一种检测盐酸伐地那非原料药中有机溶剂残留量的方法技术

本发明专利技术属于医药技术领域，具体涉及一种检测盐酸伐地那非原料药中有机溶剂残留的方法，尤其是用顶空毛细管气相色谱同时检测盐酸伐地那非中丙酮、四氢呋喃和二氯甲烷3种有机溶剂残留含量的方法。本发明专利技术提供的方法具有操作简便，灵敏度高，专属性强，重复性好，准确度高等特点，可用于盐酸伐地那非原料药的质量控制。

A Method for the Determination of Residual Organic Solvents in Vardenafil Hydrochloride

【技术实现步骤摘要】
一种检测盐酸伐地那非原料药中有机溶剂残留量的方法
本专利技术属于医药
，具体涉及一种检测盐酸伐地那非原料药中有机溶剂残留的方法，尤其是用顶空毛细管气相色谱法同时检测盐酸伐地那非中丙酮、四氢呋喃、二氯甲烷3种有机溶剂残留含量的方法。
技术介绍
勃起功能障碍(ErectileDysfunction,ED)，俗称“阳痿”，指男子在性刺激下，持续地不能达到或维持足够硬度的阴茎勃起以完成满意性生活，病程在3个月以上方能临床诊断ED。据流行病学数据(JAndrol,2011,32:496)，我国成年男性的ED总体患病率为17.1％，且随年龄的增加而升高，50岁以上人群达到29.1％。按照理论数据测算，我国男性ED患者约达1亿人，已与糖尿病的发病率相近，随着我国高血压、糖尿病和肥胖综合症的发病率上升，由此引发的ED病例也将持续攀升，ED已成为困扰男性的重要疾病之一。《欧洲泌尿外科学会男性性功能障碍诊疗指南(2013年版)》、《日本ED诊治指南(2008年版)》以及由中华医学会男科分会于2004年发布的《男子勃起功能障碍诊治指南》中均将PDE5抑制剂列为ED治疗的一线药物。目前主流药物为辉瑞的西地那非(Viagra，万艾可)、礼来的他达那非(Cialis，希爱力)和拜耳的伐地那非(Levitra，艾力达)。这三种药物在药理学作用方面基本相似，都是通过选择性抑制PDE5，上调cGMP，在性刺激作用下促进一氧化氮(NO)释放，使阴茎血管平滑肌舒张，海绵体血流增加、血窦充血，从而促进勃起。盐酸伐地那非(Vardenafil)是由拜耳和葛兰素史可公司研制的新一代强效、高选择性PDE5抑制剂，是继西地那非、他达拉非之后第3个治疗ED的口服药。与第一代西地那非相比，伐地那非在分子结构上进行了优化，具有用量小、起效快、作用持久、耐受性良好、副作用小等诸多优点，是迄今为止发现的起效最快的PDE5抑制剂(可在10min起效)。大量临床研究表明，它对各种病因、各种程度、各种年龄段的ED患者均有显著疗效，尤其是针对难治性ED和糖尿病性ED。同时，伐地那非也是全球首个采用量化指标(勃起持续时间)进行临床研究的PDE5抑制剂，证实其可以安全、有效延长伴有或不伴有基础性疾病ED患者的勃起持续时间。各国药典均要求对原料药进行残留溶剂检查，以控制生产过程中使用的有机溶剂或挥发性杂质在原料药中的残留量，以保证用药安全。本专利技术针对盐酸伐地那非的合成制备工艺中使用及反应产生的有机溶剂有丙酮、四氢呋喃、二氯甲烷及N,N-二甲基甲酰胺，由于N,N-二甲基甲酰胺使用量较小且易溶于水，在后续几次水洗操作中可将其完全去除。故针对合成工艺引入的丙酮、四氢呋喃、二氯甲烷3种有机溶剂残留，利用顶空毛细管气相色谱法，并选择在合适的色谱条件下同时检测这3种有机溶剂残留的含量，更好地控制产品内在质量。
技术实现思路
本专利技术旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。本专利技术的专利技术人认为盐酸伐地那非中残留的丙酮、四氢呋喃、二氯甲烷3种有机溶剂会影响药物的安全性，因此，需要对其中的丙酮、四氢呋喃、二氯甲烷3种有机溶剂残留进行检测。本专利技术所要解决的技术问题是，提供一种检测盐酸伐地那非中有机溶剂残留的方法，利用气相色谱法简便、快速、准确的特点，同时检测盐酸伐地那非中的丙酮、四氢呋喃、二氯甲烷3种有机溶剂残留量。鉴于丙酮、四氢呋喃、二氯甲烷为常见的低沸点有机溶剂，考虑到盐酸伐地那非三水合物在5％磷酸溶液中溶解，同时5％磷酸溶液与这三种残留有机溶剂差别较明显，故选用5％磷酸溶液作为样品配制溶剂。根据国内外药典和相关技术指导原则相关规定和要求，由于这三种溶剂沸点不高且极性差异较小，参照常用溶剂的气相检测方法，选用毛细管柱顶空进样法进行方法筛选，分离度试验结果显示各溶剂的分离度良好，初步确定了本品残留溶剂检测方法的色谱条件。后续通过详细的方法学验证研究，结果表明该色谱条件下各残留溶剂的各考察项目均符合要求。本专利技术通过下列技术方案解决上述技术问题。一种检测盐酸伐地那非中有机溶剂残留的方法，用顶空毛细管气相色谱同时检测盐酸伐地那非中丙酮、四氢呋喃与二氯甲烷3种有机溶剂残留量，其步骤具体为：色谱条件：以聚乙二醇(或极性相近)为固定液的毛细管色谱柱；柱温为40℃，维持10min，进样口温度为210℃，采用氢火焰离子化检测器(FID)，检测器温度为250℃；载气为氮气，流速为3.5ml/min；顶空瓶平衡温度为80℃，平衡时间为35min，分流比20:1。对照品溶液的配制：精密量取丙酮、四氢呋喃与二氯甲烷各适量，用5％磷酸溶液定量稀释制成每1ml中约分别含丙酮0.25mg、四氢呋喃36μg与二氯甲烷30μg的混合溶液，摇匀即得；供试品溶液的配制：精密称取本品约1.0g，置20ml量瓶中，加5％磷酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀即得；精密量取上述对照品溶液2ml顶空进样，各峰之间的分离度应符合要求。另精密量取上述供试品溶液和对照品溶液各2ml顶空进样，记录色谱图，按外标法以峰面积计算。利用本专利技术所述的方法，能够有效地对盐酸伐地那非中的3种残留有机溶剂含量进行同时检测。根据本专利技术的实施例，专利技术人通过下列一系列系统的方法学研究对该检测方法的各种性能进行了评价：根据本专利技术的实施例，专利技术人通过检测方法的适用性试验和专属性试验对方法的可靠性进行了评价。在适用性试验中，分离度是最重要的评价指标。根据本专利技术的实施例中的实验结果，空白溶剂对各待测残留溶剂峰检测无干扰，相邻溶剂峰间的分离度均大于1.5，丙酮、四氢呋喃、二氯甲烷峰面积的相对标准偏差(RSD)分别为3.0％、4.0％、8.6％，均小于10.0％，可见多次重复测定结果之间的离散程度很小，由此，可见根据本专利技术实施例的检测方法可以以较高的可靠性快速准确测定盐酸伐地那非原料药中有机溶剂的残留。根据本专利技术的实施例，专利技术人通过检测限和定量限试验对检测方法的灵敏性进行了评价。检测限和定量限是指在给定的可靠程度内可以从样品中检测和准确定量待测物质的最小浓度或最小量根据，是评价方法灵敏度的关键指标。根据本专利技术的实施例中的实验结果，本专利技术的顶空毛细管气相色谱法，丙酮、四氢呋喃、二氯甲烷的检测限分别相当于样品浓度的2.001ppm、1.627ppm、2.743ppm；丙酮、四氢呋喃、二氯甲烷的定量限分别相当于样品浓度的7.845ppm、4.849ppm、10.619ppm。说明该检测方法可以以较高的灵敏性快速准确测定盐酸伐地那非原料药中有机溶剂的残留。根据本专利技术的实施例，专利技术人通过线性试验对该检测方法的线性范围进行了评价。线性回归是利用数理统计中的回归分析，来确定两种或两种以上变数间相互依赖的定量关系的一种统计分析方法之一，变量的相关关系中最为简单的是线性相关关系，设随机变量与变量之间存在线性相关关系，则由试验数据得到的点,将散布在某一直线周围。根据本专利技术的实施例中的实验结果，丙酮、四氢呋喃、二氯甲烷在定量限浓度至120％样品浓度范围内，浓度与峰面积线性回归方程的相关系数R均大于0.99，各线性方程的y轴截距与100％浓度时响应值之比的绝对值分别为1.4％、0.6％、4.2％，均小于10.0％。落在该范围内的丙酮、四氢呋喃、二氯甲烷的含量均可以通过相应的线性方程计算得本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种测定盐酸伐地那非原料药中有机溶剂残留含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：通过毛细管气相色谱法对所述盐酸伐地那非原料药进行分析，以便获得色谱图；以及基于所述色谱图，确定所述盐酸伐地那非中有机溶剂残留含量；其中，所述盐酸伐地那非原料药是以供试品溶液的形式提供的，所述供试品溶液为盐酸伐地那非的5％磷酸溶液；所述有机溶剂包括丙酮、四氢呋喃和二氯甲烷；所述毛细管气相色谱法采用下列条件：检测器为氢火焰离子化检测器，检测器温度为200‑300℃，进样口温度为150‑250℃，色谱柱为聚乙二醇极性相近的毛细管色谱柱，柱温为30‑50℃，维持5‑20min，载气是氮气、氦气或氩气，载气流速为1‑10ml/min，平衡温度为60‑140℃，平衡时间为20‑60min。

