一种檀香紫檀HPLC标准指纹图谱及其构建方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种檀香紫檀HPLC标准指纹图谱，其具有6个特征峰，其中保留时间最长的所述特征峰的峰面积最大；以该峰面积最大的所述特征峰为参照峰，6个所述特征峰的相对保留时间tg分别为：0.085，0.099，0.133，0.160，0.271，1.000，RSD％

A standard fingerprint of sandalwood and red sandalwood by HPLC and its construction method and Application

【技术实现步骤摘要】
一种檀香紫檀HPLC标准指纹图谱及其构建方法和应用
本专利技术属于木材鉴别
，涉及一种檀香紫檀HPLC(高效液相色谱)标准指纹图谱及其构建方法和应用，该应用为檀香紫檀HPLC标准指纹图谱在鉴别檀香紫檀真伪方面的应用。
技术介绍
檀香紫檀(Pterocarpussantalinus)是一种蝶形花科，紫檀属树木，又名印度小叶紫檀。乔木，高8到11米，主产印度。坚实厚重，木质细腻，密度较大，耐雕琢，颜色呈深紫或黑紫色。檀香紫檀生长极其缓慢，要生长几百年甚至上千年，因其出材率极低，资源奇缺，所以价格昂贵，居各木之首。在巨大的利益驱使下，檀香紫檀的假冒品泛滥。如何准确鉴定檀香紫檀成为市场交易上的最大难题。目前对檀香紫檀的鉴别技术主要是依据基于人工经验的传统植物学分类法宏观构造特征归类，我国现行的国家标准GB/T18107-2017《红木》对檀香紫檀的鉴别方法加以木材解剖学为依据。但是以上方法操作过程复杂，对样品的损伤严重，结果也有一定的主观不确定性。也有人尝试将分子生物学DNA鉴定技术引入红木的鉴定中来，但是由于红木样品无论是家具还是木材往往保存时间已经很长，由于红木是心木，心木的细胞往往已经死亡很久，DNA受到很大程度的破坏，DNA的提取受到很大限制，所以很难应用到实际中。化学指纹图谱技术根据天然物质中化学物质整体信息为基础，借助数据挖掘技术和化学计量学算法进行指纹图谱构建，在天然物质的真伪鉴别上已经应用很广，特别是在中药材的质量控制、道地性和真伪鉴别方面受到国际社会的认可。目前还没有将化学指纹图谱技术应用在檀香紫檀的真伪鉴别中。
技术实现思路
为解决现有技术中檀香紫檀真伪鉴别不具有客观统一的标准，结果受主观不确定因素影响大的问题，而且会损伤样品。本专利技术提供一种檀香紫檀HPLC标准指纹图谱构建方法及其指纹图谱，可有效鉴别檀香紫檀真伪，由于取样量少，对于样品来说是无损检测。本专利技术公开了一种檀香紫檀HPLC标准指纹图谱，其具有6个特征峰，其中保留时间最长的所述特征峰的峰面积最大；以该峰面积最大的所述特征峰为参照峰，6个所述特征峰的相对保留时间tg分别为：0.085，0.099，0.133，0.160，0.271，1.000，RSD％<2％。进一步地，6个所述特征峰的相对峰面积分别为：0.0207，0.0790，0.0535，0.0144，0.0290，1.000，RSD<1.0。进一步地，6个所述特征峰的保留时间分别为：7.533min、8.731min、11.721min、14.150min、23.895min、88.165min，RSD％<2％。本专利技术还公开了一种如上所述的檀香紫檀HPLC标准指纹图谱的构建方法，其包括以下步骤：步骤一、供试品溶液的制备：称取檀香紫檀心材部分木屑，加入甲醇、高纯水，震摇，超声提取，滤纸过滤，微孔滤膜过滤，得到所述供试品溶液；步骤二、HPLC检测：将所述步骤一得到的供试品溶液进行HPLC检测，色谱条件为：AgilentEclipseXDB-C18，填料粒径5μm，柱长250mm，柱内径4.6mm；以水为流动相A，乙腈为流动相B，采用梯度洗脱方式：从0～20min，流动相B的体积百分含量由8％提高至23％，流动相A的体积百分含量由92％降低至77％；从20～33min,流动相B的体积百分含量为23％，流动相A的体积百分含量为77％；从33～43min，流动相B的体积百分含量由23％提高至30％，流动相A的体积百分含量由77％降低至70％；从43～53min,流动相B的体积百分含量30％，流动相A的体积百分含量为70％；从53～69min，流动相B的体积百分含量由30％提高至38％，流动相A的体积百分含量由70％降低至62％；从69～76min，流动相B的体积百分含量38％，流动相A的体积百分含量为62％；从76～91min，流动相B的体积百分含量由38％提高至49％，流动相A的体积百分含量由62％降低至51％；从91～92min，流动相B的体积百分含量49％，流动相A的体积百分含量为51％；从92～95min，流动相B的体积百分含量由49％降低至8％，流动相A的体积百分含量由51％提高至92％；从95～103min，流动相B的体积百分含量8％，流动相A的体积百分含量为92％；检测波长为290nm；柱温30℃；流速1.0mL/min；得到HPLC检测结果。进一步地，所述步骤一具体为：称取檀香紫檀心材部分木屑0.2g，置于50mL离心管中，加入5mL甲醇、5mL高纯水，震摇5min，超声提取5min，滤纸过滤，再以0.2μm的微孔滤膜过滤，得到所述供试品溶液。进一步地，还包括步骤三、分析比较多批来源不同的檀香紫檀的HPLC检测结果，得到由其共有特征峰构成的所述檀香紫檀HPLC标准指纹图谱。进一步地，所述步骤三具体为：将所述多批来源不同的檀香紫檀的HPLC检测结果导入国家药典委员会颁布的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012版)，选取时间窗宽度为0.2min，以中位数生成对照谱图，经过多点校正后自动匹配，生成檀香紫檀指纹图谱共有模式，并计算所述多批来源不同的檀香紫檀的HPLC检测结果与该檀香紫檀指纹图谱共有模式的相似度，使得所述相似度在0.9以上(≥0.9)。本专利技术还公开了如上所述的檀香紫檀HPLC标准指纹图谱在鉴别檀香紫檀真伪方面的应用。进一步地，其应用方法为：疑似檀香紫檀的样品的HPLC指纹图谱与所述檀香紫檀HPLC标准指纹图谱对比，根据其相似度是否大于等于0.9以及共有特征峰的有无，进行檀香紫檀真伪鉴别。进一步地，所述疑似檀香紫檀的样品的HPLC指纹图谱的获得，采用了如上所述的方法制备供试品溶液和进行HPLC检测。进一步地，将所述疑似檀香紫檀的样品的HPLC指纹图谱通过相似度分析软件与所述檀香紫檀HPLC标准指纹图谱，以6个共有特征峰7.533min、8.731min、11.721min、14.150min、23.895min、88.165min，进行多点校正，并以所述共有特征峰作为Mark峰进行匹配；对于HPLC指纹图谱与所述檀香紫檀HPLC标准指纹图谱的相似度≥0.9，且特征峰的相对保留时间与对应的所述共有特征峰的相对保留时间0.085，0.099，0.133，0.160，0.271，1.000，RSD％<2％的所述疑似檀香紫檀的样品，鉴定结果为檀香紫檀；否则是否是檀香紫檀存疑。本专利技术具有如下优点和用途：通过高效液相色谱(HPLC)建立檀香紫檀HPLC标准指纹图谱(模型)；对于通过木材形态学鉴定的疑似檀香紫檀的红木，如果疑似檀香紫檀样品的HPLC指纹图谱与建立檀香紫檀HPLC标准指纹图谱(模型)采用相同的色谱柱和色谱条件，那么可以利用指纹图谱相似度软件分析相似度，结合共有特征峰相对保留时间的标准偏差进行真伪判断。由于取样量少，对于样品来说是无损检测。为檀香紫檀真伪鉴定提供了新的技术手段，可作为现有真伪识别方法的一种验证和补充，结果准确可靠。附图说明图1为檀香紫檀HPLC标准指纹图谱；图2为10批檀香紫檀的HPLC指纹图谱叠加图；图3为样品A与檀香紫檀HPLC标准图谱叠加图。具体实施方式下面结合附图对本专利技术做进一步的描述。一.建立檀香紫檀本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种檀香紫檀HPLC标准指纹图谱，其特征在于，具有6个特征峰，其中保留时间最长的所述特征峰的峰面积最大；以该峰面积最大的所述特征峰为参照峰，6个所述特征峰的相对保留时间tg分别为：0.085，0.099，0.133，0.160，0.271，1.000，RSD％<2％。

