结合白细胞介素-2的抗体和其用途制造技术

本发明专利技术一般涉及对抗人类白细胞介素2(IL‑2)的人类抗体和使用所述抗体调节IL‑2活性的方法以及在治疗如癌症、自身免疫疾病或感染的病状方面的用途。

Antibody binding to interleukin-2 and its use

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】结合白细胞介素-2的抗体和其用途相关申请的交叉参考本申请要求2016年9月28日提交的美国临时专利申请第62/401,158号和2016年11月11日提交的美国临时专利申请第62/421,038号的优先权权益，其全部内容通过引用并入本文中。通过引用并入电子递交的材料通过引用整体并入的是与本文同时提交的计算机可读核苷酸/氨基酸序列表，其标识如下：文件名：51134_Seqlisting.txt；大小：20,399字节；创建时间：2017年9月28日。
本专利技术一般涉及白细胞介素-2(IL-2)抗体和用于治疗与IL-2信号传导相关的病状的疗法，其包含向有需要的个体给予治疗有效量的IL-2抗体。
技术介绍
白细胞介素-2(IL-2)是一种15kDa肽，其是具有4个α螺旋束的细胞因子家族的一员(Wang等人,《免疫学年评(Annualreviewofimmunology)》27,29-60(2009))。白细胞介素-2最初在1976年被鉴别为T细胞生长因子，其已被描述为多种名称，包括T细胞生长因子(TCGF)、淋巴细胞条件培养基(LCM)因子、T细胞促有丝分裂因子(TMF)、杀伤辅助因子(KHF)和T细胞替代因子(TRF)(LotzeMT,《人类细胞因子中的白细胞介素-2：基础和临床研究手册(Interleukin-2,InHumanCytokines:Handbookforbasicandclinicalresearch)》,第81-96页(1992)；Smith等人,《细胞因子参考(CytokineReference)》,第113-125页(2001))。IL-2由多种细胞产生，包括CD4T细胞、CD8T细胞、树突状细胞(DC)、天然杀伤(NK)细胞和天然杀伤T(NKT)细胞。IL-2在广泛的信号之后产生，包括T细胞受体(TCR)的参与，并且在TCR和如CD28的共刺激分子在初始T细胞上接合后快速和瞬时产生。IL-2分泌的瞬时性质取决于TCR信号的转录诱导和通过共刺激信号稳定IL-2mRNA，之后的IL-2基因的转录沉默和IL-2mRNA的快速降解。近年来已描述经典的自动调节反馈环，其中IL-2抑制其自身的产生(MalekTR,《免疫学年评》26,453-479(2008))。IL-2受体(IL-2R)由三条链组成：IL-2Rα(也称为CD25)、IL-2Rβ(也称为CD122)和常见的γ链，γc(也称为CD132)。三条受体链在各种细胞类型上单独并且以不同方式表达。IL-2通过IL-2Rβ和γc之间的相互作用发出信号，其激活细胞路径，如Jak/Stat、PI3K-AKT和MAPK路径。
技术实现思路
本专利技术提供用于治疗与IL-2信号传导相关，或者其中IL-2信号传导的调节可以引起改善的临床(或免疫)响应的疾病或病症的方法和组合物。本专利技术提供结合人类IL-2的抗体。提供本文所述的抗体，其对IL-2与任何或所有IL-2R链(IL-2Rα、IL-2Rβ和γc)的结合可以具有不同的作用。特别地，本专利技术提供使用所述抗体治疗癌症的方法。在各个实施例中，本专利技术提供一种对IL-2具有特异性的抗体，其亲和力KD为2×10-9M或更低。在各个实施例中，本专利技术提供一种对IL-2具有特异性的抗体，其亲和力KD为1×10-10M或更低。在示例性实施例中，本文所述的抗IL-2抗体至少以10-10M、10-11M、10-12M、10-13M或更低的亲和力结合。在某些实施例中，通过表面等离子体共振或KinExA测定来测量亲和力。在各个实施例中，抗体通过IL-2Rαβγ和IL-2Rβγ抑制IL-2信号传导，并且抗体通过IL-2Rαβγ抑制IL-2信号传导的程度要比通过IL-2Rβγ更大。在一个相关实施例中，抗体结合IL-2并抑制IL-2与IL-2受体α(IL-2Rα)亚基的结合。在各个实施例中，抗体通过IL-2Rαβγ抑制IL-2信号传导的程度要比通过IL-2Rβγ更大。