一种布洛芬中警示结构物质的液相色谱检测方法技术

本发明专利技术提供了一种测定布洛芬中三个警示结构物质的液相色谱检测方法，所述的杂质分别为氯酮、缩酮、重排酯(布洛芬生产工艺中带氯中间体)。本法采用高效液相色谱法，色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱，柱温为36～44℃；检测波长为氯酮260±5nm/缩酮、重排酯220±5nm；流速为1.8～2.2ml/min；流动相为有机相乙腈占总体积比例为65～75％，水相占总体积比例为25～35％，磷酸加入量占总体积比例为0.04～0.06％；各杂质的专属性、线性及范围、精密度、耐用性等试验均良好；本方法设计合理，流动相配制简单，运行时间短，节约成本，检测方法科学、客观，能简便快捷地检测布洛芬中警示结构物质，可用于布洛芬样品的质量控制，具有实用价值。

A method for the determination of warning structural substances in ibuprofen by high performance liquid chromatography

【技术实现步骤摘要】
一种布洛芬中警示结构物质的液相色谱检测方法
本专利技术属于药品质量检测领域，具体而言，涉及一种测定布洛芬中警示结构物质的液相色谱检测方法。
技术介绍
布洛芬(Ibuprofen)为解热镇痛类非甾体抗炎药。其化学名称2-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸，分子式：C13H18O2，分子量：206.28，其化学结构式为：非甾体类抗炎药(NSAIDs)是一类不含有甾体结构的抗炎药，本药物通过抑制前列腺素的合成，发挥其解热、镇痛、消炎作用。目前非甾体类抗炎药是全球使用最多的药物之一，是治疗类风湿关节炎的首选药物，全世界大约每天3000万人在使用。布洛芬作为抗炎镇痛药临床应用已有30多年历史，在非甾体类抗炎药物中被认为最安全有效。布洛芬能刺激人体和实验动物的细胞免疫功能，增加自然杀伤细胞的活力，提高抗感染能力。目前，EP采用反相色谱法对布洛芬中杂质A、J和N作为已知杂质进行了控制，采用磷酸-乙腈的流动相进行梯度洗脱，洗脱时间为85min，洗脱时间长，缺少警示结构物质的研究。USP只对布洛芬杂质F作为已知杂质进行控制。JP与中国药典均采用薄层色谱法来检查布洛芬中的有关物质，也未提及对其警示结构物质检测，且该方法无法实现杂质的准确定性与定量，灵敏度不高。另外，查询到一篇关于布洛芬有关物质的检测专利《一种布洛芬、其钠盐及其制剂有关物质的检测方法》该方法采用反相色谱系统对布洛芬及其钠盐中已知杂质A、B、C、D、E和F杂质进行检测，采用正相色谱系统对杂质G进行检测，检测的杂质虽然多，但只是对布洛芬常见的杂质进行了汇总和再研究，对其存在的警示结构物质仍未提及，而这些警示结构物质对药物的质量控制及用药安全起着不可忽略的作用。所述的布洛芬中警示结构物质包括：2-氯-1-(4-异丁基苯基)丙-1-酮(下简称氯酮)、2-(1-氯乙基)-2-(4-异丁基苯基)-5,5-二甲基-1,3-二恶烷(下简称重排酯)，化学结构式如下表：
技术实现思路
针对现有技术存在的不足，本方法提供了一种布洛芬中警示结构物质的检测方法。通过采用反相色谱条件检测布洛芬中警示结构物质，此法操作简便，空白溶剂不干扰杂质测定，杂质与布洛芬之间达到良好分离，能够准确定性及定量布洛芬及其警示结构物质情况，并且，利用上述方法可以实现对布洛芬中警示结构物质的质量控制，保证用药安全。为实现上述目的，本专利技术所述的布洛芬中警示结构物质的检测方法按照以下步骤进行：(1)色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；柱温：36～44℃；检测波长：氯酮260±5nm、缩酮和重排酯220±5nm；流速：1.8～2.2ml/min；流动相：乙腈：水＝65～75％：25～35％(V/V)；磷酸加入量为0.04～0.06％(V/V)；(2)供试品溶液：精密称取布洛芬约500mg，置10ml量瓶中，加乙腈溶解稀释至刻度，摇匀；(3)杂质标准溶液：精密称取氯酮、缩酮、重排酯各适量，加乙腈溶解并稀释成每ml约含20μg的溶液，作为杂质混合溶液；精密吸取杂质混合溶液加乙腈稀释成每ml约含0.4μg的溶液，作为杂质标准溶液；(4)测定法：精密量取样品溶液和杂质标准溶液各20μl分别注入液相色谱仪，记录色谱图；按峰面积外标法计算。所述的一种布洛芬中警示结构物质的液相色谱检测方法，所述色谱柱尺寸为4.6×150mm,5um；柱温：40℃；检测波长：氯酮262nm/缩酮、重排酯221nm；流速：2.0ml/min；进样量：20ul；流动相：乙腈：水＝70：30(V/V)；磷酸加入量为0.05％(V/V)；本专利技术通过合理的方法设计，具有以下有益效果：本方法能够实现布洛芬中警示结构物质的有效分离及定量检测，准确定性及定量布洛芬中警示结构物质情况，保证警示结构物质的质量可控，具有现实意义；该方法简便易行，流动相配制简单，仪器为通用的高效液相色谱仪，检测成本低；各杂质的专属性、线性及范围、回收率、精密度、耐用性等试验均良好；与现有技术相比，洗脱时间短，节约成本，能够用更为简便的方法实现对布洛芬中警示结构物质的定性和定量，建立了一种可靠有效的检测标准，弥补了对布洛芬中的警示结构物质研究的缺乏，提高了用药的安全性。