一种鲍鱼血蓝蛋白提取方法技术

本发明专利技术具体涉及一种鲍鱼血蓝蛋白提取方法，特别涉及于生物技术领域。本发明专利技术运用我国鲍鱼的养殖资源，使用本发明专利技术的提取方法，可以由生鲜鲍鱼中提取完整鲍鱼蓝血蛋白，简便、高效地撷取高纯度蓝色澄清液于超低温下制成粉末，以满足血蓝蛋白产品的市场需求。

A Method for Extracting Hemocyanin from Abalone

【技术实现步骤摘要】
一种鲍鱼血蓝蛋白提取方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种鲍鱼血蓝蛋白提取方法。
技术介绍
血蓝蛋白是在某些软体动物、节肢动物(蜘蛛和甲壳虫）的血淋巴中发现的一种游离的蓝色呼吸色素。血蓝蛋白含两个直接连接多肽链的铜离子，与含铁的血红蛋白类似，它易于氧结合，也易与氧解离，是已知的惟一可与氧可逆结合的铜蛋白，氧化时呈青绿色，还原时呈白色。研究表明，血蓝蛋白是一种多功能蛋白，它不仅具有输氧功能，而且还与能量的贮存、渗透压的维持及蜕皮过程的调节有关。特别引起学术界重视的是，血蓝蛋白还具有酚氧化物酶活性和抗菌功能，被认为是节肢动物和软体动物中的一种重要的免疫分子，近年来成为国内外研究的热点领域，伴随着血蓝蛋白产品的市场需求也日益扩大。鲍鱼是名贵的“海珍品”之一，味道鲜美，营养丰富，被誉为海洋“软黄金”。鲍鱼是名贵的海洋食用贝类，被誉为“餐桌黄金，海珍之冠”，其肉质细嫩、营养丰富。由于鲍鱼的经济价值很高，国产鲍国十分重视鲍鱼的人工育苗和养殖。我国对鲍的利用，过去仅限于自然采捕。近20多年来，从南方到北方开展了鲍的人工育苗和规模化养殖。在辽宁、山东、福建等地，建设一批具有先进设施和生产技术的鲍鱼育苗场和养殖场，每年都可生产出相当数量的鲍苗和商品鲍鱼。我国的鲍鱼人工育苗和养殖，现已形成一套成熟的技术工艺和相当大的生产规模。本专利技术运用我国鲍鱼的养殖资源，简便、高效地获取血蓝蛋白以满足血蓝蛋白产品的市场需求。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种鲍鱼血蓝蛋白提取方法。为实现上述目的，本专利技术采用如下的技术方案：一种鲍鱼血蓝蛋白提取方法，其特征在于，包括以下工艺步骤：步骤（1）：清洗鲍鱼外围组织，用150ppm二氧化氯进行消毒灭菌；步骤（2）：使用灭菌后的刀具在鲍鱼圆柱与内脏边缘切口引流鲍鱼血液与淋巴液的混和液体；步骤（3）：将所述血液与淋巴液混和液体加入浓度为0.12%-0.18%乙二胺四乙酸作为抗凝血剂，温度3-7℃；步骤（4）：取出上述混和液体静置6-10小时；步骤（5）：将上述混合液体进行第一次离心，离心时间为15-20min，经过第一次离心后取上段澄清液进行第二次离心，离心时间为15-20min，滤除上层悬浮物质与血脂肪获得蓝色液体；步骤（6）：将蓝色澄清液进入薄膜过滤器进行脱盐去除盐分；步骤（7）：取澄清液注入不锈钢圆盘后进行预冻4小时；步骤（8）：进入真空冷冻干燥设备零下80-90度冷冻结晶时间72小时；步骤（9）：冷冻干燥完成后将结晶片移入低温研磨机制成粉末。作为优选地，所述鲍鱼为皱纹盘鲍、杂色鲍、耳鲍、羊鲍、台湾鲍中的一种。作为优选地，所述步骤（3）中乙二胺四乙酸的浓度为0.15%。作为优选地，所述步骤（5）中第一次离心和第二次离心的转速均为6000-10000r/min。作为优选地，所述步骤（6）中的薄膜过滤器的滤膜为生物薄膜、树脂薄膜中的一种。作为优选地，所述步骤（7）中澄清液注入不锈钢圆盘时每盘液体厚度不超过1cm。本专利技术的有益效果在于：本专利技术运用我国鲍鱼的养殖资源，使用本专利技术的提取方法，可以由生鲜鲍鱼中提取完整鲍鱼蓝血蛋白，简便、高效地撷取高纯度蓝色澄清液于超低温下制成粉末，以满足血蓝蛋白产品的市场需求。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术实施例中的技术方案进行进一步清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。