在一个相关实施例中，抗体不完全阻断人类IL-2与表达人类或小鼠IL-2Rβ或IL-2Rβγ复合物的细胞的结合。在相关方面，抗体在变构位点结合IL-2与IL-2Rα或IL-2Rβ和γc链的结合。在各个实施例中，抗体是负调节剂抗体，任选地，其中抗体能够使IL-2和IL-2受体α(IL-2Rα)之间的结合亲和力减弱至少约2倍，任选地高达1000倍。在其它实施例中，本文所述的抗体能够使IL-2和IL-2Rα之间的结合亲和力减弱至少2-1000倍、10-100倍、2倍、5倍、10倍、25倍、50倍、100倍、200倍、300倍、400倍、500倍、600倍、700倍、800倍、900倍或1000倍。在各个实施例中，与IL-2复合的抗体与表达IL-2Rβ和γc的细胞结合，EC50为约5nM或更低。在各个实施例中，抗体结合表达IL-2Rβ(而并非γc)的细胞，EC50为约200nM或更低。在一些实施例中，与IL-2复合的抗体与表达IL-2Rβ和γc的细胞结合，EC50在0.1-100nM、0.1-10nM、1-5nM范围内。在各个实施例中，与IL-2复合的抗体与表达IL-2Rβ和γc的细胞结合，EC50为1、2、3、4或5nM。在一些实施例中，与IL-2复合的抗体与表达IL-2Rβ(而并非γc)的细胞结合，EC50在10-500nM，10-300nM，10-200nM范围内。在各个实施例中，与IL-2复合的抗体与表达IL-2Rβ和γc的细胞结合，EC50为10、50、100、150或200nM。在相关的实施例中，与IL-2复合的抗体与表达IL-2Rβ和γc的细胞结合比表达IL-2Rβ(而并非γc)的细胞高9至40倍。在各个实施例中，抗体与人类IL-2和小鼠、大鼠或兔IL-2中的一种或多种结合。在各个实施例中，抗体在表达IL-2Rα、IL-2Rβ和γc的细胞中抑制IL-2对STAT5活化的刺激的程度要大于表达IL-2Rβ和γc而并非IL-2Rα的细胞。例如，在表达小鼠IL-2Rα、Rβ和γc的细胞(例如，CTLL-2)中，EC50变化可以在293到793倍范围内，而表达小鼠IL-2Rβ和γc的细胞(例如，小鼠原代NK细胞)为13-16倍。对于表达人类IL-2Rα、Rβ和γc的细胞(例如，NK92细胞系)，EC50变化可以在495至1855倍范围内，而表达人类IL-2Rβ和γc的细胞(人类CD25+耗尽的原代NK细胞)为45至104倍或工程化表达人类Rβ和γc的CHO-K1细胞为5至9倍。与小鼠Rβ和γc相比，小鼠Rα、Rβ和γc的EC50变化比率高18至60倍(对照抗体MAB602(也称为克隆5355)为76倍)，并且与人类Rβ和γc相比，人类Rα、Rβ和γc的EC50变化比率高9至19倍(MAB602为50倍)。在一个相关实施例中，抗体在表达小鼠IL-2Rα、IL-2Rβ和γc的细胞中抑制IL-2对STAT5活化的刺激200倍或更高，对于在表达人类IL-2Rα、IL-2Rβ和γc的细胞中抑制400倍或更高。在一个相关实施例中，抗体在表达人类IL-2Rβ和γc而并非IL-2Rα的细胞中抑制IL-2对STAT5活化的刺激小于10倍(CHO-Rβγ)或150倍(例如，在人类CD25本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种人类或人源化抗体，其结合人类白细胞介素‑2(IL‑2)，亲和力KD为1×10

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.09.28 US 62/401,158;2016.11.11 US 62/421,0381.一种人类或人源化抗体，其结合人类白细胞介素-2(IL-2)，亲和力KD为1×10-10M或更低，并抑制IL-2与IL-2受体α(IL-2个Rα)亚基的结合，其中所述抗体通过IL-2Rαβγ和IL-2Rβγ抑制IL-2信号传导，并且其中所述抗体通过IL-2Rαβγ抑制IL-2信号传导的程度要比通过IL-2Rβγ更大。2.根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体不完全阻断人类IL-2与表达人类或小鼠IL-2Rβ或IL-2Rβγ复合物的细胞的结合。3.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体在变构位点结合IL-2与IL-2Rα、IL-2Rβγ或IL-2Rαβγ的结合。