、增殖和/或效应活性。在免疫调节受体抑制对肿瘤细胞的内源性T细胞反应的假设指导下，抗-CTLA4和抗PD1抗体(包括纳武单抗(nivolumab)、派姆单抗(pembrolizumab)、伊匹单抗(ipilimumab)和曲美单抗(tremelimumab))的临床前和临床研究确实证明了免疫调节阻断导致令人印象深刻的抗肿瘤反应、刺激内源性T细胞攻击肿瘤细胞、导致一小部分各种恶性肿瘤患者长期癌症缓解。不幸的是，只有一部分患者对这些疗法有反应，取决于适应症和其他因素，每种单一疗法的反应率一般在10％至30％之间，有时甚至更高。用于去抑制肿瘤反应性T细胞的第二种方法是通过用结合诸如ICOS的共刺激蛋白的激动性抗体进行T细胞共刺激，从而添加阳性信号以克服免疫检查点的阴性信号传导。因此，本专利技术涉及结合共刺激受体(例如ICOS、GITR、OX40、4-1BB)以及检查点受体(例如PD-1、PD-L1、CTLA-4、LAG-3、TIM-3、BTLA和TIGIT)的双特异性抗体。
技术实现思路
因此，在一个方面，本专利技术提供双特异性抗体，其单价结合人共刺激受体并单价结合人检查点受体，用于激活T细胞以治疗癌症。在某些方面，共刺激受体选自ICOS、GITR、OX40和4-1BB。在另外的方面，检查点受体选自PD-1、PD-L1、CTLA-4、LAG-3、TIGIT和TIM-3。在进一步的方面，抗体结合选自以下的抗原对：ICOS和PD-1、ICOS和CTLA-4、ICOS和LAG-3、ICOS和TIM-3、ICOS和PD-L1、ICOS和BTLA、ICOS和TIGIT、GITR和TIGIT、GITR和PD-1、GITR和CTLA-4、GITR和LAG-3、GITR和TIM-3、GITR和PD-L1、GITR和BTLA、OX40和PD-1、OX40和TIGIT、OX40和CTLA-4、ICOX40OS和LAG-3、OX40和TIM-3、OX40和PD-L1、OX40和BTLA、4-1BB和PD-1、4-1BB和CTLA-4、4-1BB和LAG-3、4-1BB和TIM-3、4-1BB和PD-L1、TIGIT和4-1BB以及4-1BB和BTLA。在另外的方面，双特异性抗体具有选自图2中概述的那些的形式。在其他方面，本专利技术提供了异二聚体抗体，其包含：a)第一重链，第一重链包含第一Fc结构域、任选的结构域接头和第一抗原结合结构域，第一抗原结合结构域包含结合第一抗原的scFv；b)第二重链，其包含的重链包含重链恒定结构域，所述重链恒定结构域包含第二Fc结构域、铰链结构域、CH1结构域和可变重结构域；和c)包含可变轻结构域和轻链恒定结构域的轻链；其中所述可变重结构域和所述可变轻结构域形成结合第二抗原的第二抗原结合结构域，其中所述第一和第二抗原结合结构域的一个结合人ICOS而另一个结合人PD-1。另一方面，本专利技术提供了异二聚体双特异性抗体，其包含：a)第一重链，其包含：i)第一变体Fc结构域；和ii)结合第一抗原的单链Fv区(scFv)，其中所述scFv区包含第一可变重链、可变轻链和带电荷的scFv接头，其中所述带电荷的scFv接头共价连接所述第一可变重链和所述可变轻链；和b)包含VH-CH1-铰链-CH2-CH3单体的第二重链，其中VH是第二可变重链，CH2-CH3是第二变体Fc结构域；以及c)轻链；其中所述第二变体Fc结构域包含氨基酸取代N208D/Q295E/N384D/Q418E/N241D，其中所述第一和第二变体Fc结构域各自包含氨基酸取代E233P/L234V/L235A/G236del/S267K；并且其中所述第一变体Fc结构域包含氨基酸取代S364K/E357Q，第二变体Fc结构域包含氨基酸取代L368D/K370S，其中所述第一和第二抗原结合结构域的一个结合人ICOS，另一个结合人PD-1，并且其中编号是根据Kabat中的EU索引。在一些方面，异二聚体抗体具有第一和第二变体Fc结构域，每个Fc结构域包含M428L/N434S。另一方面，本专利技术提供了异二聚体抗体，其包含：a)第一重链，其包含：i)第一变体Fc结构域；和ii)结合第一抗原的单链Fv区(scFv)，其中所述scFv区包含第一可变重链、可变轻链和带电荷的scFv接头，其中所述带电荷的scFv接头共价连接所述第一可变重链和所述可变轻链；和b)包含VH-CH1-铰链-CH2-CH3单体的第二重链，其中VH是第二可变重链，CH2-CH3是第二变体Fc结构域；c)轻链；其中所述第一和第二变体Fc结构域包括一组异源二聚变体，其选自L368D/K370S：S364K/E357Q；L368D/K370S：S364K；L368E/K370S：S364K；T411E/K360E/Q362E：D401K；和T366S/L368A/Y407V：T366W，并且其中所述第一和第二抗原结合结构域的一个结合人ICOS而另一个结合人PD-1，并且其中编号是根据如Kabat中的EU索引。