犬细小病毒免疫荧光检测试剂及试剂盒制造技术

本实用新型专利技术公开了一种犬细小病毒免疫荧光检测试剂，该检测试剂包括一检测卡(侧流片)和一卡盒8，该检测卡包括背衬7以及位于背衬上的样品垫1，荧光乳胶垫2，检测区3，质控区4，硝酸纤维素膜5，吸收垫6，荧光乳胶垫2包被有荧光乳胶标记的犬细小病毒抗体‑1；并且检测区3包被有犬细小病毒抗体‑2。本荧光检测试剂可通过荧光仪定量检测犬细小病毒，适用于犬、猫、狐狸以及水貂等犬细小病毒病的诊断和防控。

Canine Parvovirus Immunofluorescence Detection Reagent and Kit

【技术实现步骤摘要】
犬细小病毒免疫荧光检测试剂及试剂盒
本技术涉及检测检验
，具体地涉及一种犬细小病毒免疫荧光检测试剂。
技术介绍
犬细小毒病(CanineParvovirus，CPV)是细小病毒科、细小病毒属，病毒基因组为单股线状DNA。CPV是一种引起犬急性高度接触性传染病，临床上主要以出血性肠炎、非化脓性心肌炎、白细胞减少为特征。CPV传染性强，并可以感染所有年龄的犬，且一年四季均有发生和流行，对幼犬的致病性较高，发病率高达90％，病死率为10％～50％，是危害养犬业最为严重的传染病之一。近年来研究表明CPV宿主范围广泛，不仅对犬具有致病性，对狐狸、狼、貉、水獭、猫和大熊猫等也具有致病性，而且CPV自发现以来就不断发生变异，由原始的CPV-2型分化成a、b、c等三个基因型。目前我国流行株以CPV-2a为主，也呈混合感染状况，虽然加强防疫和临床上疫苗使用，但病毒的变异等诸因素，此病毒仍未得到有效控制，而每年这种病对我国皮毛等特种经济动物养殖和宠物业造成严重的经济损失，建立快速有效的检测法是防止和减少疾病传播，和由此类疾病带来的经济损失。目前细小病毒检测方法主要有分子核酸检测、酶联免疫和胶体金法，前两种方法无法在小型诊所和现场检测且检测时间长、操作烦琐，胶体金法灵敏稍逊，检测结果不能保存和定量化。因此，本领域急需开发稳定性好、灵敏度高、可以定量、检测结果能够保存且使用方便快速特异性的检测试剂，本技术犬细小病毒免疫荧光检测试剂现实上述特性要求。
技术实现思路
本技术的目的在于提供一种犬细小病毒免疫荧光检测试剂。具体地，本技术的目的在于提供一种免疫荧光法快速定量检测犬细小病毒的检测卡，本技术的检测卡具有较高的灵敏度和准确性，同时检测结果可以借助仪器进行定量、保存、打印和传递。在本技术的第一方面，提供了一种犬细小病毒免疫荧光检测试剂，所述检测试剂包括一检测卡(侧流片)，所述的检测卡包括背衬(7)，以及位于所述背衬上的从近端到远端的以下结构：样品垫(1)、荧光乳胶垫(2)、检测区(3)、质控区(4)、硝酸纤维素膜(5)、和吸收垫(6)；并且所述的荧光乳胶垫(2)包被有荧光乳胶标记的犬细小病毒抗体-1；并且所述检测区(3)包被有犬细小病毒抗体-2。在另一优选例中，所述的抗体-1和所述的抗体-2结合于犬细小病毒的不同表位。在另一优选例中，所述的抗体-1和所述的抗体-2为犬细小病毒特异性抗体。在另一优选例中，所述的质控区(4)包被有能结合于所述犬细小病毒抗体-1的二抗。在另一优选例中，所述的二抗为羊抗鼠IgG。在另一优选例中，所述的荧光乳胶为Eu3+荧光乳胶微粒。在另一优选例中，所述的背衬(7)为PVC板。在另一优选例中，所述样品垫(1)为玻璃纤维。在另一优选例中，所述吸收垫(6)为吸水纸。在另一优选例中，所述的样品垫(1)、荧光乳胶垫(2)、硝酸纤维素膜(5)、和吸收垫(6)粘贴于所述背衬上。在另一优选例中，所述的样品垫(1)和荧光乳胶垫(2)部分重叠。在另一优选例中，所述的检测区(3)设置在靠近荧光乳胶垫(2)的一侧，且所述的质控区(4)设置在靠近吸收垫(6)的一侧。在另一优选例中，所述检测试剂还包括卡盒(8)，以及位于所述卡盒上的加样孔(9)和观察窗(10)。在另一优选例中，所述的检测卡完全设置于卡盒(8)中，所述加样孔(9)对应于所述检测卡上的样品垫(1)，且所述观察窗(10)对应于所述检测卡上的检测区(3)和质控区(4)。在另一优选例中，所述卡盒的长度为80-90mm，宽度为10-20mm，且高度为4-5mm。在另一优选例中，所述检测卡的长度为60-70mm，且宽度为3-4mm。在另一优选例中，所述的检测区(3)和质控区(4)位于硝酸纤维素膜(5)上。在另一优选例中，所述检测试剂检测的样本包括全血、血浆、血清、尿液、排泄物或组织样本。在本技术的第二方面，提供了一种用于犬细小病毒免疫荧光检测试剂盒，所述试剂盒包括：(i)一容器；以及(ii)如本技术第一方面所述的犬细小病毒免疫荧光检测试剂。在另一优选例中，所述试剂盒还包括说明书。应理解，在本技术范围内中，本技术的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。附图说明图1为本技术一种优选例的检测卡的结构剖视图。其中，1为样品垫，2为荧光乳胶垫，3为检测区，4为质控区，5为硝酸纤维素膜，6为吸收垫，7为背衬。图2为本技术一种优选例的犬细小病毒免疫荧光检测试剂(检测卡和卡盒)的俯视图。其中，8为卡盒，9为加样孔，10为观察窗。具体实施方式本技术人经过广泛而深入地研究，首次开发了一种犬细小病毒免疫荧光检测试剂，所述检测试剂包括一检测片和一卡盒，检测片包括背衬7以及位于背衬上的样品垫1，荧光乳胶垫2，检测区3，质控区4，硝酸纤维素膜5，吸收垫6，所述的荧光乳胶垫(2)包被有荧光乳胶标记的犬细小病毒抗体-1；并且所述检测区(3)包被有犬细小病毒抗体-2。本技术的检测试剂可特异性检测犬细小病毒，稳定性好、灵敏度高、使用方便。在此基础上，完成了本技术。检测方法和工作原理为了便于理解本技术，给出本技术检测试剂的检测原理。应理解，本技术的保护范围并不受该原理的影响或限制。本专利技术提供的一种快速检测犬细小病毒的免疫荧光定量检测试剂，其包括一检测卡和一卡盒，采用双抗体免疫夹心法原理检测犬细小病毒。具体地，是将荧光乳胶标记的特异性抗犬细小病毒的抗体-1并吸附在结合垫上，将特异性抗犬细小病毒的抗体-2固定在硝酸纤维膜上，再将结合垫和硝酸纤维膜组装到PVC板上，两头分别贴样品垫和吸水纸便形成检测条。检测时，当待检样本加到试纸条(检测卡)一端的样品垫后，液体样通过毛细作用向前移动，溶解结合垫上的荧光乳胶标记物，如果样本中含有被检测的病毒时，病毒被乳胶标记的抗体捕获形成复合物，当复合物移动到膜的检测线处，又被固定在膜上的抗体捕获形成双夹心复合物，也就是病毒与荧光乳胶抗体(抗体-1)的结合物又被检测线处的特异性抗体(抗体-2)结合而截留聚积在检测带上形成荧光带，通过特定波长的荧光仪检测到荧光强弱程度，也就是样品中病毒情况；如果样品中没有病毒，溶解的荧光乳胶没有被检测线截留，荧光仪在检测区检测不到荧光带，样品为阴性样品。为了便于判断反应进行和试剂的好坏，在质控区(C)固定质控线，所以不管结果怎样，质控线C始终出现荧光带，来证明试剂有效性。由此所述的荧光免疫定量检测试剂便于携带和保存、操作简单、检测过程10min之内完成。灵敏度本技术的犬细小病毒免疫荧光检测试剂的灵敏度在103.0TCID50/ml以上。特异性本技术的犬细小病毒荧光检测试剂对狂犬病病毒、犬瘟热病毒、犬腺病毒、犬副流感病毒、犬冠状病毒等病原检测结果均为阴性。检测试剂的制造在本技术中，所述检测试剂的各组分(或组件)可选用本领域已有的材料制成。背衬7可以用任何稳定的、无孔的材料制成，其强度应足以支承材料和粘于其上的各组分。因为许多测定用水作为扩散介质，因此背衬7较佳地是基本上不透水的。在一个优选例中，背衬7是用聚合物膜制成的，更佳地是用聚氯乙烯膜制成的(如PVC胶板)本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种犬细小病毒免疫荧光检测试剂，其特征在于，所述检测试剂包括一检测卡，所述的检测卡包括背衬(7)，以及位于所述背衬上的从近端到远端的以下结构：样品垫(1)、荧光乳胶垫(2)、检测区(3)、质控区(4)、硝酸纤维素膜(5)、和吸收垫(6)；并且所述的荧光乳胶垫(2)包被有荧光乳胶标记的犬细小病毒抗体‑1；并且所述的背衬(7)为PVC板；并且所述样品垫(1)为玻璃纤维；并且所述的样品垫(1)和荧光乳胶垫(2)部分重叠；并且所述检测区(3)包被有犬细小病毒抗体‑2；所述检测卡的长度为60‑70mm，且宽度为3‑4mm。

