一种检测非法添加盐酸氟西汀的方法技术

本发明专利技术公开了一种检测非法添加盐酸氟西汀的方法，包括以下步骤：筛查步骤：分别取供试品溶液和对照品溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图及DAD光谱图；供试品如果检出与盐酸氟西汀对照品色谱保留时间及DAD光谱一致的色谱峰，则进行确证；确证步骤：分别取供试品溶液和对照品溶液，注入高效液相色谱‑质谱联用仪，记录液相色谱图、一级质谱图和二级质谱图；供试品如果检出与盐酸氟西汀对照品色谱保留时间、一级质谱图和二级质谱图一致的色谱峰，则确定供试品非法添加了盐酸氟西汀。该检测方法灵敏度高、选择性好、确证性强、操作简便快捷，可用于减肥、瘦身类中成药，减肥类保健食品及瘦身产品中非法添加盐酸氟西汀的定性筛查和准确确认。

A Method for Detecting Illegal Addition of Fluoxetine Hydrochloride

【技术实现步骤摘要】
一种检测非法添加盐酸氟西汀的方法
本专利技术涉及分析化学
，尤其涉及一种检测非法添加盐酸氟西汀的方法。
技术介绍
目前，市场上出现不少减肥瘦身类中成药、减肥类保健食品及瘦身产品，它们中有不少会非法添加盐酸氟西汀。但是，盐酸氟西汀是一种口服抗抑郁药，用于治疗抑郁症和其伴随的焦虑，治疗强迫症及暴食症，盐酸氟西汀具有一定的减肥功效。但盐酸氟西汀为精神类药物，对服用者的精神将产生极大伤害。检测该物质的快速检测方法为薄层色谱法，但此方法中需要用到环己烷、乙酸乙酯，它们均属于毒性试剂，会对检测人员有一定的伤害性，且该方法检测灵敏度比较低，会出现“假阳性”、“假阴性”情况，无法保证检测结果的准确性。故设计一种快速灵敏且最终能确证阳性样品的检测方法，以解决出现“假阳性”、“假阴性”情况是非常迫切的。
技术实现思路
为了克服现有技术的不足，本专利技术的目的之一在于提供一种检测非法添加盐酸氟西汀的方法，灵敏度高、选择性好、确证性强、操作简便快捷，可用于减肥、瘦身类中成药，减肥类保健食品及瘦身产品中非法添加盐酸氟西汀的定性筛查和准确确认。本专利技术的目的采用如下技术方案实现：一种检测非法添加盐酸氟西汀的方法，包括以下步骤：(1)筛查步骤：高效液相色谱法；测定：分别取供试品溶液和盐酸氟西汀对照品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图及DAD光谱图；判断：对于供试品，如果检出与盐酸氟西汀对照品色谱保留时间及DAD光谱一致的色谱峰，则采用高效液相色谱-质谱联用法确证；否则，检测完成；(2)确证步骤：高效液相色谱-质谱联用法；测定：分别取供试品溶液和盐酸氟西汀对照品溶液，注入高效液相色谱-质谱联用仪，记录液相色谱图、一级质谱图和二级质谱图；判断：对于供试品，如果检出与盐酸氟西汀对照品色谱保留时间、一级质谱图和二级质谱图一致的色谱峰，则确定供试品非法添加了盐酸氟西汀。进一步地，在所述筛查步骤中，进行测定时的色谱条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的液相色谱柱；二极管阵列检测器，检测波长为226nm，扫描波长为210-400nm；柱温为35℃；流速为1.0ml/min；进样体积为20μl；以体积比为60:40的甲醇-0.01mol/L醋酸铵溶液(含0.1％甲酸)为流动相；理论塔板数以盐酸氟西汀计算，不低于2000。进一步地，所述色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶LichrospherC18柱，尺寸为4.6×250mm，粒径为5μm。进一步地，在所述筛查步骤中，洗脱程序为等度洗脱；进一步地，在所述筛查步骤中，进行测定前分别进行供试品溶液制备和盐酸氟西汀对照品溶液制备；所述供试品溶液制备步骤如下：若供试品为固体制剂，研细，精密称取一次取用量，置量瓶中，加甲醇，超声处理后，放至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过；若供试品为液体制剂，摇匀，精密量取一次取用量，置容量瓶中，加甲醇，振摇，加甲醇稀释至刻度，摇匀后用微孔滤膜滤过；滤液作为供试品溶液；同法制备阴性样品溶液；所述盐酸氟西汀对照品溶液制备步骤如下：取盐酸氟西汀对照品，置量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含0.05-0.06mg盐酸氟西汀的储备液。进一步地，在所述确证步骤中，进行测定时的色谱条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，检测波长为226nm；流速为0.3ml/ml；进样体积为3μl；以体积比为60:40的甲醇-0.01mol/L醋酸铵溶液(含0.1％甲酸)为流动相；理论板数以盐酸氟西汀计算，不低于2000。