具有降解DEHP功能的假单胞菌Pseudomonas sp.9-8③制造技术

本发明专利技术提供一种假单胞菌Pseudomonas sp.9‑8③，所述Pseudomonas sp.9‑8③具有降解土壤中DEHP的功能，尤其是联合蚯蚓和/或蚓粪时，具有更好的降解效果。

Pseudomonas sp.9-83 with DEHP-degrading function

【技术实现步骤摘要】
具有降解DEHP功能的假单胞菌Pseudomonassp.9-8③
本专利技术涉及一种具有降解DEHP功能的假单胞菌Pseudomonassp.9-8③。
技术介绍
土壤是经济社会可持续发展的物质基础，关系人民群众身体健康，关系美丽中国建设，保护好土壤环境是推进生态文明建设和维护国家生态安全的重要内容。近年来，随着工业化和城镇化的快速发展，我国土壤污染日趋严重。2014年环保部和国土资源部发布的《全国土壤污染状况调查公报》显示我国耕地土壤环境质量堪忧，19.4％的耕地点位超标，污染耕地面积达到2.3×107hm2。土壤污染已严重危害我国农田土壤环境质量和农产品安全。塑化剂是在工业生产上被广泛使用的高分子材料助剂，又称增塑剂。邻苯二甲酸酯类(PAEs)是塑化剂的主体，其产量约占塑化剂总产量的80％，其在环境介质中的残留量不断累积，已成为全球性的普遍污染物。而DEHP(邻苯二甲酸-2(乙基己基)酯)使用量超过了PAEs的九成。DEHP与塑料基质分子间仅以氢键或范德华力相连，极易从塑料制品中泄露出来，不断地释出至大气、土壤和水域中，造成对环境的危害，从而对人类健康造成潜在威胁。目前，塑化剂已成为地球上最为广泛的环境污染物，许多国家的大气、湖泊、河流和土壤中已检测出不同浓度的塑化剂，已成为土壤中最常被检出的有机污染物。塑化剂的毒性主要体现在遗传毒性、胚胎发育毒性、生殖毒性、神经毒性和免疫毒性等。鉴于DEHP对土壤污染的严重性和危害性，其污染土壤修复技术引起了全球普遍关注。目前，微生物修复技术是一种公认的有效、安全、廉价和无二次污染的方法。但是，DEHP污染土壤的微生物修复技术在实施中面临诸多限制因素：一是外源接种微生物在土壤环境中适应性差，活性低，迁移性差：二是在土壤多相多界面的复杂体系中，具有疏水亲脂的氯代芳烃和酶蛋白易被有机团聚体等吸附和固定，降低溶解度、生物有效性和反应接触。但是相较于物理、化学等其他方法来说，研究一种低成本、环境友好的生物驱动技术提高微生物的降解效率成为污染土壤原位修复的重要内容。蚯蚓作为土壤动物的典型代表，占据着陆地生态系统生物量的主要部分，有着“生态系统工程师”的美誉。蚯蚓广泛分布在世界各地，具有极强的环境适应能力和繁殖能力，对污染胁迫有较高的耐性、生物累积性和抗性。已有研究表明，蚯蚓活动对土壤的影响有助于土壤污染物如重金属钝化，农药、多环芳烃、多氯联苯的去除。但其对有机污染物的降解转化的影响还与土壤类型、污染物种类和蚯蚓种类有关。微生物在降解有机污染物中起着举足轻重的作用，所以向污染土壤中加入蚯蚓有助于有机污染物的降解。通常实验室筛选出来的的高效降解菌，迁移和扩散能力差，定殖能力受限。但是蚯蚓在土壤塑化剂，特别是邻苯二甲酸酯类污染修复中的作用报道非常有限，需要进一步研究。
技术实现思路
鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种具有降解DEHP功能的假单胞菌Pseudomonassp.9-8③，用于解决现有技术中DEHP降解困难的问题。本专利技术的一方面提供了一种假单胞菌Pseudomonassp.9-8③，所述假单胞菌Pseudomonassp.9-8③的保藏编号为CCTCCNO：M2019158。本菌株为专利技术人在上海农田土壤中筛选得到。该菌株已于2019年3月15日在中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)注册保藏，保藏号为CCTCCNO：M2019158。该菌株于2018年12月送交浙江大学嗜极微生物实验室进行形态特征鉴定，鉴定结果为：形态特征：30℃培养箱培养2-3天，菌落体积小，呈圆形凸起，边缘规则，半透明黄色，表面光滑；革兰氏染色阴性；菌体为长杆状，大小为(0.86～3.95)μm×(0.25～0.61)μm。生理特性：糖发酵和接触酶试验阳性；酯酶(C4)，酯酶脂肪酶(C8)，亮氨酸芳胺酶，naphthol-AS-BI-phosphohydrolase均呈阳性；可还原硝酸盐，精氨酸双水解酶，脲酶，β-葡萄糖苷水解酶，蛋白水解酶，β-半乳糖苷酶均为阳性。