一种新型透明质酸流动凝胶及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种新型透明质酸流动凝胶及其制备方法和应用，所述制备方法包括以下步骤：制备酸性冷冻解冻透明质酸凝胶；制备中性冷冻解冻透明质酸凝胶；对中性冷冻解冻透明质酸凝胶进行冷冻干燥及破碎处理以及制备透明质酸流动凝胶。本发明专利技术制备的透明质酸流动凝胶是一类物理凝胶，不含交联剂，不会造成化学物质残留，不会带来潜在的细胞毒性；并且具备生物相容性良好、抗降解性能强并且可注射等有点，可以应用于骨关节炎治疗、术后防粘连、伤口愈合以及美容填充等。

A new hyaluronic acid mobile gel and its preparation and Application

【技术实现步骤摘要】
一种新型透明质酸流动凝胶及其制备方法和应用
本专利技术涉及生物材料
，尤其涉及一种新型透明质酸流动凝胶的制备方法及其应用。
技术介绍
透明质酸(Hyaluronicacid,HA)是由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰氨基葡聚糖通过β-(1,4)和β-(1,3)糖苷键连接的线性聚阴离子多糖。透明质酸是一种生物可降解多糖，它可以被广泛存在于哺乳动物组织中的透明质酸酶降解。另外，透明质酸能和软骨细胞表面的CD44受体特异性结合，它与细胞的转移、增殖、和分化等功能密切相关。因此，透明质酸常被用作生物材料应用于组织工程。然而透明质酸最大的不足是在组织内会迅速降解。为了降低降解速率，将透明质酸分子进行交联进而延缓降解是最常用的方法。骨关节炎是老年人中广泛存在的一种慢性的关节退化疾病。骨关节炎会损坏关节软骨和周围的胞外基质。非甾体类抗炎药广泛用于骨关节炎治疗，然而这些药只能减轻疼痛感而不能减轻疾病恶化程度。过去几十年，透明质酸作为关节液的重要组成部分，已经被用作一种很好的粘弹性补充剂来治疗骨关节炎(FakhariA,BerklandC.Applicationsandemergingtrendsofhyaluronicacidintissueengineering,asadermalfillerandinosteoarthritistreatment.Actabiomaterialia,2013,9(7):7081-7092.)。但是透明质酸在透明质酸酶的作用下，迅速降解，从而限制了其在治疗骨关节炎中的应用。为了降低降解速率，现有技术主要通过化学交联透明质酸来提供抗降解性能(中国专利技术专利CN200580047101.3；BarbucciR,LamponiS,BorzacchielloA,etal.Hyaluronicacidhydrogelinthetreatmentofosteoarthritis.Biomaterials,2002,23(23):4503-4513)。然而，透明质酸化学凝胶在生产的过程中因为化学物质的残留，使得透明质酸凝胶可能有着潜在的细胞毒性。手术后腹膜粘连是一种非常常见且严重的并发症。当腹膜产生缺陷时，整个腹膜表面同时上皮化而不是从边界逐渐变为上皮化，从而导致腹膜粘连。腹膜粘连是由于机械或热损伤、缺血、磨损、感染或异物反应等是组织损伤的而引起的。术后腹膜粘连可能引起慢性疼痛、不孕，甚至致命的肠梗阻。通过对剖腹手术的临床和尸检研究，发现腹腔内粘连的发生率高达90％。现在已经有许多方法用于来防止术后粘连。基于药理学和嵌入屏障装置是防止粘连的两种重要方法。许多局部或全身抗炎药和抗凝药，如阿司匹林，地塞米松和肝素，已被用于术后防粘连，但均没有取得令人满意的治疗效果。用于术后防粘连的屏障装置，主要有聚合物溶液(中国专利技术专利CN106496599A公开了高粘度透明质酸钠凝胶及其制备方法；GraingerDA,MeyerWR,DeCherneyAH,DiamondMP.Theuseofhyaluronicacidpolymerstoreducepostoperativeadhesions.JGynecolSurg1991；7:97-101.)，预成型固体片(中国专利技术专利CN108187121A公开了一种术后止血防黏连医用敷料的制备方法；中国专利技术专利CN104014002A公开一种透明质酸基术后防黏连膜)和水凝胶(LiL,WangN,JinX,etal.Biodegradableandinjectableinsitucross-linkingchitosan-hyaluronicacidbasedhydrogelsforpostoperativeadhesionprevention.Biomaterials,2014,35(12):3903-3917)等类型。然而对于聚合物溶液，如透明质酸钠，它的持续时间短以及治疗效果差；对于预成型固体片，很难完全覆盖受伤表面，并且难以将这些材料固定到受损组织上，从而降低防粘连的效率。因此，交联制得的水凝胶受到了很大关注。最近，许多基于透明质酸的水凝胶已被用作术后防粘连。然而，相对较长的交联限制了水凝胶的防粘连效果。