【技术特征摘要】
1.一种犬细小病毒免疫荧光检测试剂，其特征在于，所述检测试剂包括一检测卡，所述的检测卡包括背衬(7)，以及位于所述背衬上的从近端到远端的以下结构：样品垫(1)、荧光乳胶垫(2)、检测区(3)、质控区(4)、硝酸纤维素膜(5)、和吸收垫(6)；并且所述的荧光乳胶垫(2)包被有荧光乳胶标记的犬细小病毒抗体-1；并且所述的背衬(7)为PVC板；并且所述样品垫(1)为玻璃纤维；并且所述的样品垫(1)和荧光乳胶垫(2)部分重叠；并且所述检测区(3)包被有犬细小病毒抗体-2；所述检测卡的长度为60-70mm，且宽度为3-4mm。2.如权利要求1所述的检测试剂，其特征在于，所述的质控区(4)包被有能结合于所述犬细小病毒抗体-1的二抗。3.如权利要求1所述的检测试剂，其特征在于，所述的检测区(3)设置在靠近荧光乳胶垫(2)的一侧，且所述的质控区(4)设置在靠近...

【专利技术属性】
技术研发人员：印春生，姚文生，刘业兵，张莹辉，王团结，朱真，康凯，黄华，王学生，
申请(专利权)人：中国兽医药品监察所，上海容晖生物科技有限公司，
类型：新型
国别省市：北京,11