4.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体是负调节剂抗体，任选地，其中所述抗体能够使IL-2与IL-2受体α(IL-2Rα)之间的结合亲和力减弱至少约2倍，任选地高达1000倍。5.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中与所述抗体复合的IL-2与表达IL-2Rβ和γc的CHO细胞以5nM或更低的EC50结合，或其中与所述抗体复合的IL-2与表达IL-2Rβ(而并非γc)的CHO细胞以100nM或更低的EC50结合。6.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体与人类IL-2和小鼠、大鼠或兔的IL-2中的一种或多种结合。7.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体在表达IL-2Rα、IL-2Rβ和γc的细胞中抑制IL-2对STAT5活化的刺激的程度要大于表达IL-2Rβ和γc而并非IL-2Rα的细胞。8.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体在表达IL-2Rα、IL-2Rβ和γc的细胞中抑制IL-2对STAT5活化的刺激200倍或更高。9.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体在表达IL-2Rβ和γc而并非IL-2Rα的细胞中抑制IL-2对STAT5活化的刺激10倍或更低。10.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体在表达IL-2Rα、IL-2Rβ和γc的细胞中抑制IL-2对增殖的刺激的程度要大于表达IL-2Rβ和γc而并非IL-2Rα的细胞。11.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体抑制IL-2对表达IL-2Rα、IL-2Rβ和γc的NK细胞的增殖的刺激超过15倍。12.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体抑制IL-2对表达IL-2Rβ和γc而并非IL-2Rα的BaF3细胞的增殖的刺激小于10倍。13.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体选自由以下组成的组：XPA.92.019、XPA.92.041、XPA.92.042或XPA.92.099。14.一种结合人类白细胞介素-2(IL-2)的抗体，其包含(a)SEQIDNO:17、20、23或26中所示的重链CDR1氨基酸序列，或其中一个或两个氨基酸已被改变的其变异体；(b)SEQIDNO:18、21、24或27中所示的重链CDR2氨基酸序列，其来自与(a)相同的重链可变区，或其中一个或两个氨基酸已被改变的其变异体；和(c)SEQIDNO:19、22、25或28所示的重链CDR3氨基酸序列，其来自与(a)相同的重链可变区，或其中一个或两个氨基酸已被改变的其变异体。15.一种结合人类白细胞介素-2(IL-2)的抗体，其包含：(a)SEQIDNO:17、20、23或26中所示的重链CDR1氨基酸序列，或与其具有至少70％同一性的其变异体；(b)SEQIDNO:18、21、24或27中所示的重链CDR2氨基酸序列，其来自与(a)相同的重链可变区，或与其具有至少70％同一性的其变异体；和(c)SEQIDNO:19、22、25或28中所示的重链CDR3氨基酸序列，其来自与(a)相同的重链可变区，或与其具有至少70％同一性的其变异体。16.一种结合人类白细胞介素-2(IL-2)的抗体，其包含：(a)SEQIDNO:17、20、23或26中所示的重链CDR1氨基酸序列，或与其具有至少70％同一性的其变异体；(b)SEQIDNO:18、21、24或27中所示的独立选择的重链CDR2氨基酸序列，或与其具有至少70％同一性的其变异体；和(c)独立选择的SEQIDNO:19、22、25或28中所示的重链CDR3氨基酸序列，或与其具有至少70％同一性的其变异体。