进一步地，所述色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱(AgilentZORBAXSBC18柱)，尺寸为100mm×2.1mm，粒径为1.8μm。进一步地，在所述确证步骤中，洗脱程序为等度洗脱；进一步地，在所述确证步骤中，进行测定时的质谱条件如下：配有电喷雾离子化源，ESI+扫描，干燥气温度为350℃，毛细管电压为3.5KV，锥孔电压为120V，干燥气温度为350℃，干燥气流量为10L/min，扫描方式为一级质谱全扫描、二级质谱扫描，扫描范围为100-1000。进一步地，在所述确证步骤中，进行测定前分别进行供试品溶液制备和盐酸氟西汀对照品溶液制备；所述供试品溶液制备步骤如下：取所述筛查步骤中检查呈阳性的供试品溶液作为此步骤中的供试品溶液，用甲醇稀释至与盐酸氟西汀对照品浓度相近的溶液；同法制备阴性样品溶液；所述盐酸氟西汀对照品溶液制备步骤如下：取盐酸氟西汀对照品，置量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每1ml含0.05-0.06mg的盐酸氟西汀储备液。相比现有技术，本专利技术的有益效果在于：(1)本专利技术所提供的检测非法添加盐酸氟西汀的方法，可以作为药品检测方法，具体可用于减肥、瘦身类中成药，减肥类保健食品及瘦身产品中非法添加盐酸氟西汀化学品的定性检查方法(高效液相色谱法)和确证(液质联用法)方法。工作原理为：将供试品用甲醇提取和稀释，C18色谱柱分离，根据高效液相色谱DAD检测器定性检测，一级质谱及二级质谱图确证。(2)本专利技术所提供的检测非法添加盐酸氟西汀的方法，使用基层基本普及的高效液相色谱仪定性筛查和定量，液质联用仪准确确认，既能适用于基层大批量筛选，又能避免假阳性结果。经验证，本方法灵敏度高、选择性好、确证性强、操作简便快捷，可用于减肥、瘦身类中成药，减肥类保健食品及瘦身产品中非法添加盐酸氟西汀的定性筛查和准确确认，为药品监督管理部门、公安系统对减肥类中成药及保健品的打假工作提供可靠的技术支持，保证人民饮食用药安全。附图说明图1为本专利技术检测非法添加盐酸氟西汀的方法流程图；图2为筛查步骤中盐酸氟西汀对照品溶液的色谱图；图3为筛查步骤中盐酸氟西汀对照品溶液的紫外光谱图；图4为筛查步骤中排毒润颜胶囊的色谱图；图5为筛查步骤中黄金坐立瘦胶囊的色谱图；图6为筛查步骤中黄金坐立瘦胶囊色谱峰的紫外光谱图；图7为筛查步骤中窈窕教主胶囊的色谱图；图8为筛查步骤中窈窕教主胶囊色谱峰的紫外光谱图；图9为确证步骤中阴性样品溶液(排毒润颜胶囊)的EIC图；图10A为确证步骤中盐酸氟西汀对照品的EIC图；图10B为确证步骤中盐酸氟西汀对照品的一级质谱图(M+H)+；图10C为确证步骤中盐酸氟西汀对照品的二级质谱图MS/MS；图11A为确证步骤中黄金坐立瘦胶囊样品溶液的EIC图；图11B为确证步骤中黄金坐立瘦胶囊样品溶液的一级质谱图(M+H)+；图11C为确证步骤中黄金坐立瘦胶囊样品溶液的二级质谱图MS/MS；图12A为确证步骤中窈窕教主胶囊样品溶液的EIC图；图12B为确证步骤中窈窕教主胶囊样品溶液的一级质谱图(M+H)+；图12C为确证步骤中窈窕教主胶囊样品溶液的二级质谱图MS/MS。具体实施方式下面，结合附图以及具体实施方式，对本专利技术做进一步描述，需要说明的是，在不相冲突的前提下，以下描述的各实施例之间或各技术特征之间可以任意组合形成新的实施例。一种检测非法添加盐酸氟西汀的方法，包括以下步骤：(1)筛查步骤：高效液相色谱法1.1、色谱条件与系统适用性试验十八烷基硅烷键合硅胶LichrospherC18柱，尺寸为4.6×250mm，粒径为5μm；二极管阵列检测器，检测波长为226nm，扫描波长为210-400nm；柱温为35℃；流速为1.0ml/min；进样体积为20μl；以体积比本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测非法添加盐酸氟西汀的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)筛查步骤：高效液相色谱法；测定：分别取供试品溶液和盐酸氟西汀对照品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图及DAD光谱图；判断：对于供试品，如果检出与盐酸氟西汀对照品色谱保留时间及DAD光谱一致的色谱峰，则采用高效液相色谱‑质谱联用法确证；否则，检测完成；(2)确证步骤：高效液相色谱‑质谱联用法；测定：分别取供试品溶液和盐酸氟西汀对照品溶液，注入高效液相色谱‑质谱联用仪，记录液相色谱图、一级质谱图和二级质谱图；判断：对于供试品，如果检出与盐酸氟西汀对照品色谱保留时间、一级质谱图和二级质谱图一致的色谱峰，则确定供试品非法添加了盐酸氟西汀。

