一种果汁饮料中20种有机胺、生物胺和阳离子同时测定的方法技术

本发明专利技术公开了一种果汁饮料中20种有机胺、生物胺和阳离子同时测定的方法属于分析化学领域,本发明专利技术采用电导抑制‑离子色谱法，在多级梯度淋洗条件下，通过研究多种实验影响因素，优化实验测定条件，建立了果汁饮料中20种有机胺、生物胺和阳离子（甲胺、二甲胺、三甲胺、二乙醇胺、丁胺、组胺、尸胺、腐胺、胍丁胺、庚二胺、亚精胺、精胺、Li

A Simultaneous Method for the Determination of 20 Organic Amines, Biogenic Amines and Cations in Fruit Juice Beverages

【技术实现步骤摘要】
一种果汁饮料中20种有机胺、生物胺和阳离子同时测定的方法
本专利技术属于分析化学领域，具体涉及一种果汁饮料中20种有机胺、生物胺和阳离子同时测定的方法。
技术介绍
生物胺，是一类含氮的脂肪族或杂环类中低分子量的有机化合物，在水产品、蔬菜、啤酒、葡萄酒等多种食品中广泛存在。生物胺不仅是生成荷尔蒙、核酸、蛋白质的前体物质，也是生成致癌物质亚硝基化合物的前体物质，适量摄入生物胺能够有效调节机体内的生理活动，例如适量摄入亚精胺，可延缓记忆力减退，阻止老年痴呆病发病；但某些生物胺摄入过量会使人体产生头疼、腹部痉挛等不良生理反应，严重时可能危及生命。有机胺是易溶于水的一类有毒有害的有机化合物，目前随着有机胺的广泛应用，其污染状况不断增加，科学准确监测食品中有机胺的含量，显得格外重要。阳离子对调节人体电解质平衡、改善造血、促进骨骼生长等起到重要作用，但食品中某些阳离子超过限量会对人体产生严重危害。显而易见，同时测定食品中多种有机胺、生物胺和阳离子具有重要的现实意义。果汁饮料是人们日常生活中常见的饮品，某些果汁在生产或后期保存、储运过程中易生成生物胺，从而影响产品质量、危害人体健康；果汁生产时所用的水质质量监控不到位或使用的添加剂质量不高，同样会引入某些有毒有害的有机胺和阳离子。建立果汁中多种有机胺、生物胺和阳离子快速测定的方法，可为果汁的生产加工、质量监控、掺假辨别等提供强有力的技术支持。目前，有机胺和生物胺常用检测方法有气相色谱法、液相色谱法、液相色谱-串联质谱法、安培检测-离子色谱法等。当前主要采用液相色谱法，但多数生物胺缺少荧光基团，需柱前或柱后衍生才能检测，衍生步骤会耗时、耗力、耗材，同时易引入副产物产生干扰，存在定量不准确的不足。而目前食品中常见阳离子的测定方法主要有离子色谱法、电感耦合等离子体法(ICP)、电泳法等。但是ICP法和电泳法存在干扰较大，稳定性和灵敏度较差等问题，且存在前处理及操作步骤复杂等不足。因此，为提高检测工作质量和效率，迫切需要研究并创建一种快速、灵敏、准确的食品中多种有机胺、生物胺和阳离子同时测定的技术方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对上述现有技术的不足，提供了一种果汁饮料中20种有机胺、生物胺和阳离子同时测定的方法，本专利技术采用电导抑制-离子色谱法，在多级梯度淋洗条件下，通过研究多种实验影响因素，优化实验测定条件，建立了果汁、饮料中20种有机胺、生物胺和阳离子（甲胺、二甲胺、三甲胺、二乙醇胺、丁胺、组胺、尸胺、腐胺、胍丁胺、庚二胺、亚精胺、精胺、Li+、Na+、NH4+、K+、Mg2+、Ca2+、Sr2+、Ba2+）同时测定的方法，此方法快速、简便、灵敏度高、稳定性好，实现了快速分析、绿色分析、多组分同时分析的目标。为达到上述目的，本专利技术公开了一种果汁饮料中20种有机胺、生物胺和阳离子同时测定的方法，其测定步骤如下；步骤一、配制标准混合工作液：准备离子浓度均为1000mg/L的Li+、Na+、NH4+、K+、Mg2+、Ca2+、Sr2+、Ba2+标准溶液，浓度均为1000mg/L的甲胺、二甲胺标准溶液，浓度为2000mg/L的三甲胺标准溶液和纯度≥97%的二乙醇胺、丁胺、组胺、尸胺、腐胺、胍丁胺、庚二胺、亚精胺、精胺的标准物质；依次将有机胺、生物胺的标准物质或者溶液全部配置成质量浓度为1000mg/L的标准溶液，使用时移取一定量有机胺、生物胺和阳离子标准溶液用去离子水配成标准混合储备液，根据需要用去离子水稀释成一定浓度的标准混合工作液，在4℃避光冷藏保存，现配现用；步骤二、样品前处理：准确取果汁饮料待检样品2.00g，加入去离子水约80mL，摇匀静置15min，调节稀释液pH值至弱酸性，全部转移至100mL容量瓶中，采用去离子水定容至刻度，摇匀、静置15min，取10.0mL溶液，先过0.22μm水相滤膜，再过已预活化的RP柱，弃去前3mL，收集清液，待上机检测；其中RP柱的预活化过程为依次过10mL甲醇、15mL去离子水，静置30min；步骤三、离子色谱条件：离子色谱仪：DionexICS5000+型离子色谱仪；色谱分离柱：DionexIonPacTMCS18（2×250mm）；保护柱：DionexIonPacTMCG18（2×50mm）；电导抑制器：CERS500e_2mm；流动相：甲磺酸（MSA）-去离子水多级梯度淋洗液；流速：0.25mL/min；色谱柱温度：40℃；进样量：25μL；Milli-Q超纯水仪；超纯水（电阻率18.2MΩ.cm）；步骤四、多级梯度淋洗条件：多级梯度淋洗程序为：0.0-5.0min时，淋洗液甲磺酸浓度为1.75mmol/L；5.0-13.0min，淋洗液甲磺酸浓度为1.75-2.25mmol/L；13.0-27.0min，淋洗液甲磺酸浓度为2.25-12.0mmol/L；27.0-40.0min，淋洗液甲磺酸浓度为12.0mmol/L；40.0-45.0min，淋洗液甲磺酸浓度为12.0-40.0mmol/L；45.0-52.0min，淋洗液甲磺酸浓度为40.0mmol/L；52.0-55.0min，淋洗液甲磺酸浓度为40.0-1.75mmol/L；55.0-60.0min，淋洗液甲磺酸浓度为1.75mmol/L。步骤五、校准曲线绘制：将步骤一中配置的标准混合工作溶液，按照步骤三、步骤四给出的色谱分析条件进行上机检测，以待测组分质量浓度为横坐标，以待测组分峰面积为纵坐标，来绘制校准曲线，外标法定量；步骤六、样品溶液的检测：将步骤二中所得清液按照步骤三、步骤四给出的色谱分析条件进行上机检测，并计算结果；步骤七、结果计算：通过步骤五标准混合工作溶液所测得的结果来校正步骤六所得计算结果，从而计算出所测果汁中各组分含量。作为优选，所述步骤二中用盐酸和氢氧化钠溶液调节样品溶液的pH值至3.4～4.5。上述测定方法步骤三中的色谱柱温度为40℃，柱温的改变，直接引起组分的保留时间和色谱峰高发生改变。柱温的升高，会一定程度地提高色谱柱内离子交换速率，有利于提高柱效，缩短分析时间，保留时间变小，但降低了分离选择性，不利于组分间的分离。从提高分析速率角度考虑，一般会选择较高的柱温，而从提高分离效果角度上考虑，应该选用较低的柱温，因此，综合考虑分离度、灵敏度、选择性等多种影响因素，选择在40℃柱温下进行测定分析。上述测定方法步骤四中的淋洗液的流速为0.25mL/min，在这个流速下的初始压力为12.0MPa，压力适中不仅可以保证系统的安全性，还能避免某些连接处出现漏液等情况，从而可以提高分离度、缩短检测时间、保持色谱系统稳定性。将20种有机胺、生物胺和阳离子组分同时分离，本身就是一项技术难度高的分析实验，经过实验证实，在等度梯度条件下不能实现20种组分的有效分离，为提高检测灵敏度和色谱峰分离度，先后根据不同淋洗时间段、不同淋洗浓度进行60多次多级梯度淋洗实验研究分析，最终通过对比总体分离效果选取了表1中多级梯度淋洗条件，从表1中可以看出，色谱分离梯度淋洗时间分为6段（0.0-5.0min、5.0-13.0min、13.0-27.0min、27.0-40.0min、40.0-45.0min、45.0-52.0min），初始淋洗浓度是整个梯度淋洗程序的基础，对本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种果汁饮料中20种有机胺、生物胺和阳离子同时测定的方法，其特征在于包括以下步骤：步骤一、配制标准混合工作液：准备离子浓度均为1000 mg/L的Li