实施例一首先，挑选新鲜的皱纹盘鲍为提取对象，清洗鲍鱼外围组织，用150ppm二氧化氯进行消毒灭菌；使用灭菌后的刀具在鲍鱼圆柱与内脏边缘切口引流鲍鱼血液与淋巴液的混和液体；将所述血液与淋巴液混和液体加入浓度为0.15%乙二胺四乙酸作为抗凝血剂，温度5℃；取出上述混和液体静置8小时；将上述混合液体进行第一次离心，转速为8000r/min，离心时间为17min，经过第一次离心后取上段澄清液进行第二次离心，转速为8000r/min，离心时间为17min，滤除上层悬浮物质与血脂肪获得蓝色液体；将蓝色澄清液进入薄膜过滤器进行脱盐去除盐分；取澄清液注入不锈钢圆盘每盘液体厚度不超过1cm预冻4小时；进入真空冷冻干燥设备零下85度冷冻结晶时间72小时；冷冻干燥完成后将结晶片移入低温研磨机制成粉末。实施例二首先，挑选新鲜的杂色鲍为提取对象，清洗鲍鱼外围组织，用150ppm二氧化氯进行消毒灭菌；使用灭菌后的刀具在鲍鱼圆柱与内脏边缘切口引流鲍鱼血液与淋巴液的混和液体；将所述血液与淋巴液混和液体加入浓度为0.12%乙二胺四乙酸作为抗凝血剂，温度3℃；取出上述混和液体静置6小时；将上述混合液体进行第一次离心，转速为6000r/min，离心时间为15min，经过第一次离心后取上段澄清液进行第二次离心，转速为6000r/min，离心时间为15min，滤除上层悬浮物质与血脂肪获得蓝色液体；将蓝色澄清液进入薄膜过滤器进行脱盐去除盐分；取澄清液注入不锈钢圆盘每盘液体厚度不超过1cm预冻4小时；进入真空冷冻干燥设备零下80度冷冻结晶时间72小时；冷冻干燥完成后将结晶片移入低温研磨机制成粉末。实施例三首先，挑选新鲜的耳鲍为提取对象，清洗鲍鱼外围组织，用150ppm二氧化氯进行消毒灭菌；使用灭菌后的刀具在鲍鱼圆柱与内脏边缘切口引流鲍鱼血液与淋巴液的混和液体；将所述血液与淋巴液混和液体加入浓度为0.18%乙二胺四乙酸作为抗凝血剂，温度7℃；取出上述混和液体静置10小时；将上述混合液体进行第一次离心，转速为10000r/min，离心时间为20min，经过第一次离心后取上段澄清液进行第二次离心，转速为10000r/min，离心时间为20min，滤除上层悬浮物质与血脂肪获得蓝色液体；将蓝色澄清液进入薄膜过滤器进行脱盐去除盐分；取澄清液注入不锈钢圆盘每盘液体厚度不超过1cm预冻4小时；进入真空冷冻干燥设备零下90度冷冻结晶时间72小时；冷冻干燥完成后将结晶片移入低温研磨机制成粉末。实施例四首先，挑选新鲜的羊鲍为提取对象，清洗鲍鱼外围组织，用150ppm二氧化氯进行消毒灭菌；使用灭菌后的刀具在鲍鱼圆柱与内脏边缘切口引流鲍鱼血液与淋巴液的混和液体；将所述血液与淋巴液混和液体加入浓度为0.13%乙二胺四乙酸作为抗凝血剂，温度4℃；取出上述混和液体静置7小时；将上述混合液体进行第一次离心，转速为7000r/min，离心时间为16min，经过第一次离心后取上段澄清液进行第二次离心，转速为7000r/min，离心时间为16min，滤除上层悬浮物质与血脂肪获得蓝色液体；将蓝色澄清液进入薄膜过滤器进行脱盐去除盐分；取澄清液注入不锈钢圆盘每盘液体厚度不超过1cm预冻4小时；进入真空冷冻干燥设备零下83度冷冻结晶时间72小时；冷冻干燥完成后将结晶片移入低温研磨机制成粉末。实施例五首先，挑选新鲜的台湾鲍为提取对象，清洗鲍鱼外围组织，用150ppm二氧化氯进行消毒灭菌；使用灭菌后的刀具在鲍鱼圆柱与内脏边缘切口引流鲍鱼血液与淋巴液的混和液体；将所述血液与淋巴液混和液体加入浓度为0.17%乙二胺四乙酸作为抗凝血剂，温度6℃；取出上述混和液体静置9小时；将上述混合液体进行第一次离心，转速为9000r/min，离心时间为19min，经过第一次离心后取上段澄清液进行第二次离心，转速为9000r/min，离心时间为19min，滤本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种鲍鱼血蓝蛋白提取方法，其特征在于，包括以下工艺步骤：步骤（1）：清洗鲍鱼外围组织，用150ppm二氧化氯进行消毒灭菌；步骤（2）：使用灭菌后的刀具在鲍鱼圆柱与内脏边缘切口引流鲍鱼血液与淋巴液的混和液体；步骤（3）：将所述血液与淋巴液混和液体加入浓度为0.12%‑0.18%乙二胺四乙酸作为抗凝血剂，温度3‑7℃；步骤（4）：取出上述混和液体静置6‑10小时；步骤（5）：将上述混合液体进行第一次离心，离心时间为15‑20min，经过第一次离心后取上段澄清液进行第二次离心，离心时间为15‑20min，滤除上层悬浮物质与血脂肪获得蓝色液体；步骤（6）：将蓝色澄清液进入薄膜过滤器进行脱盐去除盐分；步骤（7）：取澄清液注入不锈钢圆盘后进行预冻4小时；步骤（8）：进入真空冷冻干燥设备零下80‑90度冷冻结晶时间72小时；步骤（9）：冷冻干燥完成后将结晶片移入低温研磨机制成粉末。

