一种具有抗HBV作用的中药活性部位及制备方法与应用技术

本发明专利技术涉及天然药物化学技术领域，具体公开了一种具有抗HBV作用的中药活性部位及制备方法与应用。该方法是以中药苦豆子为原料，采用超临界二氧化碳萃取法萃取得到；所述的超临界二氧化碳萃取法的具体条件为：萃取压力为10～30兆帕，萃取温度为30～40℃，流速为5～15升/小时，萃取时间为2～3小时。由该方法制备得到的中药活性部位具有显著的抗HBV作用，且其抗HBV作用与现有治疗乙肝药物苦参素胶囊以及苦参素片中的主要成分氧化苦参碱的抗HBV作用相当甚至更强。

Active fraction, preparation method and application of a traditional Chinese medicine with anti-HBV effect

【技术实现步骤摘要】
一种具有抗HBV作用的中药活性部位及制备方法与应用
本专利技术涉及天然药物化学
，具体涉及一种具有抗HBV作用的中药活性部位及制备方法与应用。
技术介绍
乙型肝炎病毒(HepatitisBVirus,HBV)感染可引起急性和慢性乙型肝炎，是导致肝硬化、肝癌等严重肝脏疾患的最主要原因之一，长期以来一直都是一个严重的世界性医疗健康难题。据WHO统计，全世界约有20亿人曾经感染HBV，其中有3.5～4.0亿成为慢性携带者，有15％～40％的慢性HBV感染者可发展为肝硬化或肝细胞肝癌(Hepatocellularcarcinoma,HCC)，全球每年约有100万人死于HBV相关疾病。HBV是造成全球公共健康问题的主要病毒之一，严重威胁着人类的健康，尽管HBV疫苗的广泛应用和婴幼儿计划免疫项目的推广对乙肝的预防起到了积极的作用，但乙肝的治疗仍然是公众关注的棘手问题。过去十几年，核苷类似物的出现使乙肝的治疗有了重要的进展，然而长期用药引起耐药性病毒变异株的出现限制了它们的临床效果。因此，发现新机制的抗乙肝药物一直是药物研究的重点之一。苦豆子为豆科槐属植物苦豆子(SophoraalopecuroidesL.)的干燥种子，又名苦豆根、苦甘草、布亚(维吾尔语)等。广泛分布于西亚及中亚地区，我国主要分布于西北一带。作为一种传统中药，苦豆子具有清热燥湿、止痛、杀虫之功效；传统上用于治疗痢疾，白带过多，湿疹，疮疖，顽癣等症。现代研究表明苦豆子的主要成分为生物碱类和黄酮类成分，苦豆子生物碱中的绝大多数为苦参碱型生物碱，其具有抗病毒、抗菌、抗肿瘤和镇痛等多种药理活性。目前，苦豆子及其次生代谢产物已被制备成多种药物制剂应用于临床治疗中，如苦参素胶囊、苦参素片、苦参碱注射液、苦参碱栓、苦参碱肠溶片、苦豆子片、苦豆子油搽剂、克泄灵片等等。其中，苦参素胶囊、苦参素片是临床常用的治疗慢性乙型肝炎的药物，其主要成分为氧化苦参碱，在我国已经应用十多年，主要用于治疗慢性乙型肝炎，以及放疗和化疗引起的白细胞减少等，其抗乙型肝炎病毒的效应已被越来越多的基础研究与临床研究所证实。因此，以苦豆子为基础，继续开发具有抗HBV作用的有效成分具有重要的意义。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是，提供一种具有抗HBV作用的中药活性部位及其制备方法与应用，由该方法制备得到的中药活性部位的抗HBV作用效果显著。本专利技术所要解决的上述技术问题，通过以下技术方案予以实现：一种具有抗HBV作用的中药活性部位的制备方法，以中药苦豆子为原料，采用超临界二氧化碳萃取法萃取得到；所述的超临界二氧化碳萃取法的具体条件为：萃取压力为10～30兆帕，萃取温度为30～40℃，流速为5～15升/小时，萃取时间为2～3小时。优选地，所述的超临界二氧化碳萃取法的具体条件为：萃取压力为15兆帕，萃取温度为35℃，流速为10升/小时，萃取时间为2.5小时。优选地，所述的超临界二氧化碳萃取法，还使用乙酸乙酯作为夹带剂。进一步优选地，所述夹带剂的质量用量为苦豆子质量的10％～15％。优选地，所述的苦豆子经超临界二氧化碳萃取法萃取后，将得到的苦豆子萃取物再进行ODS柱层析；所述的ODS柱层析的具体方法为：将苦豆子萃取物上ODS柱，先用体积分数为40～50％的甲醇洗脱除杂；再用体积分数为70～80％的甲醇洗脱；收集体积分数为70～80％的甲醇洗脱部位，浓缩干燥即得所述的具有抗HBV作用的中药活性部位。进一步优选地，所述的ODS柱层析的具体方法为：将苦豆子萃取物上ODS柱，先用体积分数为45％的甲醇洗脱除杂；再用体积分数为75％的甲醇洗脱；收集体积分数为75％的甲醇洗脱部位，浓缩干燥即得所述的具有抗HBV作用的中药活性部位。优选地，先用2～5倍柱体积的体积分数为40～50％的甲醇洗脱除杂；再用3～6倍柱体积的体积分数为70～80％的甲醇洗脱。进一步优选地，先用3倍柱体积的体积分数为40～50％的甲醇洗脱除杂；再用5倍柱体积的体积分数为70～80％的甲醇洗脱。所述柱体积是指用ODS填料装柱后，从柱底到ODS填料沉积表面的体积。本专利技术还提供一种由上述制备方法制备得到的具有抗HBV作用的中药活性部位。