17.根据权利要求14至16中任一项所述的抗体，其中所述重链CDR1、CDR2或CDR3氨基酸序列中的至少两个示于SEQIDNO:17-28中的任一个中。18.根据权利要求14至16中任一项所述的抗体，其中所述重链CDR1、CDR2和CDR3氨基酸序列中的三个示于SEQIDNO:17-28中的任一个中。19.根据权利要求14至18中任一项所述的抗体，其包含与SEQIDNO:1、3、5或7中所示的重链可变区氨基酸序列有至少85％同一性的氨基酸序列。20.根据权利要求14至19中任一项所述的抗体，其包含与SEQIDNO:1、3、5或7中所示的重链可变区氨基酸序列有至少95％同一性的氨基酸序列。21.根据权利要求14至16中任一项所述的抗体，其包含多肽序列，所述多肽序列具有与重链可变区中的所有三个HCDR，或SEQIDNO:17-28中任一个所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3的所述氨基酸序列有至少70％同一性的氨基酸序列。22.根据权利要求14至21中任一项所述的抗体，其中一个或多个重链框架氨基酸已被来自另一人类抗体氨基酸序列的相应氨基酸置换。23.根据权利要求14至22中任一项所述的抗体，其还包含SEQIDNO:29-40中任一个所示的任何一个轻链CDR氨基酸序列。24.根据权利要求14至23中任一项所述的抗体，其包含SEQIDNO:29-40中任一个所示的至少两个轻链CDR氨基酸序列。25.根据权利要求14至24中任一项所述的抗体，其包含SEQIDNO:29-40中任一个所示的至少三个轻链CDR氨基酸序列。26.根据权利要求14至22中任一项所述的抗体，其包含：(a)SEQIDNO:29、32、35或38中所示的轻链CDR1氨基酸序列，或其中一个或两个氨基酸已被改变的变异体；(b)SEQIDNO:30、33、36或39中所示的轻链CDR2氨基酸序列，其来自与(a)相同的轻链可变区，或其中一个或两个氨基酸已被改变的变异体；和(c)SEQIDNO:31、34、37或40中所示的轻链CDR3氨基酸序列，其来自与(a)相同的轻链可变区，或其中一个或两个氨基酸的变异体已被改变的变异体。27.一种结合人类白细胞介素-2(IL-2)的抗体，其包括：(a)SEQIDNO:29、32、35或38中所示的轻链CDR1氨基酸序列，或与其具有至少70％同一性的其变异体；(b)SEQIDNO:30、33、36或39中所示的轻链CDR2氨基酸序列，其来自与(a)相同的轻链可变区，或与其具有至少70％同一性的其变异体；和(c)SEQIDNO:31、34、37或40中所示的轻链CDR3氨基酸序列，其来自与(a)相同的轻链可变区，或与其具有至少70％同一性的其变异体。28.根据权利要求14至22中任一项所述的抗体，其包含：(a)SEQIDNO:29、32、35或38中所示的轻链CDR1氨基酸序列，或其中一个或两个氨基酸已被改变的变异体；(b)SEQIDNO:30、33、36或39中所示的独立选择的轻链CDR2氨基酸序列，或其中一个或两个氨基酸已被改变的变异体；和(c)SEQIDNO:31、34、37或40中所示的独立选择的轻链CDR3氨基酸序列，或其中一个或两个氨基酸已被改变的变异体。29.根据权利要求26至28所述的抗体，其中所述轻链CDR1、CDR2或CDR3氨基酸序列中的至少两个示于SEQIDNO:29-40中的任一个中。30.根据权利要求23至29中任一项所述的抗体，其包含与SEQIDNO:9、11、13或15中任一个所示的轻链可变区氨基酸序列有至少70％同一性的氨基酸序列。31.根据权利要求30所述的抗体，其包含与SEQIDNO:9、11、13或15中任一个所示的轻链可变区氨基酸序列有至少85％同一性的氨基酸序列。32.根据权利要求30所述的抗体，其包含与SEQIDNO:9、11、13或15中任一个所示的轻链可变区氨基酸序列有至少95％同一性的氨基酸序列。3...

【专利技术属性】
技术研发人员：玛丽娜·勒尔，马克·鲁宾斯坦，哈森·伊萨弗拉斯，卢埃林·劳，欧·李，丹尼尔·H·贝丁格，克里斯廷·卡姆菲尔德·林德，艾格尼丝·肖邦·霍姆斯，竹内俊彦，劳伦·施维默，霍·江，阿默·M·米尔扎，科克·W·约翰逊，
申请(专利权)人：佐马美国有限公司，MUSC研究发展基金会，
类型：发明
国别省市：美国,US