一种反映IgG4相关性疾病的疾病活动性的生物标志物及其用途制造技术

本发明专利技术公开了Morniga M凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素在制备用于反映IgG4相关性疾病的疾病活动性的试剂中的用途。本发明专利技术通过采用凝集素微阵列检测IgG4‑RD患者血清IgG4分子表面与凝集素特异性结合的聚糖谱，结果显示，与MNA‑M和VVA mannose凝集素结合聚糖的含量在IgG4‑RD患者中是升高的。由于MNA‑M和VVA mannose凝集素均是特异性的结合甘露糖，这表明甘露糖基化水平在IgG4‑RD患者中是增高表达的。进一步研究发现，甘露糖基化水平与疾病的活动性相关，并且与外分泌腺，如唾液腺及泪腺的受累相关。高甘露糖基化可以反映IgG4‑RD患者疾病活动性，可被用作IgG4‑RD疾病活动性的生物标志物。

A biomarker reflecting disease activity of IgG4-related diseases and its use

【技术实现步骤摘要】
一种反映IgG4相关性疾病的疾病活动性的生物标志物及其用途
本专利技术属于生物检测领域，具体涉及一种反映IgG4相关性疾病的疾病活动性的生物标志物及其用途。
技术介绍
聚糖与核酸、蛋白质、脂质一起，为构成生命体系的四种基本分子。糖蛋白表面连接的，具有结构多样性的糖分子被称为聚糖。糖基化是蛋白质翻译后修饰最常见和复杂形式之一，其影响糖蛋白的生物学功能，例如维持细胞稳定性，调节细胞活性，介导细胞粘附及分泌等。当机体处于炎症和自身免疫状态中，糖蛋白上黏附的聚糖可以与免疫效应分子相互作用，产生特征性糖基化形式，表现出疾病特异性的糖基化谱。越来越多的证据表明，自身免疫性疾病(AID)中特征性的糖基化谱可用作疾病发病机制、生物标志物、其他临床应用及疾病管理过程的指标。AID是一组以针对机体自身抗原产生自身抗体的炎症性疾病，它包括超过80种疾病。IgG4相关性疾病(IgG-RD)便是AID中的一种。IgG4-RD是十年前由日本胃肠病学家Kamisawa博士在自身免疫性胰腺炎(AIP)患者的其他受累器官中观察到AIP相同的病理学改变时提出的，它是一种多器官纤维炎性疾病，其特征在于患者血清IgG4的水平异常升高，形成炎性假瘤并且在受累的器官中产生大量分泌IgG4的分泌型浆母细胞。目前，对于IgG4-RD疾病认识和研究都处在发展阶段，同时也缺乏可靠的指标对疾病进行诊断及反映疾病活动性。
技术实现思路
为了解决上述问题，本专利技术提供一种反映IgG4相关性疾病的疾病活动性的生物标志物及其用途。首先，本专利技术提供一种反映IgG4相关性疾病的疾病活动性的生物标志物，其为MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素与IgG4结合所形成的复合物。其中，所述的IgG4含有甘露糖聚糖。其次，本专利技术还提供所述标志物在制备用于反映IgG4相关性疾病的疾病活动性的试剂中的用途。具体地，所述反映IgG4相关性疾病的疾病活动性包括：测定获自呈现IgG4相关性疾病的患者的生物样品中MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素与IgG4结合所形成的复合物的水平；任选地，与对照数据比较所述生物样品中MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素与IgG4结合所形成的复合物的水平，其中，相对于所述对照数据，所述样品中MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素与IgG4结合所形成的复合物的水平可检测地提高可反映IgG4相关性疾病的疾病活动性。其中，所述生物样品为血清样品。优选的，MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素与IgG4结合所形成的复合物的水平通过以下步骤来测量，包括：a.使来自患者的生物样品与MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素接触；b.在生物样品中存在的IgG4与MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素之间形成凝集素-聚糖复合物；c.洗涤来除去任何未结合的IgG4；d.添加被标记的并且对来自生物样品的抗体为反应性的检测抗体；e.洗涤来除去任何未结合的被标记的所述检测抗体；和f.将所述检测抗体的标记物转化为可检测信号。另一方面，本专利技术还提供MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素在制备用于反映IgG4相关性疾病的疾病活动性的试剂中的用途。其中，所述诊断包括：将MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素与测定获自呈现IgG4相关性疾病的患者的生物样品进行接触，测定MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素与IgG4结合所形成的复合物的水平；任选地，与对照数据比较所述生物样品中MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素与IgG4结合所形成的复合物的水平，其中，相对于所述对照数据，所述样品中MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素与IgG4结合所形成的复合物的水平可检测地提高可反映IgG4相关性疾病的疾病活动性。其中，所述生物样品为血清样品。优选的，MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素与IgG4结合所形成的复合物的水平通过以下步骤来测量，包括：a.使来自患者的生物样品与MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素接触；b.在生物样品中存在的IgG4与MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素之间形成凝集素-聚糖复合物；c.洗涤来除去任何未结合的IgG4；d.添加被标记的并且对来自生物样品的抗体为反应性的检测抗体；e.洗涤来除去任何未结合的被标记的所述检测抗体；和f.将所述检测抗体的标记物转化为可检测信号。其中，所述的MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素沉积或固定在固相表面载体上。其中，所述的表面载体优选为乳胶珠子、多孔平板或膜条、纳米管道、带二维码的薄片等的形式。其中，所述检测抗体通过共价连接到酶、具有荧光化合物或金属的标记物、或具有化学发光化合物的标记物来标记。另一方面，本专利技术还提供一种用于检测和/或定量生物样品中能与MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素结合的IgG4的诊断试剂盒，包括：一种固相表面载体，其中，所述的MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素沉积或固定在固相表面载体上，其中，MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素与IgG4结合所形成的复合物作为反映IgG4相关性疾病的疾病活动性的生物标志物。在本专利技术优选的实施方案中，所述试剂盒还包括被标记的并且对来自生物样品的抗体为反应性的检测抗体。优选地，所述表面载体是乳胶珠子、多孔平板或膜条、纳米管道、带二维码的薄片等的形式。本专利技术通过采用凝集素微阵列检测IgG4-RD患者血清IgG4分子表面与凝集素特异性结合的聚糖谱，结果显示，与MNA-M和VVAmannose凝集素结合聚糖的含量在IgG4-RD患者中是升高的。由于MNA-M和VVAmannose凝集素均是特异性的结合甘露糖，这表明甘露糖基化水平在IgG4-RD患者中是增高表达的。进一步研究发现，甘露糖基化水平与疾病的活动性相关，并且与外分泌腺，如唾液腺、腮腺及泪腺的受累相关。人IgG作为糖蛋白，含有少量甘露糖结构。研究表明，具有高甘露糖型的IgGFc聚糖可通过结合甘露糖受体来影响IgG半衰期，使IgG能更快的从血清中代谢。另有研究证实，IgG的高甘露糖结构增强了抗体依赖细胞毒活性(ADCC)活性并影响了IgG效应功能。此外，高水平的甘露糖基化可降低对补体C1q的结合亲和力，从而减弱补体依赖性细胞毒性(CDC)的作用。结合我们的结果，我们表明血清IgG4高甘露糖基化的可被用作预测IgG4-RD疾病活动性的潜在标志物。IgG4-RD血清甘露糖基化(MNA-M和VVA-mannose凝集素反应性)水平是增高表达的，高甘露糖基化可以反映IgG4-RD患者疾病活动性，可被用作IgG4-RD疾病活动性的生物标志物。附图说明图1所示为凝集素微整列56个凝集素(三复孔)在阵列载玻片的布局。图2所示为IgG4-RD患者凝集素微阵列示意图。图3IgG4-RD组、DC组和HC组MNA-M凝集素信号值比较(**：P<0.01)。图4所示为IgG4-RD组、DC组和HC组VVA-mannose凝集素信号值比较(**：P<0.01)。图5所示为纯化前后IgG4浓度的相关性。图6所示为凝集素微阵列中血清IgG4与纯化的IgG4之间MNA-M凝集素信号值的相关本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种反映IgG4相关性疾病的疾病活动性的生物标志物，其为Morniga M凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素与IgG4结合所形成的复合物。