附图说明图1是实施例1中布洛芬与各警示结构物质在262nm处系统适应性图；图2是实施例1中布洛芬与各警示结构物质在221nm处系统适应性图；图3是实施例1中警示结构物质氯酮在262nm处HPLC定位图；图4是实施例1中警示结构物质缩酮在221nm处HPLC定位图；图5是实施例1中警示结构物质重排酯在221nm处HPLC定位图；图6是实施例1中警示结构物质氯酮线性图；图7是实施例1中警示结构物质缩酮线性图；图8是实施例1中警示结构物质重排酯线性图；图9是实施例2中布洛芬与各警示结构物质在214nm处分离度图。具体实施方式以下实施例用来说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围实施例1本专利技术方法的建立过程：1.仪器与试剂仪器：高效液相色谱仪(岛津20A)，紫外检测器；色谱柱：十八烷基键合硅胶柱，4.6×150mm,5μm；流速：2.0ml/min；波长：氯酮262nm/缩酮、重排酯221nm；柱温：40℃；进样量：20μl；流动相：乙腈与水相的体积比为70:30；磷酸加入量为0.05％(V/V)。试剂：乙腈：Thermo，HPLC级；磷酸：天津大茂化学试剂有限公司，分析纯；氯酮、缩酮、重排酯为山东新华制药股份公司生产车间提供中间体2.布洛芬警示结构物质测定方法的建立(1)检测波长确定：取氯酮、缩酮、重排酯适量，加乙腈溶解并稀释成约10～20μg/ml的溶液，分别在190～400nm扫描，结果氯酮在262nm附近有较强吸收，缩酮、重排酯分别在220.8nm、219.8nm附近有较强吸收，因此氯酮选用262nm，缩酮、重排酯选用221nm作为检测波长。(2)方法的分离度分别精密吸取各杂质贮备液5ml于同一100ml容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，摇匀，作为杂质混合溶液，精密吸取杂质混合溶液3ml于100ml容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，摇匀，作为150％杂质标准溶液，精密称取布洛芬约500mg，置10ml容量瓶中，加150％杂质标准溶液溶解，稀释至刻度，配制成约含布洛芬50mg/ml、杂质0.4μg/ml的混合液，摇匀，作为分离测试溶液。取溶液20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，结果能清晰分辨出各杂质。(3)专属性取乙腈作为空白溶液，精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，结果对杂质测定无干扰，分别称取氯酮、缩酮、重排酯各约40mg，分别用乙腈溶解至100ml容量瓶中，作为杂质贮备液，分别精密吸取各杂质贮备液用乙腈稀释成约20ug/ml的溶液，分别取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，出峰结果(按出峰顺序)氯酮：3.75分、重排酯：11.06分、缩酮：14.13分，杂质测定互不干扰，此方法专属性强。(4)重复性称取布洛芬约500mg，精密称定，置10ml量瓶中，平行称取6份，每份加杂质标准溶液溶解稀释至刻度，摇匀，作为重复性测定溶液；取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；计算杂质峰面积的相对标准偏差，结果如下表所示，本法布洛芬中氯酮、缩酮、重排酯重复性良好。序号123456RSD(％)氯酮峰面积1674516868本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种布洛芬中警示结构物质的液相色谱检测方法，所述的布洛芬中警示结构物质包括：2‑氯‑1‑(4‑异丁基苯基)丙‑1‑酮(下简称氯酮)、2‑(1‑氯乙基)‑2‑(4‑异丁基苯基)‑5,5‑二甲基‑1,3‑二恶烷(下简称重排酯)，其特征在于：(1)色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；柱温：36～44℃；检测波长：氯酮260±5nm、缩酮和重排酯220±5nm；流速：1.8～2.2ml/min；流动相：乙腈：水＝65～75％：25～35％(V/V)；磷酸加入量为0.04～0.06％(V/V)；(2)供试品溶液：精密称取布洛芬约500mg，置10ml量瓶中，加乙腈溶解稀释至刻度，摇匀；(3)杂质标准溶液：精密称取氯酮、缩酮、重排酯各适量，加乙腈溶解并稀释成每ml约含20μg的溶液，作为杂质混合溶液；精密吸取杂质混合溶液加乙腈稀释成每ml约含0.4μg的溶液，作为杂质标准溶液；(4)测定法：精密量取样品溶液和杂质标准溶液各20μl分别注入液相色谱仪，记录色谱图；按峰面积外标法计算。

【技术特征摘要】
1.一种布洛芬中警示结构物质的液相色谱检测方法，所述的布洛芬中警示结构物质包括：2-氯-1-(4-异丁基苯基)丙-1-酮(下简称氯酮)、2-(1-氯乙基)-2-(4-异丁基苯基)-5,5-二甲基-1,3-二恶烷(下简称重排酯)，其特征在于：(1)色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；柱温：36～44℃；检测波长：氯酮260±5nm、缩酮和重排酯220±5nm；流速：1.8～2.2ml/min；流动相：乙腈：水＝65～75％：25～35％(V/V)；磷酸加入量为0.04～0.06％(V/V)；(2)供试品溶液：精密称取布洛芬约500mg，置10ml量瓶中，加乙腈溶解稀释至刻度，摇匀；(3)...

【专利技术属性】
技术研发人员：丰宇胜，郑忠辉，吴辉，王志萍，雷天莉，
申请(专利权)人：山东新华制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37