经形态学鉴定和16srRNA扩增序列发育树分析，确定该菌株为假单胞菌，按照国际命名规则：属名+种名+株名对该菌株进行命名，命名为Pseudomonassp.9-8③。进一步地，所述假单胞菌Pseudomonassp.9-8③的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。进一步地，所述假单胞菌Pseudomonassp.9-8③具有降解DEHP的功能。本专利技术的另外一个方面提供了上述假单胞菌Pseudomonassp.9-8③用于降解DEHP的用途。本专利技术的另外一个方面提供了上述假单胞菌Pseudomonassp.9-8③在制备具有降解DEHP功能的组合物中的应用。本专利技术的另外一个方面提供了假单胞菌Pseudomonassp.9-8③在制备农业制剂中的应用，所述农业制剂具有降解DEHP的作用。进一步地，所述农业制剂可以是专门用于降解DEHP的制剂，或者同时还具有其他功能的制剂。本专利技术另外一个方面提供蚯蚓在降解DEHP中的应用。蚯蚓，Pheretima，寡毛纲Oligochaeta，单向蚯亚目。进一步地，所述蚯蚓为威廉环毛蚓，Pheretimaguillelmi(Michaelsen,1895)。本专利技术的另外一个方面提供了蚯蚓在制备具有降解DEHP功能的组合物中的应用。本专利技术的另外一个方面提供了蚯蚓在制备农业制剂中的应用，所述农业制剂具有降解DEHP的作用。进一步地，所述农业制剂可以是专门用于降解DEHP的制剂，或者同时还具有其他功能的制剂。本专利技术的另外一个方面提供了蚓粪在降解DEHP中的应用。本专利技术的另外一个方面提供了蚓粪在制备具有降解DEHP功能的组合物中的应用。本专利技术的另外一个方面提供了蚓粪在制备农业制剂中的应用，所述农业制剂具有降解DEHP的作用。进一步地，所述农业制剂可以是专门用于降解DEHP的制剂，或者同时还具有其他功能的制剂。进一步地，所述蚓粪是产自威廉环毛蚓。本专利技术的另外一个方面提供了一种具有降解DEHP功能的组合物，所述组合物中含有假单胞菌Pseudomonassp.9-8③。本专利技术的另外一个方面提供了一种具有降解DEHP功能的农业制剂，所述农业制剂中含有假单胞菌Pseudomonassp.9-8③和载体。所述载体可以为本领域常用的载体。进一步地，所述农业制剂或组合物中还含有蚓粪和/或蚯蚓。本专利技术的另外一个方面提供了上述农业制剂或组合物的制备方法，所述方法包括将各组分混合。本专利技术的另外一个方面提供了上述组合物或农业制剂用于降解土壤中DEHP的用途。本专利技术的另外一个方面提供一种降解土壤中DEHP的方法，所述方法包括，向土壤中施加假单胞菌Pseudomonassp.9-8③。进一步地，所述方法包括同时向DEHP施加蚯蚓和/或蚓粪。如上所述，本专利技术的蚯蚓在降解DEHP中的应用，具有以下有益效果：实验发现，利用Pseudomonassp.9-8③可以降解土壤中的DEHP，对于改善土壤具有较高的效率，且不会对环境带来二次污染。实验进一步证明，通过同时向土壤中添加蚯蚓、Pseudomonassp.9-8③以及蚓粪具有更高的降解效率，达到协同作用的效果。本专利技术菌株保藏信息如下：菌株名称：假单胞菌Pseudomonass本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种假单胞菌Pseudomonas sp.9‑8③，所述假单胞菌Pseudomonas sp.9‑8③的保藏号CCTCC NO：M2019158。

【技术特征摘要】
1.一种假单胞菌Pseudomonassp.9-8③，所述假单胞菌Pseudomonassp.9-8③的保藏号CCTCCNO：M2019158。2.根据权利要求1所述的假单胞菌Pseudomonassp.9-8③，其特征在于：所述假单胞菌Pseudomonassp.9-8③的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，所述假单胞菌Pseudomonassp.9-8③具有降解DEHP的功能。3.根据权利要求1所述的假单胞菌Pseudomonassp.9-8③用于降解DEHP的用途。4.如权利要求1～3任意一项所述的假单胞菌Pseudomonassp.9-8③在制备具有降解DEHP功能的组合物或农业制剂中的应用。5.一种组合物或者农业制剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：白娜玲，吕卫光，张翰林，郑宪清，李双喜，张娟琴，张海韵，
申请(专利权)人：上海市农业科学院，
类型：发明
国别省市：上海,31