【技术特征摘要】
1.一种果汁饮料中20种有机胺、生物胺和阳离子同时测定的方法，其特征在于包括以下步骤：步骤一、配制标准混合工作液：准备离子浓度均为1000mg/L的Li+、Na+、NH4+、K+、Mg2+、Ca2+、Sr2+、Ba2+标准溶液，浓度均为1000mg/L的甲胺、二甲胺标准溶液，浓度为2000mg/L的三甲胺标准溶液和纯度≥97%的二乙醇胺、丁胺、组胺、尸胺、腐胺、胍丁胺、庚二胺、亚精胺、精胺的标准物质；依次将有机胺、生物胺的标准物质或者溶液全部配置成质量浓度为1000mg/L的标准溶液，使用时移取一定量有机胺、生物胺和阳离子标准溶液用去离子水配成标准混合储备液，根据需要用去离子水稀释成一定浓度的标准混合工作液，在4℃避光冷藏保存，现配现用；步骤二、样品前处理：准确取果汁饮料待测样品2.00g，加入去离子水约80mL，摇匀静置15min，调节稀释液pH值至弱酸性，全部转移至100mL容量瓶中，采用去离子水定容至刻度，摇匀、静置15min，取10.0mL溶液，先过0.22μm水相滤膜，再过已预活化的RP柱，弃去前3mL，收集清液，待上机检测；其中RP柱的预活化过程为依次过10mL甲醇、15mL去离子水，静置30min；步骤三、离子色谱条件：离子色谱仪：DionexICS5000+型离子色谱仪；色谱分离柱：DionexIonPacTMCS18（2×250mm）；保护柱：DionexIonPacTMCG18（2×50mm）；电导抑制器：CERS500e_2mm；流动相：甲磺酸（MSA）...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋卫得，苏征，鞠玲燕，朱万燕，林令海，张传杰，
申请(专利权)人：日照海关综合技术服务中心，
类型：发明
国别省市：山东,37