在另一方面，本专利技术提供了包含编码本专利技术的异二聚体抗体的核酸的核酸组合物、包含所述核酸的表达载体组合物、和包含所述表达载体组合物的宿主细胞。另一方面，本专利技术提供了用于激活T细胞以治疗癌症的异二聚体抗体。附图说明图1呈现从TheCancerGenomeAtlas(TCGA)汇编的PD-1和T细胞共刺激受体对于膀胱癌、乳腺癌、结肠癌、头颈部癌、肾癌、肺腺癌、肺鳞状癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌和黑色素瘤的表达数据(RNAseqV2RSEM)。计算针对T细胞共刺激受体的PD-1的Pearson相关系数的平方。图2A至O描绘本专利技术的双特异性抗体的几种形式。第一种是“开瓶器”形式，具有第一和第二抗-抗原结合结构本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种双特异性抗体，其单价结合人共刺激受体并单价结合人检查点受体，用于激活T细胞以治疗癌症。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.08.30 US 62/381,239;2017.02.07 US 62/456,033;1.一种双特异性抗体，其单价结合人共刺激受体并单价结合人检查点受体，用于激活T细胞以治疗癌症。2.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其中所述共刺激受体选自ICOS、GITR、OX40和4-1BB。3.根据权利要求1或2所述的双特异性抗体，其中所述检查点受体选自PD-1、PD-L1、CTLA-4、LAG-3和TIM-3。4.根据权利要求1、2或3所述的双特异性抗体，其中所述共刺激受体是人ICOS。5.根据权利要求4所述的双特异性抗体，其中所述抗体结合ICOS和PD-1。6.根据权利要求4所述的双特异性抗体，其中所述抗体结合ICOS和PD-L1。7.根据权利要求4所述的双特异性抗体，其中所述抗体结合ICOS和CTLA-4。8.根据权利要求4所述的双特异性抗体，其中所述抗体结合ICOS和LAG-3。9.根据权利要求4所述的双特异性抗体，其中所述抗体结合ICOS和TIM-3。10.根据任一前述权利要求所述的双特异性抗体，其中所述抗体具有图2A的形式。11.根据任一前述权利要求所述的双特异性抗体，其中所述抗体具有图2E的形式。12.根据任一前述权利要求所述的双特异性抗体，其中所述抗体具有图2F的形式。13.根据任一前述权利要求所述的双特异性抗体，其中所述抗体具有图2G的形式。14.根据权利要求5所述的双特异性抗体，其中所述抗体包括：a)具有SEQIDNO：26642的第一序列；b)具有SEQIDNO：26657的第二序列；和c)具有SEQIDNO：26647的第三序列。15.一种异二聚体抗体，其包括：a)第一重链，其包含第一Fc结构域、任选的结构域接头和包含结合第一抗原的scFv的第一抗原结合结构域；b)包含重链的第二重链，所述重链包含重链恒定结构域，所述重链恒定结构域包含第二Fc结构域、铰链结构域、CH1结构域和可变重结构域；和c)包含可变轻结构域和轻链恒定结构域的轻链；其中所述可变重结构域和所述可变轻结构域形成结合第二抗原的第二抗原结合结构域，其中所述第一和第二抗原结合结构域的一个结合人ICOS而另一个结合人PD-1。16.一种异二聚体抗体，其包括：a)第一重链，其包括：i)第一变体Fc结构域；和ii)结合第一抗原的单链Fv区(scFv)，其中所述scFv区包含第一可变重链、可变轻链和带电荷的scFv接头，其中所述带电荷的scFv接头共价连接所述第一可变重链和所述可变轻链；和b)包含VH-CH1-铰链-CH2-CH3单体的第二重链，其中VH是第二可变重链，CH2-C...

【专利技术属性】
技术研发人员：M·博尔奈特，G·莫尔，J·德斯加尔莱斯，M·海德瓦特，C·邦松，
申请(专利权)人：XENCOR股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US