【技术特征摘要】
1.一种檀香紫檀HPLC标准指纹图谱，其特征在于，具有6个特征峰，其中保留时间最长的所述特征峰的峰面积最大；以该峰面积最大的所述特征峰为参照峰，6个所述特征峰的相对保留时间tg分别为：0.085，0.099，0.133，0.160，0.271，1.000，RSD％<2％。2.如权利要求1所述的檀香紫檀HPLC标准指纹图谱，其特征在于，6个所述特征峰的相对峰面积分别为：0.0207，0.0790，0.0535，0.0144，0.0290，1.000，RSD<1.0。3.一种如权利要求1所述的檀香紫檀HPLC标准指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、供试品溶液的制备：称取檀香紫檀心材部分木屑，加入甲醇、高纯水，震摇，超声提取，滤纸过滤，微孔滤膜过滤，得到所述供试品溶液；步骤二、HPLC检测：将所述步骤一得到的供试品溶液进行HPLC检测，色谱条件为：AgilentEclipseXDB-C18，填料粒径5μm，柱长250mm，柱内径4.6mm；以水为流动相A，乙腈为流动相B，采用梯度洗脱方式：从0～20min，流动相B的体积百分含量由8％提高至23％，流动相A的体积百分含量由92％降低至77％；从20～33min,流动相B的体积百分含量为23％，流动相A的体积百分含量为77％；从33～43min，流动相B的体积百分含量由23％提高至30％，流动相A的体积百分含量由77％降低至70％；从43～53min,流动相B的体积百分含量30％，流动相A的体积百分含量为70％；从53～69min，流动相B的体积百分含量由30％提高至38％，流动相A的体积百分含量由70％降低至62％；从69～76min，流动相B的体积百分含量38％，流动相A的体积百分含量为62％；从76～91min，流动相B的体积百分含量由38％提高至49％，流动相A的体积百分含量由62％降低至51％；从91～92min，流动相B的体积百分含量49％，流动相A的体积百分含量为51％；从92～95min，流动相B的体积百分含量由49％降低至8％，流动相A的体积百分含量由51％提高至92％；从95～103min，流动相B的体积百分含量8％，流动相A的体积百分含量为92％；检测波长...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏建华，吴剑光，魏霜，刘玉莉，刘碧琳，
申请(专利权)人：汕头出入境检验检疫局检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：广东,44