思茅藤提取物的用途制造技术

本发明专利技术公开了思茅藤提取物的用途，即思茅藤提取物在制备预防或/和治疗炎症药物中的应用，属于天然药物开发或医药技术领域；本发明专利技术通过LPS诱导的RAW 264.7细胞炎症模型对甲醇水提取物及不同极性段的化合物进行抗炎活性评价，并通过小鼠耳肿胀和爪肿胀模型进行体内抗炎活性验证；实验结果显示思茅藤提取物对炎症有一定的改善作用，且可以在体内发挥抗炎效果，能够防治炎症相关疾病的发病；且思茅藤植物原料易得，价格低廉，因此思茅藤提取物在制备防治炎症药物中拥有良好的开发应用前景。

Application of extracts from Simaoteng

【技术实现步骤摘要】
思茅藤提取物的用途
本专利技术涉及思茅藤提取物的新用途，即其在制备预防或/和治疗炎症（如腮腺炎、肺炎、关节炎、结肠炎）药物中的应用，属于医药

技术介绍
炎症反应是临床常见的一种病理过程，是由有害的刺激和特定的条件如感染、毒素和组织损伤触发的一种保护性免疫反应。然而，慢性炎症与包括动脉粥样硬化、肥胖、哮喘、关节炎、癌症和自身免疫性疾病等疾病的发病机制密切相关。流行病学方面的例证表明25%以上的癌症是由慢性感染或其他类型的炎症引起的，许多因素如微生物感染、自身免疫疾病以及其他炎性疾病（如前列腺癌相关的前列腺炎）等都能促使炎症向癌症转变。诱导基因组的不稳定性、血管增生、表观遗传状态的改变以及细胞加速增殖均会致使炎症诱发癌变。过量的活性氧和活性氮、异常表达的炎性细胞因子和趋化因子、环氧化酶-2（Cyclooxygenase-2，COX-2）及核因子-κB（Nuclearfactor-κB，NF-κB）是分子水平上诱发炎症癌变的影响因子。炎症通过调节致癌基因和肿瘤抑制基因的表达来实现致瘤性转化；然而目前具有抗炎、解热、镇痛作用的药物主要为甾体（类固醇类物质）及非甾体类药物（如阿司匹林等），但大多数药物不能根除病因，也不能阻止病程的发展及并发症的发生，仅具有对症治疗作用且具有一定的副作用；因此从天然产物中开发出一种有效缓减炎症的安全药物具有深远的意义。思茅藤属（EpigynumWigth）是夹竹桃科夹竹桃亚科（Apocynoideae）思茅藤族（Epigyneae）中的一个属，中国植物志中描述其约14种，分布于缅甸和马来西亚，我国只有思茅藤（Epigynumauritum）一种，产于云南南部，是一种具有清热、解毒、镇痛作用的植物，作为傣族的药用植物已在民间有药用记载；据记载，思茅藤族（Epigyneae）是中国夹竹桃科到萝摩科植物进化最高的族，其含有丰富的化合物及活性；目前国内外对思茅藤提取物防治炎症引起的相关疾病研究未见有专利文献报道。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供思茅藤提取物在医药开发方面的新用途，具体而言就是思茅藤提取物在防治炎症及炎症引起的相关疾病的新药物开发方面的应用。本专利技术致力于思茅藤提取物防治炎症及炎症引发的相关疾病的实验研究，结合体外和体内实验来证实思茅藤提取物对炎症有显著的防治效果。本专利技术所述思茅藤提取物是将思茅藤用体积浓度60-80%的甲醇水溶液超声提取20-40min，过滤，滤渣重复提取2-3次后，合并滤液浓缩后得粗提物浸膏，将溶解后的粗提物浸膏上样至D-101型大孔树脂柱上，依次用体积浓度0%、20%、40%、60%、80%、100%的甲醇水溶液进行洗脱，每个浓度洗脱4-5个柱体积，收集不同浓度段的洗脱液并合并，浓缩冻干而得。本专利技术预防或/和治疗炎症药物是以思茅藤提取物为活性成分，用于制备抗炎药物，还可以加入一种或多种药物制剂上可接受的辅料，或者与其他活性成分复配发挥协同抗炎的作用。本专利技术对思茅藤提取物防治炎症等相关疾病进行了系列的研究，证实了思茅藤提取物具有预防炎症发生的功能，因此可用于防治炎症及由炎症引起的相关疾病的新药制备与开发。思茅藤提取物用于制备抗炎及其炎症引发的相关疾病的药物具有以下这些优势：思茅藤植物在云南南部有广泛分布，原料价格低廉且易得；思茅藤植物作为傣族民间药用植物，有长期的民间药用记载；毒理学实验研究表明，思茅藤提取物毒性较低，低浓度下安全无害；提取和制备的工艺流程简单。目前临床上已有治疗炎症的相关药物，但大多具有一定的副作用；然而，炎症作为一个高发且并发症较多的一类疾病，开发天然产物来源的安全药物，具有广泛的市场需求，前景可观、蕴藏着巨大的社会和经济效应。