本专利技术同时提供所述的具有抗HBV作用的中药活性部位在制备乙肝药物中的应用。本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果：(1)本专利技术提供了一种全新的具有抗HBV作用的中药活性部位的制备方法，由该方法制备得到的中药活性部位具有显著的抗HBV作用，且其抗HBV作用与现有治疗乙肝药物苦参素胶囊以及苦参素片中的主要成分氧化苦参碱的抗HBV作用相当甚至更强；(2)由于本专利技术所述的中药活性部位抗HBV作用显著，可以用于开发治疗乙肝药物。具体实施方式以下结合具体实施例来进一步解释本专利技术，但实施例对本专利技术不做任何形式的限定。实施例1具有抗HBV作用的中药活性部位的制备具有抗HBV作用的中药活性部位是以中药苦豆子为原料，采用超临界二氧化碳萃取法萃取即得所述的具有抗HBV作用的中药活性部位；所述的超临界二氧化碳萃取法的具体条件为：以乙酸乙酯作为夹带剂。夹带剂的用量为苦豆子质量的10％～15％；萃取压力为15兆帕，萃取温度为35℃，流速为10升/小时，萃取时间为2.5小时。实施例2具有抗HBV作用的中药活性部位的制备具有抗HBV作用的中药活性部位是以中药苦豆子为原料，采用超临界二氧化碳萃取法萃取得到；所述的超临界二氧化碳萃取法的具体条件为：以乙酸乙酯作为夹带剂。夹带剂的用量为苦豆子质量的10％～15％；萃取压力为15兆帕，萃取温度为35℃，流速为10升/小时，萃取时间为2.5小时；进一步地，将经超临界二氧化碳萃取法萃取后得到的苦豆子萃取物再进行ODS柱层析；所述的ODS柱层析的具体方法为：将苦豆子萃取物上ODS柱，先用3倍柱体积的体积分数为45％的甲醇洗脱除杂；再用5倍柱体积的体积分数为75％的甲醇洗脱；收集体积分数为75％的甲醇洗脱部位，浓缩干燥即得所述的具有抗HBV作用的中药活性部位。对比例1中药活性部位的制备所述中药活性部位是以中药苦豆子为原料，采用超临界二氧化碳萃取法萃取得到；所述的超临界二氧化碳萃取法的具体条件为：以乙酸乙酯作为夹带剂。夹带剂的用量为苦豆子质量的10％～15％；萃取压力为15兆帕，萃取温度为35℃，流速为10升/小时，萃取时间为2.5小时；进一步地，将经超临界二氧化碳萃取法萃取后得到的苦豆子萃取物再进行ODS柱层析；所述的ODS柱层析的具体方法为：将苦豆子萃取物上ODS柱，先用3倍柱体积的体积分数为20％的甲醇洗脱除杂；再用5倍柱体积的体积分数为50％的甲醇洗脱；收集体积分数为50％的甲醇洗脱部位，浓缩干燥即得所述的中药活性部位。对比例1与实施例2的区别在于ODS柱层析的具体方法不同；因此，其富集的有效成分也不同。对比例1的洗脱条件为先用3倍柱体积的体积分数为20％的甲醇洗脱除杂；再用5倍柱体积的体积分数为50％的甲醇洗脱；收集体积分数为50％的甲醇洗脱部位；而实施例2的洗脱条件为先用3倍柱体积的体积分数为45％的甲醇洗脱除杂；再用5倍柱体积的体积分数为75％的甲醇洗脱；收集体积分数为75％的甲醇洗脱部位。实施例3中药活性部位抗HBV病毒活性测试实验分组：分别测试实施例1制备得到的具有抗HBV作用的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有抗HBV作用的中药活性部位的制备方法，其特征在于，以中药苦豆子为原料，采用超临界二氧化碳萃取法萃取得到；所述的超临界二氧化碳萃取法的具体条件为：萃取压力为10～30兆帕，萃取温度为30～40℃，流速为5～15升/小时，萃取时间为2～3小时。

【技术特征摘要】
1.一种具有抗HBV作用的中药活性部位的制备方法，其特征在于，以中药苦豆子为原料，采用超临界二氧化碳萃取法萃取得到；所述的超临界二氧化碳萃取法的具体条件为：萃取压力为10～30兆帕，萃取温度为30～40℃，流速为5～15升/小时，萃取时间为2～3小时。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的超临界二氧化碳萃取法的具体条件为：萃取压力为15兆帕，萃取温度为35℃，流速为10升/小时，萃取时间为2.5小时。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，还使用乙酸乙酯作为夹带剂。4.根据要求3所述的制备方法，其特征在于，所述夹带剂的质量用量为苦豆子质量的10％～15％。5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的苦豆子经超临界二氧化碳萃取法萃取后，将得到的苦豆子萃取物再进行ODS柱层析；所述的ODS柱层析的具体方法为：将苦豆子萃取物上ODS柱，先用体积分数为40～50％的甲醇洗脱除杂；再用体积分数为70～...

【专利技术属性】
技术研发人员：王国才，李药兰，张玉波，张晓丽，杨丽，陈能花，吴忠南，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：广东,44