【技术特征摘要】
1.一种测定盐酸伐地那非原料药中有机溶剂残留含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：通过毛细管气相色谱法对所述盐酸伐地那非原料药进行分析，以便获得色谱图；以及基于所述色谱图，确定所述盐酸伐地那非中有机溶剂残留含量；其中，所述盐酸伐地那非原料药是以供试品溶液的形式提供的，所述供试品溶液为盐酸伐地那非的5％磷酸溶液；所述有机溶剂包括丙酮、四氢呋喃和二氯甲烷；所述毛细管气相色谱法采用下列条件：检测器为氢火焰离子化检测器，检测器温度为200-300℃，进样口温度为150-250℃，色谱柱为聚乙二醇极性相近的毛细管色谱柱，柱温为30-50℃，维持5-20min，载气是氮气、氦气或氩气，载气流速为1-10ml/min，平衡温度为60-140℃，平衡时间为20-60min。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述毛细管气相色谱法采用下列条件：检测器温度为250℃，进样口温度为210℃，色谱柱为聚乙二醇毛细管色谱柱，柱温为40℃，维持10min，载气为氮气，载气流速为3.5ml/min，平衡温度为80℃，平衡时间为35min。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述毛细管气相色谱法采用标准对照溶液，所述标准对照溶液是丙酮、四氢呋喃和二氯甲烷的混合溶液，并且基于每毫...

【专利技术属性】
技术研发人员：汤丹，赵志荣，赵玉姣，余珏仪，卢智俊，
申请(专利权)人：广州朗圣药业有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44