与现有技术相比，本专利技术具有如下优点：1、本专利技术为思茅藤提取物发掘了新的医疗用途，开拓了一个新的研究领域，拓展了民间药用植物的价值；2、本专利技术通过实验发现思茅藤提取物在较低剂量下可以有效的阻遏炎症的发生；且为天然植物原材料，安全性高；3、思茅藤提取物较现有的炎症药物来说有类似的抗炎效果，且其提取工艺简单，成本低廉，来源广泛，适于工业化生产和市场推广应用。附图说明图1是粗提物及不同极性段浓缩物对RAW264.7细胞的毒性测定结果；图2是粗提物及不同极性段浓缩物对LPS诱导的RAW264.7细胞中NO的清除效果；图3是粗提物及不同极性段浓缩物对LPS诱导的RAW264.7细胞内ROS的清除效果；图4是粗提物及不同极性段浓缩物对LPS诱导的RAW264.7细胞中促炎因子IL-6的表达情况影响；图5是粗提物及不同极性段浓缩物对LPS诱导的RAW264.7细胞中促炎因子TNF-α的表达情况影响；图6是粗提物及不同极性段浓缩物对LPS诱导的RAW264.7细胞中抗炎因子IL-10的表达情况影响；图7是思茅藤提取物100%段浓缩物对COX-2表达情况的影响，其中上图为COX-2表达的Westernblot结果；下图为COX-2表达量结果图，EAE为100%浓度段浓缩物；图8是思茅藤提取物100%段浓缩物对iNOS表达情况的影响，其中上图为iNOS表达的Westernblot结果；下图为iNOS表达量结果图，EAE为100%浓度段浓缩物；图9是思茅藤提取物对二甲苯诱导的耳肿胀的影响结果，图中Control为空白组，Modle为模型组，DEX为地塞米松组，EAE为不同浓度思茅藤提取物组；图10是思茅藤提取物对卡拉胶诱导的小鼠爪肿胀的影响结果，图中Vehicle为模型组，Indomethacin为吲哚美辛组。具体实施方式下面结合在RAW264.7细胞水平及体内动物水平的抗炎结果数据来进一步的阐述本专利技术；这些实验的事例仅用于说明本专利技术，不用于限制本专利技术的应用范围；在阅读了本专利技术的记载以后，本领域的科技人员对其等效的各种改动、修改和修饰，都属于本专利技术权利要求所限定的范围，实施例中使用的试剂，如无特殊说明，均为常规市售产品或按常规方法配制的试剂，实施例中方法如无特殊说明，均为常规实验方法。实施例1：思茅藤提取物的制备思茅藤采自云南普洱，经自然晾干后打粉，得到思茅藤样品；称取100g思茅藤样品，按料液比g:mL=1:10的比例，用体积浓度70%的甲醇水溶液超声辅助提取30min，过滤，滤渣再重复超声提取三次，合并滤液，50℃真空蒸发浓缩得到粗提物浸膏12g，将粗提物浸膏溶于800mL蒸馏水中，通过D-101型大孔树脂柱吸附后，依次用体积浓度0%、20%、40%、60%、80%、100%的甲醇水溶液进行洗脱，每个浓度洗脱5个柱体积，收集不同浓度段的洗脱液并合并，浓缩冻干即得不同极性段浓缩物，待用。实施例2：RAW264.7细胞水平抗炎活性评价应用LPS诱导的RAW264.7建立细胞炎症模型，测定思茅藤粗提物（CE）及不同极性段浓缩物处理后细胞内NO、ROS、相关炎症因子以及COX-2和iNOS的表达情况来评价思茅藤的抗炎活性；1、细胞培养及无毒剂量筛选（1）将RAW264.7细胞接种在含10%胎牛血清(FBS)、1%青霉素(100U/mL)和链霉素(100mg/mL)的混合抗生素的DMEM培养基中，在37℃、5%CO2和95%空气的潮湿环境中培养；（2）采用MTT法测定粗提物及不同极性段的思茅藤浓缩物对RAW264.7细胞的毒本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.思茅藤提取物在制备预防或/和治疗炎症药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.思茅藤提取物在制备预防或/和治疗炎症药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：思茅藤提取物是将思茅藤用甲醇水溶液超声提取，过滤，滤渣重复提取2-3次后，合并滤液浓缩后得粗提物浸膏，将溶解后的粗提物浸膏上样至D-101型大孔树脂柱上，依次用...

【专利技术属性】
技术研发人员：程桂广，杨美莲，何舒悦，曹建新，赵天瑞，
申请(专利权)人：昆明理工大学，
类型：发明
国别省市：云南,53