【技术特征摘要】
1.一种反映IgG4相关性疾病的疾病活动性的生物标志物，其为MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素与IgG4结合所形成的复合物。2.权利要求1所述的生物标志物在制备用于反映IgG4相关性疾病的疾病活动性的试剂中的用途。3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述反映IgG4相关性疾病的疾病活动性包括：测定获自呈现IgG4相关性疾病的患者的生物样品中MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素与IgG4结合所形成的复合物的水平；任选地，与对照数据比较所述生物样品中MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素与IgG4结合所形成的复合物的水平，其中，相对于所述对照数据，所述样品中MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素与IgG4结合所形成的复合物的水平可检测地提高可反映IgG4相关性疾病的疾病活动性。4.MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素在制备用于反映IgG4相关性疾病的疾病活动性的试剂中的用途。5.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述反映IgG4相关性疾病的疾病活动性包括：将MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素与测定获自呈现IgG4相关性疾病的患者的生物样品进行接触，测定MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素与IgG4结合所形成的复合物的水平；任选地，与对照数据比较所述生物样品中MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素与IgG4结合所形成的复合物的水平，其中，相对于所述对照数据，所述样品中MornigaM凝集素和/或长柔毛野豌豆凝集素与IgG4结合所形成的复合物的水平可检测地提高可反映IgG4相关性疾病的疾病活动性。6.如权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡朝军，张文，李永哲，张盼盼，李洁琼，
申请(专利权)人：中国医学科学院北京协和医院，
类型：发明
国别省市：北京,11