用于诊断尿路上皮癌的尿液检测试剂盒制造技术

本发明专利技术公开一种用于诊断尿路上皮癌的尿液检测试剂盒，有捕获试剂、检测试剂、包被缓冲液、洗涤液、显色试剂及终止试剂，其特征在于所述捕获试剂为抗Neu5Gc一抗，所述检测试剂为抗Neu5Gc二抗。灵敏度高，即具有尿液脱落细胞学检查的优点，又克服了尿液脱落细胞学检查灵敏度低的问题，可用于对尿路上皮癌的早期筛查。

Urine detection kit for diagnosis of urothelial cancer

【技术实现步骤摘要】
用于诊断尿路上皮癌的尿液检测试剂盒
本专利技术属于癌症早期诊断领域，尤其是一种灵敏度高的用于诊断尿路上皮癌的尿液检测试剂盒。
技术介绍
癌症是严重危害人民身体健康的常见病之一。癌症早期阶段病人几乎没有任何明显症状，当病人有自觉症状到医院就诊时，往往癌症已发展到了中、晚期，导致很多癌症患者因错过了治疗良机而死亡。尿路上皮癌包括肾盂癌、膀胱癌、输尿管癌等，目前临床上最常用的检查方法为尿液脱落细胞学检查和膀胱镜检查。尿液脱落细胞学检查采用试剂盒进行，操作方便、病人痛苦少，缺点是敏感性较低且受主观因素影响较大，故有一定的误诊率（仍有10~40%假阴性）；而膀胱镜检查准确率相对较高，但具有创伤大、患者依从性低的缺点，且难以发现微小肿瘤灶。N-羟乙酰神经氨酸（Neu5Gc）是在哺乳动物体内表达的一种唾液酸，可参与并调节多种生物进程，但迄今为止并没有以Neu5Gc为标记物诊断尿路上皮癌的尿液检测试剂盒的相关报道。
技术实现思路
本专利技术是为了解决现有技术所存在的上述技术问题，提供一种灵敏度高的用于诊断尿路上皮癌的尿液检测试剂盒。本专利技术的技术解决方案是：一种用于诊断尿路上皮癌的尿液检测试剂盒，有捕获试剂、检测试剂、包被缓冲液、洗涤液、显色试剂及终止试剂，其特征在于所述捕获试剂为抗Neu5Gc一抗，所述检测试剂为抗Neu5Gc二抗。本专利技术是以Neu5Gc为标记物诊断尿路上皮癌的尿液检测试剂盒，其中的捕获试剂为抗Neu5Gc一抗，检测试剂为抗Neu5Gc二抗，灵敏度高，即具有尿液脱落细胞学检查的优点，又克服了尿液脱落细胞学检查灵敏度低的问题，可用于对尿路上皮癌的早期筛查。附图说明图1是本专利技术实施例的实验结果示意图。具体实施方式本专利技术的用于诊断尿路上皮癌的尿液检测试剂盒，有捕获试剂、检测试剂、包被缓冲液、洗涤液、显色试剂及终止试剂，其特征在于所述捕获试剂为抗Neu5Gc一抗，所述检测试剂为抗Neu5Gc二抗。其抗Neu5Gc一抗是用Neu5Gc免疫鸡所得到的抗体IgY，抗Neu5Gc二抗是用兔抗鸡所得到的抗体IgG。实验：（1）尿液样本的收集：晨取300mL尿液标本。（2）尿蛋白富集方法：通过过滤泵富集尿总蛋白。（3）检测①包被：用包被缓冲液稀释捕获试剂，100μL/well，4℃过夜，次日弃去孔内溶液，用洗涤液洗2次，每次5min；②加样：加稀释的尿总蛋白100μL，置37℃孵育1h，弃去孔内溶液，用洗涤液洗2次，每次5min；③加酶标抗体：于各反应孔中，加入检测试剂100μL，37℃孵育1h，用洗涤液洗2次，每次5min。④加显色液：加入现配显色溶液100μL/well，室温反应10~20min；⑤终止反应：与各孔加入终止液100μL。⑥检测指标的确定：标准曲线吸光度计算尿液中的Neu5Gc含量，判断被测样本中Neu5Gc含量是否在尿路上皮癌患者中Neu5Gc含量范围内，对受检者进行患病与否的判定。以本专利技术实施例的试剂盒对正常人及疑似患者（肾盂癌，膀胱癌）尿液进行检测，结果如图1所示。结果显示，正常人尿总蛋白中Neu5Gc的含量较低，其范围是0.63±0.22μg/mL；尿路上皮癌患者中，肾盂癌患者尿总蛋白Neu5Gc的含量最高，范围是53.28±4.56μg/mL，是正常人的84.57倍；膀胱癌患者尿总蛋白Neu5Gc的含量较高，范围是17.76±2.1μg/mL，是正常人的28.19倍，灵敏度明显高于现膀胱癌临床应用较多的阳性标记物核基质蛋白NMP22的20倍。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于诊断尿路上皮癌的尿液检测试剂盒，有捕获试剂、检测试剂、包被缓冲液、洗涤液、显色试剂及终止试剂，其特征在于所述捕获试剂为抗Neu5Gc一抗，所述检测试剂为抗Neu5Gc二抗。

【技术特征摘要】
1.一种用于诊断尿路上皮癌的尿液检测试剂盒，有捕获试剂、检测试剂、包被缓冲液、洗涤液、显色试...

【专利技术属性】
技术研发人员：李庆伟，逄越，滕洪明，
申请(专利权)人：辽宁师范大学，
类型：发明
国别省市：辽宁,21