【技术特征摘要】
1.一种鲍鱼血蓝蛋白提取方法，其特征在于，包括以下工艺步骤：步骤（1）：清洗鲍鱼外围组织，用150ppm二氧化氯进行消毒灭菌；步骤（2）：使用灭菌后的刀具在鲍鱼圆柱与内脏边缘切口引流鲍鱼血液与淋巴液的混和液体；步骤（3）：将所述血液与淋巴液混和液体加入浓度为0.12%-0.18%乙二胺四乙酸作为抗凝血剂，温度3-7℃；步骤（4）：取出上述混和液体静置6-10小时；步骤（5）：将上述混合液体进行第一次离心，离心时间为15-20min，经过第一次离心后取上段澄清液进行第二次离心，离心时间为15-20min，滤除上层悬浮物质与血脂肪获得蓝色液体；步骤（6）：将蓝色澄清液进入薄膜过滤器进行脱盐去除盐分；步骤（7）：取澄清液注入不锈钢圆盘后进行预冻4小时；步骤（8）：进入真空冷冻干燥设备零下80-90度冷冻结晶时...

【专利技术属性】
技术研发人员：江铭福，高春喜，蓝登杭，刘忠明，江新辉，
申请(专利权)人：福州日兴水产食品有限公司，
类型：发明
国别省市：福建,35