因此，开发一种安全、高效、保留时间长的防粘连材料仍然是一个很大的挑战。皮肤是人体与外界环境的屏障，保护各种器官受外来病原微生物的侵袭。当皮肤受损时，如果没法进行立刻治疗，那么必须在伤口表面覆盖敷料来防止伤口进一步恶化。感染是伤口创伤最常见的并发症，它会导致伤口愈合进度缓慢。为了促进伤口愈合并降低伤口感染风险，现在临床上主要应用抗菌材料覆盖在伤口表面。然而抗菌材料无法降解，并且具有较差的生物相容性。最近研究表明，将透明质酸凝胶作为一种敷料，可以用于伤口愈合(Glycosaminoglycanhydrogelfilmsasbio-interactivedressingsforwoundhealing.Biomaterials,2002,23(17):3661-3671.)，但是该透明质酸凝胶通过化学交联剂制得，生物相容性受到限制。因此，开发一种高生物相容性的透明质酸凝胶显得尤为迫切。人的皮肤分为表皮和真皮。表皮细胞主要由角化细胞、黑素细胞和朗格汉斯细胞组成。而真皮细胞主要由纤维细胞和细胞外基质构成。细胞外基质主要由胶原、弹性蛋白等组成。随着年龄的增长，胶原纤维更新能力下降从而导致真皮变薄。皮肤老化过程中最显著的特征就是细纹或者皱纹的出现，这些细纹或者皱纹主要是皮肤表面的凹陷或者折痕。现在已经有很多方法用来抗皱纹和填充皮肤凹陷，其中最主要的方法是填充填料。透明质酸由于其良好的生物相容性和无毒性等特性，使得透明质酸广泛应用于整容行业(中国专利技术专利CN101795660A公开了包含透明质酸的化妆品或药物组合物和用于减轻老化迹象的美容方法)。然而透明质酸易于降解，另外化学交联的透明质酸凝胶中的交联剂容易导致皮肤产生炎症反应。因此，高生物相容性和高抗降解性透明质酸凝胶可以扩大其在临床上的应用价值。因此，本领域的技术人员致力于开发一种新型透明质酸流动凝胶及其制备方法，该透明质酸流动凝胶通过物理方法制得，具有高粘弹性、抗降解性能、生物相容性、可注射性、无潜在的细胞毒性等优点，可以应用于骨关节炎治疗、术后防粘连、伤口愈合以及美容填充等。
技术实现思路
有鉴于现有技术的上述缺陷，本专利技术所要解决的技术问题是如何克服透明质酸的易降解性，并且提高透明质酸凝胶的可注射性和生物安全性，从而解决现有技术中透明质酸用于骨关节治疗、术后防粘连、伤口愈合以及美容填充等效果差的问题。为实现上述目的，本专利技术提供了一种新型透明质酸流动凝胶的制备方法，包括：步骤1：将透明质酸溶于去离子水中形成透明质酸溶液，然后调节溶液的pH至酸性，将所得的酸性透明质酸溶液分装至称量瓶中并密封冷冻，然后取出所述称量瓶进行下解冻，重复冷冻解冻过程获得酸性冷冻解冻透明质酸凝胶；步骤2：将所述酸性冷冻解冻透明质酸凝胶转移至透析袋中并置于缓冲液中透析，随后转入去离子水中透析，直到所述酸性冷冻解冻透明质酸凝胶的pH值为中性，然后将所得凝胶从所述透析袋中取出，获得中性冷冻解冻透明质酸凝胶；步骤3：在真空条件下对所述中性冷冻解冻凝胶进行冷本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种新型透明质酸流动凝胶的制备方法，其特征在于，包括：步骤1：将透明质酸溶于去离子水中形成透明质酸溶液，然后调节溶液的pH至酸性，将所得的酸性透明质酸溶液分装至称量瓶中并密封冷冻，然后取出所述称量瓶进行下解冻，重复冷冻解冻过程获得酸性冷冻解冻透明质酸凝胶；步骤2：将所述酸性冷冻解冻透明质酸凝胶转移至透析袋中并置于缓冲液中透析，随后转入去离子水中透析，直到所述酸性冷冻解冻透明质酸凝胶的pH值为中性，然后将所得凝胶从所述透析袋中取出，获得中性冷冻解冻透明质酸凝胶；步骤3：在真空条件下对所述中性冷冻解冻凝胶进行冷冻干燥，随后将制得的透明质酸冻干胶破碎；步骤4：将破碎的透明质酸冻干胶溶于透明质酸溶液中，形成透明质酸流动凝胶。

【技术特征摘要】
1.一种新型透明质酸流动凝胶的制备方法，其特征在于，包括：步骤1：将透明质酸溶于去离子水中形成透明质酸溶液，然后调节溶液的pH至酸性，将所得的酸性透明质酸溶液分装至称量瓶中并密封冷冻，然后取出所述称量瓶进行下解冻，重复冷冻解冻过程获得酸性冷冻解冻透明质酸凝胶；步骤2：将所述酸性冷冻解冻透明质酸凝胶转移至透析袋中并置于缓冲液中透析，随后转入去离子水中透析，直到所述酸性冷冻解冻透明质酸凝胶的pH值为中性，然后将所得凝胶从所述透析袋中取出，获得中性冷冻解冻透明质酸凝胶；步骤3：在真空条件下对所述中性冷冻解冻凝胶进行冷冻干燥，随后将制得的透明质酸冻干胶破碎；步骤4：将破碎的透明质酸冻干胶溶于透明质酸溶液中，形成透明质酸流动凝胶。2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1中，所述透明质酸溶液的质量百分比为1％-10％，所述酸性透明质酸溶液的pH为0～5。3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1...

【专利技术属性】
技术研发人员：张洪斌，蔡志祥，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：上海,31