【技术特征摘要】
1.一种检测非法添加盐酸氟西汀的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)筛查步骤：高效液相色谱法；测定：分别取供试品溶液和盐酸氟西汀对照品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图及DAD光谱图；判断：对于供试品，如果检出与盐酸氟西汀对照品色谱保留时间及DAD光谱一致的色谱峰，则采用高效液相色谱-质谱联用法确证；否则，检测完成；(2)确证步骤：高效液相色谱-质谱联用法；测定：分别取供试品溶液和盐酸氟西汀对照品溶液，注入高效液相色谱-质谱联用仪，记录液相色谱图、一级质谱图和二级质谱图；判断：对于供试品，如果检出与盐酸氟西汀对照品色谱保留时间、一级质谱图和二级质谱图一致的色谱峰，则确定供试品非法添加了盐酸氟西汀。2.如权利要求1所述的检测非法添加盐酸氟西汀的方法，其特征在于，在所述筛查步骤中，进行测定时的色谱条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的液相色谱柱；二极管阵列检测器，检测波长为226nm，扫描波长为210-400nm；柱温为35℃；流速为1.0ml/min；进样体积为20μl；以体积比为60:40的甲醇-0.01mol/L醋酸铵溶液为流动相，所述醋酸铵溶液中含0.1％甲酸；理论塔板数以盐酸氟西汀计算，不低于2000。3.如权利要求2所述的检测非法添加盐酸氟西汀的方法，其特征在于，所述色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶LichrospherC18柱，尺寸为4.6×250mm，粒径为5μm。4.如权利要求2所述的检测非法添加盐酸氟西汀的方法，其特征在于，在所述筛查步骤中，洗脱程序为等度洗脱。5.如权利要求1所述的检测非法添加盐酸氟西汀的方法，其特征在于，在所述筛查步骤中，进行测定前分别进行供试品溶液制备和盐酸氟西汀对照品溶液制备；所述供试品溶液制备步骤如下：若供试品为固体制剂，研细，精密称取一次取用量，置量瓶中，加甲醇，超声处理后，放至室温，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过；若供试品为液体制剂，摇匀，精密量取一次取用量，置容量瓶中，加甲醇，振摇，加甲醇稀释至刻...

【专利技术属性】
技术研发人员：申兰慧，杨敏智，陈国清，
申请(专利权)人：无锡市药品安全检验检测中心无锡市药品检验所，
类型：发明
国别省市：江苏,32